黑龙江地区乙型肝炎病毒耐药变异与基因型

目的:探讨黑龙江地区乙型肝炎病毒发生YMDD基因变异与HBV基因型的关系. 方法:首先HBVA-F6个主要基因型特异性多引物对巢式PCR法对106例接受拉米夫定抗病毒治疗患者的血清HBV DNA进行基因分型和分析.再采用实时荧光PCR法对标本进行YMDD变异检测. 结果:在106例标本中有8例为B基因型,其阳性率为7.6%;有94例为C基因型,其阳性率为88.7%:4例为D基因型,其阳性率为3.8%.从106例血清标本中检测出63例YMDD发生变异占59.4%,其余43例为野生型YMDD.在8例B基因型的标本中,有5例发生YMDD变异,变异率为62.5%:在94例C基因型的标本中,有55例发生YMDD变异,变异率为58.5%. HBV B,C两基因型间的YMDD变异率无显著性差异(P>0.05).在5例B基因型YMDD变异的标本中,有1例发生YIDD变异(20%),其余4例发生YVDD (YMDD+YVDD)变异占80%;在55例C基因型YMDD 变异的标本中,有26例发生YIDD(YMDD+YIDD)变并占47.3%,17例发生YVDD(YMDD+YVDD)变异占30.9%,12例发生YIDD+YVDD变异占21.8%.HBV B,C两基因型间的YMDD不同变异类型发生率无显著性差异(P>0.05). 结论:在黑龙江地区拉米夫定抗病毒治疗2—4 a,HBV YMDD变异率为59.4%;HBV B,C基因型标本间发生YMDD变异率及基因变异类型均无显著性差异.

汉坦病毒通过线粒体途径诱导Vero E6细胞凋亡

目的探讨汉坦病毒诱导非洲绿猴肾细胞Vero E6凋亡的机制。方法汉坦病毒感染VeroE6细胞后应用Western blot检测胞浆内汉坦病毒核心蛋白(N蛋白)的表达情况,应用DNA-ladder和流式细胞术检测汉坦病毒感染Vero E6细胞诱导凋亡的发生,用Western blot方法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Cyt-c及Caspase-3的表达情况。结果汉坦病毒感染Vero E6细胞后,在胞浆内检测出汉坦病毒N蛋白。流式细胞仪检测到凋亡峰,DNA电泳可见典型的DNA梯带。Western blot显示随着感染时间的延长,Cyt-c蛋白及Caspase-3酶原活化片段表达增加,Bcl-2蛋白表达减少。结论汉坦病毒通过线粒体途径诱导Vero E6细胞凋亡。