临床前大鼠药物代谢酶CYP2D6亚型HPLC技术研究

目的:建立测定临床前大鼠药物代谢酶2D6亚型活性的 HPLC 方法。方法:HPLC 法测定大鼠尿液及肝微粒体中探针药物右美沙芬(DM)、其代谢物去甲右美沙芬(DX)及内标物丁丙诺啡(BP)的含量。采用 Hypersil-C_6H_5柱(250mm×4.6mm,5μm),以0.01mol-L^(-1)磷酸二氢钾-0.01mol·L^(-1)已烷磺酸钠-乙腈-甲醇(33:33:80:54,v/v,pH4.0)为流动相,流速1.0mL·min^(-1),荧光检测器激发波长280nm,发射波长310nm。结果:本方法稳定性良好,尿样 DM 在0.04～1.20mg·L^(-1)内线性良好(r=0.9981),DX 在3.12～100.0mg·L^(-1)内线性良好(r=0.9971)。肝微粒体重组样品 DM 在30.0～180.0mmol·L^(-1)内线性良好(r=0.9980),DX 在5.0～50.0mg·L^(-1)内线性良好(r=0.9976),日内、日间样品 RSD 均小于10%,样品-20℃保存30d 后测定稳定良好,体外肝微粒体实验 RSD 小于10%。结论:本方法稳定、准确,可用于新药临床前药物代谢酶途径及药物相互作用研究。

三种剂量国产盐酸塞利洛尔片健康人体内药物动力学及参数相关性研究

目的：测定盐酸塞利洛尔在人体内药代动力学特性及其３种不同剂量的药代动力学参数变化规律。方法：健康志愿者９名，３×３拉丁方设计，单剂量ｐｏ１００，２００，４００ｍｇ盐酸塞利洛尔片，采用反相高效液相色谱法测定不同时间的血药浓度，在计算机上以ＭＣＰＫＰ程序拟合，求算药代动力学参数。结果：１００，２００，４００ｍｇ国产盐酸塞利洛尔片的ｔ１／２Ｋ，Ｋ，ｔｍａｘ，ｃｍａｘ，ＡＵＣ０～∞分别为３．３７，３．４５和３．５６ｈ，０．２４，０．２１和０．２０ｈ－１，３．６４，３．３８和３．８７ｈ，１７７．５５，５０１．４和１１８８．５８ｎｇ·ｍｌ－１，１６１５．４１，４５０８．３８和１０８２８．５５μｇ·ｈ－１。结论：经方差分析，三剂量组的ｔ１／２ｋ，Ｋ，ｔｍａｘ等参数无显著差异（Ｐ＞０．０５），ｃｍａｘ，ＡＵＣ０～∞均不呈倍数变化。

了哥王中西瑞香素的提取分离及抗肿瘤作用研究

研究西瑞香素(daphnoretin)的体外抗肿瘤作用。采用溶剂提取法、硅胶柱层析、重结晶法从中药了哥王中分离西瑞香素并用薄层色谱法和高效液相色谱法测定纯度。应用MTT法观察不同浓度的西瑞香素对体外培养的人肺腺癌细胞AGZY-83-a、人喉癌细胞Hep2和人肝癌细胞HepG2的抑制作用。采用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察细胞形态的变化并检测细胞内钙离子浓度。经紫外光谱、质谱和核磁共振光谱确定提取分离西瑞香素的结构,其纯度为99.75%。西瑞香素对体外培养的人肺腺癌细胞AGZY-83-a、人喉癌细胞Hep2和人肝癌细胞HepG2均有明显抑制作用,且呈浓度依赖性。其对上述三种肿瘤细胞的半数抑制浓度IC50值分别为8·73、9.71和31.34μg/mL。激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)检测结果表明应用西瑞香素处理肿瘤细胞72h后,细胞内钙离子浓度显著升高(P<0.05)。西瑞香素体外对人肺腺癌细胞AGZY-83-a、人喉癌细胞Hep2和人肝癌细胞HepG2均有明显抑制作用,机制可能与细胞内钙超载有关。

格列吡嗪缓释胶囊人体相对生物利用度研究

目的 研究格列吡嗪缓释胶囊在正常人体内相对生物利用度。方法 采用反相高效液相色谱法测定 16名健康男性志愿者单剂量po 10mg和多剂量po格列吡嗪缓释胶囊及控释片后的血浆药物浓度 ,计算两制剂的药代动力学参数及相对生物利用度 ,以cmax,AUC0～ 48等指标 ,利用方差分析、双单侧t检验及 (1- 2α)置信区间分析判定两制剂生物等效性。结果 两制剂药 时曲线有双峰 ,连续服药 4d达稳态 ,单剂量与多剂量给药主要药代动力学参数经统计分析无显著差异 (P >0 .0 5 )。结论 格列吡嗪缓释胶囊与控释片生物等效。

布洛芬缓释胶囊的体内血药浓度及体外溶出度的相关性研究

目的 测定布洛芬缓释胶囊中布洛芬的血药浓度 ,通过布洛芬缓释胶囊的体外溶出度实验 ,利用统计学方法研究其体内外参数的相关性、并提供质控方法。方法 采用高效液相色谱法测定血药浓度。溶出度采用中国药典 1995年版二部附录XC第一法测定 ,用美国HansonResearch生产的全自动溶出度测定仪操作。结果 布洛芬体外溶出度累积百分率与体内吸收百分率建立一元线性回归方程 :F=6 .2 2 0 5x +1.0 90 1(r=0 .975 5 ) ,线性范围 4.6～ 2 4.6 μg·mL-1。

阿莫西林舒巴坦酯片人体药代动力学及相对生物利用度研究

目的 :研究阿莫西林舒巴坦酯片中阿莫西林和舒巴坦的药代动力学及相对生物利用度。方法 :将20名健康志愿受试者随机分为两组 ,采用自身交叉设计 ,单剂量口服国产的阿莫西林舒巴坦酯片和进口的泰霸猛LBL500 片各2片 (每片含阿莫西林250mg、舒巴坦250mg) ,采用反相高效液相色谱法同时测定血浆药物浓度。结果 :国产制剂与进口制剂阿莫西林Tmax 分别为(1 04±0 26)h、(1 10±0 28)h ,Cmax 分别为 (5 16±1 30)mg/L、(5 25±1 21)mg/L ,AUC0～∞分别为 (13 30±3 12)mg/(h·L)、(13 33±3 53)mg/ (h·L) ;舒巴坦的Tmax 分别为 (0 80±0 10)h、 (0 81±0 11)h ,Cmax 分别为 (5 73±1 44)mg/L、(5 70±1 46)mg/L;AUC0～∞分别为 (13 25±2 41)mg/(h·L )、(13 28±2 26)mg/(h·L)。结论 :国产阿莫西林舒巴坦酯片与进口的泰霸猛LBL500 片为生物等效制剂。

双黄连注射液与注射用头孢唑啉钠等体外配伍稳定性研究

目的研究双黄连注射液与注射用头孢唑啉钠等药物体外配伍的稳定性。方法考察双黄连注射液与注射用头孢唑林钠、地塞米松磷酸钠注射液、利巴韦林注射液在室温下配伍后物理外观、pH值、微粒的变化。结果双黄连注射液与注射用头孢唑林钠、地塞米松磷酸钠注射液、利巴韦林注射液溶液两药或多药配伍后外观澄明、pH值无明显变化,但双黄连注射液与注射用头孢唑啉钠及地塞米松磷酸钠注射液配伍后0.5 h出现少量絮状悬浮物,且直径≥25μm微粒数量显著增加。结论双黄连注射液可以与注射用头孢唑啉钠、地塞米松磷酸钠注射液、利巴韦林注射液二联应用,不宜多联应用。

苦参碱类生物碱的体外抑菌、抑病毒及诱生干扰素的实验研究

苦参碱类生物碱对G+球菌、G- 杆菌等 12种菌 (130株 )均有明显抑菌作用 ;对咽喉部常见病毒CB、Adv、RSV的抑病毒浓度最高达 1/40 96 0 g/ml,对流感、副流感病毒也有抑制作用 ;有诱生干扰素的作用 ,当试剂稀释为 4 - 2 、4 - 3时 ,诱生IFN效价为 10 2 4。

中药提取物9901的体外抗肿瘤活性研究

目的 用体外培养法研究中药提取物 990 1对肿瘤HeLa细胞生长的抑制作用和作用机制。方法 采用MTT法和激光扫描共聚焦显微镜进行研究。结果 HeLa细胞在 990 1处理 3天后 ,测得该药的IC50 为 5 .12 μg/ml。用不同浓度的 990 1处理HeLa细胞 48h后 ,用PI染色 ,HeLa细胞核有形态变化 ,DNA含量明显减少 ,经统计学处理 ,与对照组间有显著性差异。结论 中药提取物 990 1可有效抑制HeLa细胞的生长 ,通过影响细胞的DNA而发挥作用。

奥扎格雷钠口服溶液人体尿药浓度研究

目的建立测定人尿中奥扎格雷钠浓度的HPLC方法;通过测定12名健康受试者单次po200mg奥扎格雷钠口服溶液后体内的尿药浓度,考察奥扎格雷钠体内代谢过程。方法采用Diamonsil C18柱(4.6mm×150mm,5μm),磷酸盐缓冲液(pH=3.0)-乙腈(94:6)为流动相,流速为1.5mL.min-1,咖啡因为内标,紫外检测波长为276nm。结果奥扎格雷钠在0.01～10mg.L-1内线性关系良好,r=0.9962;健康受试者服药后12h内有(41.77±15.47)%的奥扎格雷钠从尿中排出。结论此方法灵敏、准确、稳定,可用于奥扎格雷钠体内代谢研究;奥扎格雷钠主要以原型从尿中排出。

高效液相色谱法测定精氨匹林在人血浆中的药物浓度

目的 :建立高效液相色谱法测定精氨匹林在人血浆中的药物浓度的方法。方法 :色谱柱采用YWGC18 柱 (4 6mm×250mm ,10μm) ,柱温控制在33℃ ,流动相为纯水 -乙腈 (96∶4 ,V/V)。血浆样品采用氯仿 -异丙醇 (95∶5 ,V/V)提取。结果 :精氨匹林的线性范围为0 97～125 0mg/L ,最低检测浓度为0 97mg/L。高、中、低3种浓度 (125 0、31 25、1 95mg/L)的日内、日间变异均小于10 %。本方法应用于8名健康受试者的血药浓度测定 ,获得了其药代动力学参数。结论 :本方法灵敏、精确、稳定 。

糖尿病大鼠冠状动脉超氧阴离子生成部位的研究

目的探讨糖尿病大鼠高血糖状态下冠状动脉超氧阴离子(O2-)生成部位。方法用链脲佐菌素制备大鼠糖尿病模型后取冠状动脉和在高糖下培养大鼠冠状动脉24 h,免疫荧光组织化学染色及激光扫描共聚焦显微镜检测冠状动脉中O2-生成部位。结果糖尿病大鼠冠状动脉内皮组织、外膜组织和平滑肌组织O1-生成量均较对照组升高,二者比较差异有统计学意义(t内=24．719,P<0．01;t外=14．206,P<0．01;t平:11．784, P<0．01)。高糖培养24 h,大鼠冠状动脉内皮组织O2-生成量比对照组升高,二者比较差异有统计学意义(t内= 2．183,P<0．05);外膜组织和平滑肌组织O2-生成量与对照组比较,差异无统计学意义(t外=1.439,P>0．05;t平= 1．662,P>0．05)。结论糖尿病短期高血糖状态下,O2-只产生于内皮细胞,长期高血糖状态下,O2-由内皮细胞经跨细胞转移转运到平滑肌细胞。

精氨匹林注射剂人体药动学研究

目的 研究单剂量肌肉注射精氨匹林 5 0 0mg在 8名健康受试者中的药动学。方法 采用HPLC ,检测波长 2 37nm ,测定血药浓度。结果 精氨匹林注射剂主要人体药动学参数为tmax实 =(2± 0 .0 0 )h ,cmax实 =(6 6 .0 2± 16 .2 7)mg·L-1,t1/ 2 =(1.4 1± 0 .0 5 )h ,AUC0～t=197.76mg·h·L-1。

喉咽清水蜜丸的研制及其药效学和毒理学研究

目的 :研究喉咽清水蜜丸的制备、质量控制方法及其药效学和毒理学。方法 :采用高效液相色谱法测定喉咽清水蜜丸中甘草酸的含量 ;对制剂的抗炎、镇痛、祛痰作用进行研究 ;对制剂的急性毒性和长期毒性进行研究。结果 :喉咽清水蜜丸中甘草酸的线性范围为0 0384～0 615mg/ml ,回收率为 (99 20±1 75) %。本制剂具有抗炎、镇痛、祛痰作用 ,未见明显急性毒性和长期毒性。结论 :本制剂制备工艺简单 ,质量可控 ,疗效确切 ,安全性较高。

反相高效液相色谱法测定氨溴索的血浆药物浓度

目的：建立高效液相色谱法测定氨溴索血浆药物浓度。方法：色谱柱采用Nova-pakC18柱（3.9mm×100mm,4um)。柱温控制在40℃，流动相为乙腈-甲醇-磷酸盐缓冲液（0.01M,pH7.0)-四氢呋喃（35：35：275：2.5,V/V)，检测波长为248nm,血样采用乙醚提取，再用稀盐酸反提的方法。结果：线性范围为5.2-207.8ng/ml，最低检测浓度为5.2ng/ml，高、中、低浓度207.8,52.0,10.4ng/ml三种浓度的平均回收率为（98.90±4.57)%，日内，日间变异均小于8%。结论：本方法灵敏，精确，稳定，适用于氨溴索的生物样本的测定和药代动力学的研究。并应用于10名健康受试者的血药浓度测定。获得了其药代动力学的参数。

中药518对人白血病细胞K_(562)、NB_4作用研究

目的 研究中药 5 18对K562 、NB4 细胞的作用 ;并比较 5 18A、5 18B药效。方法 用台盼蓝染色、光镜观察、流式细胞仪方法 ,观察 5 18A、5 18B处理K562 、NB4 细胞后形态学、生化指标的改变。结果 台盼蓝染色法证实 5 18A、5 18B对K562 、NB4 细胞有抑制作用 ,抑制率与药物浓度正相关 ;光镜下可见给药后细胞形态学改变 ;流式细胞仪检测显示中药 5 18对K562 细胞作用 48h后出现凋亡峰。结论 5 18A、5 18B对K562 、NB4 细胞有抑制增殖作用 ,诱导K562 细胞凋亡 ,5 18A药效优于 5 18B。

格列吡嗪胶囊人体药动学及相对生物利用度的研究

目的研究格列吡嗪胶囊人体药物代谢动力学及相对生物利用度。方法用ＨＰＬＣ法测定１０名受试者 单剂量交叉口服５ｍｇ格列吡嗪胶囊和片剂后的血药浓度，ＭＣ－ＰＫＰ药动学程序拟合，得药动学参数，计算胶囊剂的 相对生物利用度（Ｆ）。结果胶囊剂的Ｃｍａｘ为（４５６±６０）ｎｇ／ｍｌ、Ｔｍａｘ为（２．９５±０．６）ｈ、ＡＵＣ为（２３３５±１８０）ｈ·ｎｇ／ｍｌ。以 上参数经双单侧 ｔ检验等统计分析，与片剂比无显著差异。 Ｆ值为（１０３±４）％。结论格列吡嗪（２．９５±０．６）ｈ血 药浓度达高峰，峰浓度为（４５６±６０）ｎｇ／ｍｌ。且胶囊与片剂为生物等效制剂。

疏血通注射液对大鼠细胞色素P450酶6种亚型活性的影响

目的用Cocktail探针药物法,研究疏血通注射液对大鼠细胞色素P450酶(CYP450)6种亚型活性的影响。方法将Wistar雄性大鼠随机分组,实验组给予疏血通注射液,空白组给予生理盐水,诱导7 d,分别以咖啡因、甲苯磺丁脲、奥美拉唑、美托洛尔、氯唑沙宗、氨苯砜作为CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1、CYP3A1/2的探针药物。HPLC法检测探针药物的血药浓度,DAS软件估算药动学参数。结果与空白组相比,咖啡因和氨苯砜的t1/2、AUC0-t、AUC0-∞均显著增大,CL/F显著降低(P<0.05);氯唑沙宗的AUC0-t、AUC0-∞显著降低,CL/F显著增大(P<0.05);而甲苯磺丁脲、奥美拉唑、美托洛尔的药代动力学参数无显著性差异。结论疏血通注射液对大鼠CYP1A2、CYP3A1/2亚型的活性有抑制作用,能诱导CYP2E1亚型的活性,而对CYP2C9、CYP2C19和CYP2D6亚型的活性无显著影响。