黑龙江省实验动物管理现状与发展对策

实验动物作为生命科学研究、医药发展不可替代的基础支撑条件及战略性生物资源,其重要性日益显现。本文在总结国内实验动物行业发展的基础上,重点分析、阐述了黑龙江省实验动物发展现状及管理上存在的问题,并提出了发展对策。通过完善黑龙江省实验动物相关法规、规章,加强行政许可管理,改善生产条件,提升质量,保障运输与供应,支持实验动物科学研究,促进人才培养,加强生物安全管控,从而驱动实验动物行业发展,提高其对生物医药行业的支撑保障能力,为促进地方经济、社会、民生乃至科技发展作出应有的贡献。

提高实验用家兔产仔数的技术及管理

常用的实验用家兔主要有日本大耳白兔和新西兰兔两个品种，因其繁殖力强，年平均产仔5—7胎，每胎产仔约5-12只，普通环境下就能满足实验用家兔生长的基本要求，因而在科研、教学、移植等各种实验中广泛使用。但由于家兔的生长繁殖受温度、湿度、光照、噪音等多方面的影响，其最主要的影响因素是饲养管理水平及配种技术，

奶牛维生素A营养状况的调查研究

为了解双城地区、安达地区奶牛维生素Ａ 的营养状况，采用微量荧光法对饲草、饲料、血清中维生素Ａ、β－ 胡萝卜素含量进行测定，并探讨了预防维生素Ａ 营养不良的方法。结果表明：双城地区、安达地区奶牛维生素Ａ营养不良。

上皮条件性敲除Bmp2和Bmp4对小鼠牙根长度的影响

目的:观察在上皮组织中条件性敲除Bmp2和Bmp4基因对小鼠牙根发育的影响,为深入研究牙根发育的分子机制提供前期基础。方法:利用Jackson Laboratory推荐的引物,对鼠尾组织进行聚合酶链式反应,鉴定小鼠基因型。取出小鼠下颌骨组织,经过相应处理后,进行石蜡包埋,用于HE染色。在牙根发育早期过程中比较Bmp2和Bmp4基因敲除组(double gene knockout,DcKO)与同源对照组(control,Con)小鼠的上皮根鞘(hertwig's epithelial root sheath,HERS)和根部成牙本质细胞的形态差异,在牙根发育完成后经小动物高清X线观察两组小鼠牙根状况。结果:出生后0 d,两组小鼠牙根尚未发育;出生后7 d,与对照组相比,实验组小鼠根部成牙本质细胞极化更差;出生后14 d,DcKO小鼠的HERS组织比Con组断裂程度低。牙根发育完成后,21 d和28 d的X线结果显示实验组小鼠的牙根比对照组短,根部髓腔比对照组小鼠大。结论:Bmp2和Bmp4基因参与小鼠牙根发育,Bmp2和Bmp4基因缺失可导致DcKO组小鼠的牙根变短。

抗人β-HCG单克隆抗体的制备及化学发光检测方法的建立

目的:制备人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)单克隆抗体,建立人β-HCG双抗体夹心CLIA检测方法。方法:用人β-HCG抗原免疫小鼠,通过细胞融合、筛选后得到杂交瘤细胞株,然后将细胞株扩大培养并纯化上清液获得抗体,测定抗体亲和力、特异性及表位,最后建立双抗体夹心CLIA方法。结果:获得4株抗人β-HCG的杂交瘤细胞株(β-1-1、β-2-1、β-3-1、β-4-1)。用β-1-1和β-2-1建立的双抗体夹心法的检测范围为0.5 mIU/mL-800 mIU/mL,灵敏度0.23 mIU/mL,检测结果的相对偏差均在±10%内,回收率在90%以上。结论:本研究最终成功制备了抗人β-HCG mAb,建立了定量检测人β-HCG的双抗体夹心CLIA方法,为β-HCG检测及疾病的诊断奠定基础。

蓝莓花色苷对2型糖尿病小鼠糖脂代谢紊乱和肠道菌群的影响

目的探讨蓝莓花色苷对2型糖尿病小鼠糖脂代谢紊乱和肠道菌群的调节作用。方法选取40只小鼠随机分为对照组、高糖高脂组、高糖高脂+蓝莓花色苷组以及高糖高脂+二甲双胍组,每组各10只。对照组和高糖高脂组小鼠采用生理盐水灌胃,高糖高脂+二甲双胍组采用盐酸二甲双胍0.3 g/kg灌胃,高糖高脂+蓝莓花色苷组采用蓝莓花色苷提取物10 mL·kg^(-1)给予灌胃,8周后检测小鼠空腹血糖(FBG)、血清C肽(C-P)、果糖胺(FMN),甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平,并通过16s rDNA扩增测序方法分析高糖高脂+蓝莓花色苷组和高糖高脂组小鼠肠道菌群的差异。基于Operational Taxonomic Units(OTU)聚类分析结果,进行多种多样性指数分析,主要包括群落丰富度指数(Chao1和Ace)、群落多样性指数(Shannon)和测序深度指数(Observed species);基于分类学信息,在各个分类水平上进行群落结构的统计分析,并对样本之间进行beta多样性分析。结果高糖高脂+蓝莓花色苷组小鼠实验后空腹血糖(FBG)水平显著下降(P<0.05)。与高糖高脂组相比,高糖高脂+蓝莓花色苷组小鼠FMN、TG和LDL-c水平均显著下降(P<0.05),SOD水平明显升高(P<0.05)。高糖高脂+蓝莓花色苷组小鼠肠道菌群指数Chao1、Ace、Shannon和Observed species相比高糖高脂组增加,但差异无统计学意义(P>0.05)。肠道菌群构成结合LEfSe分析结果显示,相比高糖高脂组,高糖高脂+蓝莓花色苷组小鼠在拟杆菌属、理研菌科以及罗氏菌属的丰度构成上显著升高,紫单胞菌科丰度下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论蓝莓花色苷对糖尿病小鼠的肠道菌群具有调节作用,其可以提高肠道菌群丰度,显著改善小鼠血糖、血脂以及氧化应激水平。

不同周龄Balb/c小鼠脏器质量及其变化趋势分析

目的:测定不同周龄Balb/c小鼠主要脏器质量、脏器系数,并进行比较。方法:取120只3周龄、5周龄、7周龄的Balb/c小鼠,雌雄各半,精确测量小鼠体重和主要脏器质量,计算脏器系数。结果:①雌性与雄性Balb/c小鼠脏器质量相比较:3周龄时肝、脾有显著差异(P<0.05);5周龄时肝有非常显著差异(P<0.01),脾、肺有显著差异(P<0.05);7周龄时肝、肺及双肾有非常显著差异(P<0.01),心、脾有显著差异(P<0.05)。②雌性与雄性Balb/c小鼠脏器系数相比较:3周龄时肝、脾有显著差异(P<0.05);5周龄时肝、脾有非常显著差异(P<0.01),膀胱有显著差异(P<0.05);7周龄时肺、双肾有非常显著差异(P<0.01),脾、膀胱有显著差异(P<0.05)。结论:随着周龄的增长,Balb/c雌、雄性小鼠之间,存在差异的脏器也在增多。