NF-κB抑制对宫颈癌HeLa细胞放疗敏感性影响的观察

目的:探讨抑制核转录因子κB(NF-κB)表达对宫颈癌HeLa细胞放疗敏感性的影响。方法:通过对HeLa细胞加入NF-κB的抑制剂100μmol/LPDTC或2μmol/L PS-341,均作用2 h来抑制NF-κB的表达。将HeLa细胞分为PDTC组、PS-341组及对照组加入等量生理盐水。各组均给予直线加速器照射,剂量分别为0、2、4和6 Gy。用蛋白质印迹法来观察细胞核内NF-κB含量的变化,用TUNEL法来检测细胞的凋亡,用MTT法检测细胞增殖。结果:辐射可以使HeLa细胞内NF-κB的表达增多,PDTC及PS-341均可以抑制由射线介导NF-κB的增加。在0 Gy条件下对照组与PDTC组及PS-341组HeLa细胞的凋亡指数分别为3%、12%和15%,两实验组的凋亡指数均高于对照组,P<0.01;6 Gy条件下实验组细胞的凋亡指数都高于同条件下对照组,P<0.01。结论:在宫颈癌HeLa细胞中,PDTC及PS-341均可抑制NF-κB的表达从而增加了由射线介导的细胞凋亡,增加HeLa细胞的放疗敏感性。

Egr-1基因上游信号级联通路与肿瘤放射治疗相关的研究进展

转录调控基因Egr-1与细胞的多项生命活动相关,并在肿瘤的发生发展中具有一定作用,现就Egr-1基因上游信号级联及其在肿瘤及肿瘤放射治疗中的意义进行综述。

侵袭性伪足在泌尿系统恶性肿瘤侵袭性生长中的作用及研究进展

侵袭性伪足指的是恶性肿瘤细胞膜形成的一种向外凸起的、具有降解细胞外基质能力的的细胞-细胞外基质接触性结构。侵袭性伪足在癌细胞侵袭正常组织、造成局部或远隔转移的过程中起到关键作用。近年来随着研究的深入,侵袭性伪足的各个关键成分逐渐被发现,如何调控这些关键成分从而抑制恶性肿瘤侵袭受到了广泛关注。本文就近年来泌尿系统恶性肿瘤中侵袭性伪足的研究进展进行综述。

不能手术的食管癌放疗联合HCPT化疗

目的比较放疗同时联合HCPT化疗和单纯放疗治疗食管癌的疗效和毒性。方法2003年9月-2005年12月在我院放疗科治疗的52例不能手术的食管癌患者进入本试验。分为两组:单放组26例,化放组26例。均为鳞癌。所有病例均采用普放,选用10 MV的X射线,单次剂量均在1.9 Gy,1次/日,5次/周,放疗总剂量为60-70 Gy/6-7周;化放组于放疗第一天开始化疗,HCPT:10 mg,d1-10或d1-15 qd静点。结果单放组和化放组吞咽困难缓解所需时间分别为:20.72±7.14天和15.08±5.34天,有显著性差别(P<0.05);根据X线评价标准,单放组和化放组两组近期疗效有显著差别(P<0.05),两组完全缓解率(CR/n)分别为38.46%和73.08%,有统计学意义(P<0.05);两组中位生存时间分别为6个月和16个月;两组1年生存率分别为13.15%和55.15%,从生存曲线的比较来看,两组的生存时间具有显著性差别(P<0.05);两组放射性食管炎发生率和白细胞下降的比较均无差别(P>0.05)。结论化放组的吞咽困难缓解所需时间较单放组短,近期疗效优于单放组,完全缓解率高于单放组,化放组的生存时间较单放组长,化放组的1年生存率高于单放组。

1,25-二羟基维生素D_3对鼠宫颈癌免疫作用的研究

目的探讨1,25-二羟基维生素D3(1,25-(OH)2D3)对裸鼠宫颈癌移植瘤生长的抑制作用。方法制备BALC/c裸鼠皮下宫颈癌模型20只,随机分为4组:1,25-(OH)2D3组、单纯放疗组、1,25-(OH)2D3+放疗组及对照组,每组5只。观察各组裸鼠肿瘤的生长情况、裸鼠的一般情况,测量肿瘤直径并计算瘤体积。断颈处死裸鼠,天平称量肿瘤的重量。测定引流淋巴结中单个核细胞中CD4+、CD4+CD25+含量。结果 1,25-(OH)2D3组及单纯放疗组对肿瘤生长均有抑制作用,二者联合作用抑制更显著。1,25-(OH)2D3组、单纯放疗组及1,25-(OH)2D3+放疗组抑瘤率分别为34.8%、52.1%、54.1%。1,25-(OH)2D3干预后CD4+、CD4+CD25+含量与对照组及放疗组差异无统计学意义,而CD4+CD25+/CD4+在1,25-(OH)2D3组与对照组相比差异显著(P<0.05),1,25-(OH)2D3+放疗组与对照组相比差异显著(P<0.01)。结论 1,25-(OH)2D3+放疗对对裸鼠移植瘤宫颈癌生长有显著免疫抑制作用,为宫颈癌的综合治疗提供了实验依据。

shRNA干扰VEGF的表达对宫颈癌SiHa细胞凋亡的影响

目的利用RNA干扰技术抑制S iHa细胞中血管内皮生长因子(VEGF)的基因表达,探讨其对肿瘤细胞凋亡的诱导作用。方法设计针对VEGF的两种短发夹RNA(shRNA),分别构建PGPU6/GFP/Neo-VEGF重组质粒表达载体,命名为pv1、pv2。利用脂质体将质粒转染入人宫颈癌S iHa细胞,采用RT-PCR方法检测VEGF mRNA的变化情况。筛选出抑制率较高的质粒进行下一步实验;转染后,用流式细胞术检测细胞凋亡。结果 pv1、pv2对VEGF mRNA均有显著的抑制作用,抑制率分别为(82.17±4.45)%和(64.55±3.80)%,显著高于阴性对照组的(7.63±4.13)%(P<0.05)。pv1转染组的细胞凋亡率为(47.85±4.65)%,明显高于阴性对照组的(17.76±2.12)%和空白对照组的(19.66±3.74)%(P<0.01)。结论 RNA干扰技术可以有效沉默人宫颈癌细胞株S iHa中VEGF mRNA的表达,并可诱导宫颈癌细胞凋亡。

黄芪多糖逆转EC109/DDP食管癌细胞顺铂耐药的可能机制

目的研究黄芪多糖逆转EC109/DDP食管癌细胞顺铂耐药的可能机制。方法将EC109/DDP顺铂耐药食管癌细胞分为CON组(未行任何药物干预)、APS组(仅黄芪多糖干预)、DDP组(仅顺铂干预)及APD组(黄芪多糖及顺铂干预),比较4组细胞吸光度、细胞周期、凋亡率及MRP和GST-π基因表达的差异。结果 APD组EC109/DDP顺铂耐药食管癌细胞的D1~D6吸光度、S期、G_2/M期和增殖指数均低于CON组、APS组和DDP组(P﹤0.05),G_0/G_1期和凋亡率均高于CON组、APS组和DDP组(P﹤0.05)。CON组和DDP组间、APS组和APD组间EC109/DDP顺铂耐药食管癌细胞MRP和GST-π基因m RNA表达差异均无统计学意义(P﹥0.05);APS组和APD组细胞MRP和GST-π基因m RNA表达均低于CON组和DDP组(P﹤0.05)。结论黄芪多糖可逆转EC109/DDP顺铂耐药食管癌细胞对顺铂的耐药性,其可能机制与黄芪多糖显著降低MRP和GST-π基因表达有关。

吉非替尼治疗晚期肺腺癌多脏器转移的临床观察

为了探讨吉非替尼(易瑞沙)单药治疗进展的晚期肺腺癌多脏器转移患者的疗效与不良反应,18例合并多脏器转移的进展的晚期肺腺癌患者接受治疗。易瑞沙250mg口服,每日1次,服用至疾病进展或出现不可耐受的不良反应。治疗后每4周复查1次,16周后每8周复查1次。结果:本组18例患者均可评价疗效。其中完全缓解1例,部分缓解6例,无变化4例,进展7例。有效率为38.8%,疾病控制率61.1%。临床获益率为44.4%,常见不良反应为Ⅰ、Ⅱ度皮肤改变和腹泻,未发生Ⅲ度以上不良反应。初步研究结果提示,易瑞沙治疗化疗后进展的晚期肺腺癌合并多脏器转移的疗效显著,不良反应轻,是晚期肺腺癌多脏器转移患者的最佳选择之一。

仙鹤草中鹤草酚的提取及分离纯化研究

目的从中药仙鹤草中提取鹤草酚,并对其初步分离纯化进行研究。方法采用超声波法对仙鹤草活性成分鹤草酚进行粗提,并依次用两相溶剂萃取法与酸碱分离法进行纯化。采用薄层层析法和紫外分光光度法对其纯度进行定性分析;用高效液相色谱对其进行含量测定。结果分离纯化的鹤草酚纯度达到65.09%。结论研究出了一条以仙鹤草为原料,经超声波提取,再经乙酸乙酯、碳酸钠、及氢氧化钠酸碱分离,纯化鹤草酚的新工艺路线。

血管内皮生长因子反义核酸对宫颈癌Hela细胞的放射增敏作用

目的:血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)在人类多数实体肿瘤中均有表达,射线可诱导其表达增加,产生放射抗拒。本实验目的在于探讨血管内皮生长因子反义寡核苷酸干涉对高转移宫颈腺癌Hela细胞株的放射增敏作用。方法:实验组通过脂质体介导将VEGF基因反义寡核苷酸瞬时转染入Hela细胞,设VEGF正义寡核苷酸组和空白对照组作比较,各组均予6MV-X线照射,剂量为0Gy、2Gy、4Gy和6Gy,用RT-PCR检测照射前后Hela细胞中VEGF mRNA表达;用流式细胞术检测细胞凋亡;平板克隆形成试验检测克隆形成率的变化。结果:与对照组比较,VEGF反义寡核苷酸不仅可抑制Hela细胞中内源性VEGF mRNA的表达(P<0.01),亦可显著抑制辐射诱导的VEGF表达的增加(P<0.01);VEGF表达下调使射线诱导的细胞凋亡率明显升高(P<0.01),细胞克隆数量明显降低(P<0.01)。结论:针对人VEGF基因反义寡核苷酸干涉可抑制射线诱导的VEGF的高表达,增强射线对肿瘤细胞的杀伤作用,提高细胞的放射敏感性。

厄洛替尼治疗老年转移性非小细胞肺癌患者的临床观察

背景与目的厄洛替尼是小分子表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂,主要用于治疗晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC),本研究探讨厄洛替尼单药治疗老年转移性非小细胞肺癌患者的有效性与安全性。方法33例老年NSCLC多发转移患者接受厄洛替尼150mg/d治疗,服药至疾病进展或死亡。结果共有30例患者可以评价疗效,无病例完全缓解(complete regression,CR),部分缓解(partial regression,PR)6例(20%),稳定(stable disease,SD)16例(53.33%),疾病进展(progressive disease,PD)8例(26.68%)。缓解率(CR+PR)为20.0%;疾病控制率(CR+PR+SD)为73.3%。腺癌组与鳞癌组中位生存期无统计学差异(13.592±1.914个月vs9.846±1.598个月,P=0.301);两组无疾病进展时间无统计学差异(7.367±0.923个月vs6.615±1.366个月,P=0.488)。多因素Cox回归分析显示,有肝脏转移、胸腔积液、脑膜转移是影响厄洛替尼治疗客观疗效而影响生存期的因素。主要不良反应为皮疹和腹泻,不需要特殊处理。结论老年NSCLC多发转移患者对厄洛替尼的治疗能很好耐受,并有一定的生存获益。

应用RNAi技术抑制人宫颈癌细胞端粒酶活性表达的研究

目的研究转染前后对SiHa细胞增殖、凋亡及放射敏感性的影响。方法SiHa细胞分为3组：实验组、阴性对照组及空白对照组,其中实验组和阴性对照组分别用siRNA#1～4和阴性对照siRNA转染,空白对照组不做任何转染处理。用实时荧光定量PCR和蛋白印迹法检测各组细胞hTERTmRNA和蛋白的表达,CCK-8法检测细胞的增殖情况,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,克隆形成实验通过单靶多击模型拟合计算D0、Dq值,检测细胞的放射敏感性。结果转染后48h及72h,实验组siRNA#3hTERTmRNA及蛋白表达量较阴性对照组下降,P〈0.05;转染96h后实验组细胞A值0.80±0.09,阴性对照组为1.25±0.11,P=0.0054;转染后实验组早期凋亡率（10.50±0.20）%较阴性对照组（5.80±0.10）%明显增加,P〈0.0001;实验组及阴性对照组D0及Dq值分别为1.53Gy、0.77Gy和2.19Gy、1.31Gy,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论siRNA能特异性下调SiHa细胞中hTERTmRNA和蛋白水平的表达,提高细胞的早期凋亡率并抑制细胞增殖活性,增强SiHa细胞的放射敏感性。

siRNA干扰对Hela细胞株VEGF表达的影响

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)siRNA干扰对宫颈癌Hela细胞株VEGF的影响。方法:设计合成VEGFsiRNA1、2、3号链,体外脂质体介导转染宫颈癌Hela细胞株,半定量RT-PCR及Western blot分析转染效果。结果:转染VEGF siRNA1、2号链后,宫颈癌Hela细胞株VEGFmRNA表达明显下降,但是VEGF蛋白水平下降不明显。结论:VEGF siRNA转染宫颈癌Hela细胞株可下调细胞中VEGFmRNA的表达,不同的siRNA下调mRNA效率不同。作为基因沉默的一个重要工具,siRNA干扰有望成为治疗宫颈癌一种新方法。

Egr-1在肺癌发病机制和放射治疗中的作用

早期生长反应基因-1(early growth response gene-1,Egr-1)自从被发现与肿瘤的发生发展有重大关系后受到了许多学者的重视。Egr-1能够被射线诱导而被激活,可以使其下游基因表达增加从而影响肿瘤的生长、分化和转移,还与肺恶性肿瘤的放射治疗并发症有着密不可分的联系。本文简要综述了Egr-1的功能特点,以及Egr-1在肺恶性肿瘤的发病、治疗过程中所起作用的最新进展。

肺癌脑转移患者放化疗的临床护理

目的探讨肺癌脑转移患者放化疗治疗的临床护理方法与效果。方法选择2012年2月到2015年2月收治的肺癌脑转移患者80例,根据信封法随机平分为观察组与对照组,每组40例,所有患者都给予放化疗治疗,治疗观察时间为3个月;在治疗期间对照组给予常规日常护理,此基础上观察组加用积极地预见性护理。结果对照组和观察组的有效率分别为57.5%和75.0%,观察组优于对照组(P<0.05);观察组的骨髓抑制、外周神经毒性、恶心呕吐、过敏等毒副反应发生例数与分级都明显低于对照组(P<0.05);治疗过后,观察组的生理职能、生理功能、总体健康、躯体疼痛都比对照组明显要低(P<0.05);对照组的中位生存时间为(14.98±3.14)个月,观察组的平均生存时间为(19.33±2.78)个月,观察组得平均生存时间比对照组明显延长(P<0.05)。结论肺癌脑转移患者放化疗治疗期间的预见性护理有效提高近期治疗疗效,减少毒副反应,提高患者的生活质量,从而延长患者的生存时间。

呼吸锻炼行为干预对食管癌治疗后信号通路相关基因表达的影响

目的探讨呼吸锻炼行为干预对食管癌治疗后信号通路相关基因表达的影响。方法 80例食管癌术后患者根据随机抽签原则分为治疗组与对照组各40例,对照组术后常规护理,治疗组在对照组干预的基础上给予积极的呼吸锻炼干预。结果治疗组肛门排气时间与术后住院时间都明显少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组与对照组术后肺炎发生率分别为15.0%和12.5%,肺不张发生率分别为10.0%和7.5%,组间差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗组术后深呼吸、咳嗽与下床步行时的疼痛评分都明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。干预前两组血清dkk-1水平对比无明显差异,干预后血清dkk-1明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),同时组间对比差异也有统计学意义(P<0.05)。术后随访3个月,治疗组生理状况、社会状况、情感状况和功能状况评分都明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 dkk-1水平在食管癌的生长、增殖和转移过程中起重要作用,积极的术后呼吸锻炼行为干预能有效抑制dkk-1的表达,从而促进患者康复。

放射抗拒的肺腺癌A549细胞端粒酶活性与放射敏感性的关系

目的检测经过不同剂量的射线照射后人肺腺癌A549细胞存活后代的生长特性以及端粒酶的活性,探讨端粒酶与放射敏感性的关系。方法将同源的人肺腺癌A549细胞分为5组,分别给予0Gy、2 Gy、4 Gy、8 Gy、12 Gy的X射线照射,建立不同剂量的放射耐受模型,用TRAP-ELISA试剂盒检测A549组、A549-2组、A549-4组、A549-8组、A549-12组的端粒酶活性,用RT-PCR检测其端粒酶逆转录酶的相对表达含量,克隆形成实验检测其放射敏感性。结果经过不同剂量照射后的A549组,A549-2组,A549-4组,A549-8组的端粒酶活性分别为1.130±0.023,1.303±0.048,1.620±0.026,1.953±0.063,4组间的差异具有统计学意义(P<0.05),但A549-12组的端粒酶活性明显降低,为0.970±0.042,与以上4组的端粒酶活性差异具有统计学意义(P<0.05)。A549组、A549-2组、A549-4组、A549-8组的h TERT mRNA的相对表达含量分别为0.41±0.02,0.56±0.04,0.69±0.03,0.82±0.05,表达含量明显升高,且4组间的差异具有统计学意义(P<0.05);但A549-12组的h TERT mRNA的相对表达含量明显降低,为0.23±0.02,与以上4组h TERT mRNA的相对表达含量具有统计学意义(P<0.01)。5组细胞的放射敏感性随着放射剂量的增高而逐渐降低。A549组、A549-2组、A549-4组、A549-8组的端粒酶活性与其放射敏感性呈负相关(P<0.01),以上4组h TERT mRNA的相对表达含量与放射敏感性呈负相关(P<0.01)。结论在一定的剂量范围内,经过不同剂量的射线照射后形成的放射抗拒的人肺腺癌A549细胞系,其端粒酶活性、h TERT mRNA的相对表达含量与放射敏感性存在一定的相关性。

Egr-1基因与肿瘤腺癌放射敏感性关系的研究

目的:研究Egr-1基因在2种腺癌细胞A549和Hela放射前后的表达变化及对放射敏感性的影响。方法:培养肺腺癌A549细胞和宫颈腺癌Hela细胞,分别提取4 GyX射线照射前及照射后不同时间点的细胞的总RNA行荧光定量PCR(FQ-PCR)检测Egr-1表达水平;收获4 GyX射线照射前及照射后不同时间点的细胞处理行流式细胞术检测其凋亡;对照射不同剂量的细胞继续培养10-14天,进行克隆形成计数,计算克隆形成率及存活分数。结果:FQ-PCR结果显示,放射后Egr-1基因表达水平在2种细胞中均明显升高且于放射后1 h达到峰值,A549细胞的峰值明显高于Hela细胞;流式细胞术检测结果显示,A549细胞凋亡明显高于Hela细胞;克隆形成实验结果显示,A549细胞存活分数明显低于Hela细胞。结论:Egr-1基因在不同腺癌细胞表达水平不同并影响其放射敏感性。

Egr-1基因与肿瘤及放射治疗研究进展

目的:总结关于早期生长反应-1(Egr-1)基因在肿瘤和放射治疗中的研究进展。方法:应用PubMed及CNKI期刊全文数据库检索系统,以"Egr-1基因、肿瘤、放射治疗、细胞凋亡"为关键词,检索1993-01-2012-03的相关文献,共检索到英文文献691篇,中文文献129篇。纳入标准:1)Egr-1基因的结构;2)Egr-1基因在肿瘤中的表达;3)Egr-1基因对肿瘤的作用;4)Egr-1基因与放射治疗。根据纳入标准符合分析文献41篇。结果:Egr-1基因的表达存在于绝大多数的肿瘤中,对肿瘤的发生和发展具有抑制或促进作用;肿瘤细胞放射后可诱导Egr-1基因表达,并可引起下游基因表达及细胞凋亡;放射后的Egr-1基因表达水平与肿瘤细胞凋亡有关。结论:Egr-1基因在肿瘤中具有重要作用,对其不断深入研究可为肿瘤的治疗尤其是放疗提供更多新的依据。