CAR-T细胞在实体肿瘤治疗中的应用进展

免疫治疗在肿瘤治疗领域发挥重要作用,且不断取得新进展,尤以针对T细胞活化抑制性通路的单克隆抗体(也被称为免疫检查点抑制剂)和嵌合抗原受体T细胞(CAR-T细胞)治疗最具代表性。其中,CAR-T细胞的制备是应用负载CAR基因序列的逆转录病毒或慢病毒感染激活的T细胞,促使T细胞表达能够识别肿瘤相关抗原的受体及与其串联的和T细胞活化相关的共刺激分子信号转导片段,随后将其在体外扩增回输至肿瘤患者体内,最终达到识别并杀死肿瘤细胞的目的。目前,CAR-T细胞治疗在血液系统恶性肿瘤中取得了较好的结果,但其在实体瘤中的应用却存在很多亟待解决的问题,未来需进一步研究。

阻断T细胞活化抑制通路治疗恶性肿瘤新进展

肿瘤免疫治疗近年来取得了较大进展,阻断T细胞活化抑制通路的抗程序性死亡受体-1(programmed death-1,PD-1)/程序性死亡配体-1(programmed death-ligand1,PD-L1)及细胞毒性T淋巴细胞抗原-4(cytotoxic T lymphocyte antigen-4,CTLA-4)等单克隆抗体(也被称为免疫检查点抑制剂)应用于临床,有些抗体已纳入特定肿瘤的一线治疗。本文就免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitors,ICPIs)的作用机制、临床研究结果、免疫相关不良事件等方面的最新进展进行综述,从而分析该领域所面临的问题及未来发展前景。

灯盏花素通过调节PDK1表达调控结直肠癌进展的机制研究

目的:探讨灯盏花素调控结直肠癌进展相关作用的潜在分子机制。方法:灯盏花素作用于HCT-116细胞,MTT法检测增殖能力;Hoechst 33342、AO/EB、TUNEL法检测凋亡;Western blot检测HCT-116细胞和NCM460正常结肠上皮细胞中丙酮酸脱氢酶激酶1(PDK1)蛋白表达。灯盏花素作用于HCT-116细胞后,再次Western blot检测PDK1蛋白表达。结果:不同浓度的灯盏花素作用于结肠癌HCT-116细胞后,不同浓度组细胞的增殖能力显著低于对照组,增殖抑制率呈剂量—依赖和时间—依赖两种方式;不同浓度组细胞的凋亡率显著高于对照组。HCT-116细胞中PDK1蛋白表达上调,加入灯盏花素作用后HCT-116细胞中PDK1蛋白水平下调。结论:灯盏花素通过剂量—依赖和时间—依赖两种方式抑制结肠癌HCT-116细胞增殖,并促进HCT-116细胞凋亡,其机制可能与其对PDK1蛋白的抑制有关。

胃癌细胞中JAK-STAT和ras-MAPK信号通路相关基因的表达及意义

目的通过检测不同分化程度胃癌细胞中ras、STAT3、p38MAPK的表达,分析各基因表达的关系。方法采用RT-PCR和蛋白印迹分析法检测人胃癌细胞株MKN45、SGC7901、MKN28中ras、STAT3、p38MAPK核酸和蛋白的表达水平。结果人低分化胃癌细胞株MKN45中ras、STAT3、p38MAPK的mRNA表达水平明显高于人中分化胃癌细胞株SGC7901(P<0.05)和人高分化胃癌细胞株MKN28(P<0.01);人低分化胃癌细胞株MKN45中ras、STAT3、p38MAPK的蛋白表达水平明显高于人中分化胃癌细胞株SGC7901(P<0.05)和人高分化胃癌细胞株MKN28(P<0.01)。ras与STAT3(r=0.94,P<0.01)、p38MAPK(r=0.89,P<0.01)mRNA的表达均呈显著正相关;STAT3和p38MAPK mRNA的表达呈正相关(r=0.76,P<0.05);ras与STAT3蛋白的表达水平呈显著正相关(r=0.97,P<0.01);ras与p38MAPK蛋白的表达水平呈正相关(r=0.72,P<0.05);STAT3和p38MAPK蛋白的表达亦呈正相关(r=0.69,P<0.05)。结论 ras、p38MAPK和STAT3的过度表达在胃癌的发生、发展、分化过程中起重要作用,ras-MAPK和JAK-STAT通路的平衡失调可能是导致胃癌发生的重要原因。

磁流体对肝癌细胞的凋亡诱导研究及联合紫杉醇对大鼠肝癌的抑制作用

目的:不同浓度的磁性纳米颗粒作用于肝癌HepG2细胞后,检测其凋亡情况,并电镜观察细胞形态变化。制备抗肿瘤靶向药物紫杉醇白蛋白磁性纳米颗粒(MAG-TAX-NP),将其联合碘化油治疗大鼠肝癌,观察治疗效果。方法:化学共沉淀法制备磁流体,将其作用于HepG2细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。电镜观察磁微球作用于肝癌HepG2细胞后的形态学变化。用乳化-超声-加热固化法制备紫杉醇磁性纳米颗粒。建立大鼠肝癌模型,将荷瘤大鼠30只随机分为5组,除空白对照组外,分别将碘化油、碘化油紫杉醇、碘化油纳米磁流体、碘化油紫杉醇白蛋白磁性纳米颗粒各0.2mL注入其余4组大鼠肝固有动脉内。紫杉醇用量为5mg/kg体重,肝肿瘤区外加磁场,14d后处死大鼠,取肝肿瘤组织称重,计算各组抑瘤率。结果:证实了磁流体可诱导肝癌HepG2细胞凋亡。电镜下可见肿瘤细胞吞噬磁流体后细胞内形成凋亡小体,细胞裂解增加。大鼠肝癌模型中除空白对照组外,其余各组的抑瘤率分别为43.2%、51%、57.4%、87.4%。结论:磁微球可诱导肝癌HepG2细胞凋亡。碘化油紫杉醇白蛋白磁性纳米颗粒局部栓塞可抑制肿瘤生长,较其他组具有更强的抑瘤效果。随着深入研究,磁流体有望成为治疗肿瘤的方法,紫杉醇白蛋白磁性纳米颗粒可作为临床紫杉醇药物治疗肝癌的新剂型。

碘化油紫杉醇白蛋白磁性纳米颗粒治疗大鼠肝癌的疗效

目的:制备抗肿瘤靶向药物紫杉醇白蛋白磁性纳米颗粒(magnetic paclitaxel albumin nanoparticle,MAG-TAX-NP)和碘化油MAG-TAX-NP,观察碘化油MAG-TAX-NP治疗大鼠肝癌的效果。方法:以白蛋白、纳米Fe_3O_4颗粒为载体,用乳化-超声-加热固化法制备MAG-TAX-NP和碘化油MAG-TAX-NP,紫外分光光度法检测其紫杉醇的含量并计算MAG-TAX-NP的载药率及包封率,电镜下观察MAG-TAX-NP的形态。建立大鼠肝癌模型,除空白对照组外,分别将碘化油、碘化油紫杉醇、碘化油磁性纳米颗粒、碘化油MAG-TAX-NP各0.2 ml注入各组荷瘤大鼠肝固有动脉内进行治疗,14 d后处死大鼠,取肝肿瘤组织称重,计算各组抑瘤率;电镜观察碘化油MAG-TAX-NP对肝肿瘤的抑制作用。结果:制备的MAG-TAX-NP形态圆滑,粒径约70 nm,平均载药率为(5.62±0.08)%,平均包封率为(80.72±0.96)%。碘化油、碘化油紫杉醇、碘化油磁性纳米颗粒、碘化油MAG-TAX-NP各组的抑瘤率分别为(43.2±2.24)%、(51±3.33)%、(57.4±3.66)%和(87.4±4.11)%,碘化油MAG-TAX-NP组的抑瘤率明显提高(P<0.01);此外,碘化油MAG-TAX-NP作用于肝肿瘤后,肝癌细胞出现大量凋亡与坏死。结论:碘化油MAG-TAX-NP可抑制大鼠肝癌的生长,有望成为紫杉醇治疗肝癌的新剂型。

蝙蝠葛碱在人乳腺癌MCF-7细胞对5氟尿嘧啶敏感性的研究

目的探讨人乳腺癌MCF-7细胞受蝙蝠葛碱(Dauricine,Dau)作用后,对5氟尿嘧啶(5-FU)敏感性的影响。方法分别以终浓度为2.5μg/mL的蝙蝠葛碱、50μg/mL的5-FU、2.5μg/mL的蝙蝠葛碱和50μg/mL的5-FU作用于人乳腺癌细胞MCF-7,运用MTT法检测细胞增殖活性,Transwell实验分析细胞的迁移,DAPI染色检测细胞的凋亡,Western blot法检测cyclinD1和Bcl-2蛋白的表达。结果MTT实验结果显示联合使用阈下浓度的蝙蝠葛碱增强了5-FU对细胞增殖的抑制;Transwell实验表明联合应用阈下浓度的蝙蝠葛碱进一步加剧了5-FU对细胞迁移的抑制;DAPI染色说明联合应用阈下剂量的蝙蝠葛碱加强了5-FU对细胞凋亡的诱导,Western blot实验表明联合应用阈下浓度的蝙蝠葛碱进一步抑制了cyclinD1和Bcl-2蛋白的表达。结论蝙蝠葛碱可有效增强人乳腺癌MCF-7细胞对5-FU的敏感性。

30例骨髓增生性疾病JAK2V617F基因突变检测分析

目的观察慢性骨髓增生性疾病(MPD)患者中JAK2V617F基因突变的发生率。方法 30例MPD患者骨髓及外周血抽取DNA,应用等位基因特异性PCR技术检测JAK2V617F基因突变。结果 30例MPD患者中JAK2V617F基因突变的阳性率为68.4%,其中真性红细胞增多症(PV)为79.2%(19/24),原发性血小板增多症(ET)为50.0%(3/6)。结论 JAK2V617F基因突变检测有助于BCR/ABL阴性的MPD的诊断,使MPD能够早期发现、早期诊断,预防或减少血栓形成及出血的发生。

探讨哮喘和SARS-CoV-2的相互作用关系的生物信息学分析

目的采用生物信息学方法探讨哮喘和SARS-CoV-2感染的相互作用关系及发生的潜在机制,为哮喘和新冠肺炎(COVID-19)进一步治疗提供新线索。方法本文使用的研究数据来源于GEO数据库。利用R语言和Perl语言对数据进行预处理,筛选差异表达基因(DEGs),并获得GO功能富集分析、KEGG、Reactome、WikiPathways和BioCarta通路富集分析。通过Cytoscape软件获得蛋白质相互作用(PPI)网络分析可视化结果。使用RegNetwork数据库筛选与DEGs相互作用的转录因子(TF),再利用NetworkAnalyst构建miRNA-TF-mRNA共调控网络。最后,从DSigDB数据库筛选治疗药物。结果获得哮喘和SARS-CoV-2感染的数据集并且筛选得到25个受两者影响的重叠DEGs。GO功能富集分析和通路富集分析显示,DEGs参与病毒蛋白与细胞因子和细胞因子受体、补体和凝血级联反应通路。miRNA-TF-mRNA共调控网络表明关键基因与相关miRNA和TF之间复杂的调控关系。筛选到作用于DEGs的可能药物分子,包括雷洛昔芬、他莫昔芬和孕酮等。结论在数据分析的基础上,找出哮喘与SARS-CoV-2感染的共同切入点,为分析SARS-CoV-2在肺部疾病中的作用提供了新思路。

复可托对恶性肿瘤患者免疫功能、生活质量影响的临床观察

目的:观察复可托对恶性肿瘤患者免疫功能、生活质量的影响。方法:将117例恶性肿瘤患者随机分为治疗组(60例)和对照组(57例),对照组给予最佳支持治疗,治疗组在此基础上给予复可托治疗连续6个月。观察并比较两组治疗前、治疗后2、4、6个月的外周血T淋巴细胞亚群的变化及生活质量评分。结果:治疗2个月后,治疗组CD3^+、CD4^+细胞比例、CD4^+/CD8^+较对照组显著升高(P<0.05),CD8^+细胞比例较治疗前下降,但差异无统计学意义(P>0.05);治疗4、6个月后,治疗组CD3^+、CD4^+细胞比例、CD4^+/CD8^+升高,CD8^+细胞比例下降,差异有统计学意义(P<0.05);治疗6个月后,治疗组的KPS评分改善有效率和体重改善有效率均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组均未见明显不良反应发生。结论:复可托能纠正恶性肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群功能紊乱,同时明显改善患者生活质量,减少体重下降,且安全性高。

口服营养补充在结直肠癌患者中的应用

结直肠癌患者营养不良发生比例较高,这直接影响患者的临床结局,包括术后并发症增加、住院时间延长、住院费用增加,以及对化疗、放疗的耐受性降低等,最终影响患者的生存时间。口服营养补充(ONS)是指除正常食物外,经口摄入特殊医学用途(配方)食品,以补充日常饮食的不足,适用于具有营养风险的结直肠癌患者的各个治疗阶段。本文对结直肠癌患者术前、术后、放化疗期间及居家期间的ONS应用现状进行述评,以期为提升ONS在结直肠癌患者治疗中的地位和规范性提供参考。

重症肺炎机械通气患者的凝血功能变化及其临床意义

目的研究需机械通气肺炎患者凝血功能变化与动脉血氧、疾病严重程度、住院天数的关系,探讨其与疾病严重程度及转归的相关性。方法选取2015年7月~2017年1月在我院呼吸内科住院治疗的重症肺炎患者45例作为重症肺炎组,选取同期社区获得性肺炎患者45例作为普通肺炎组,选取同期体检健康者45例作为对照组。根据是否需要机械通气将重症肺炎组分为无创机械通气组(NPPV)和有创机械通气组(IPPV)。对比各组间外周血凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)及D-二聚体(D-D)的数值变化,并对普通肺炎组、NPPV组和IPPV组动脉血氧分压(PaO_2)、动脉二氧化碳分压(PaCO_2)、CURB-65评分及住院天数进行比较。结果重症肺炎组PT、APTT、D-D数值高于普通肺炎组及对照组,FIB数值低于普通肺炎组及对照组,各组间差异具有统计学意义(P<0.05);IPPV组PT、APTT、D-D数值明显高于NPPV组,FIB数值低于NPPV组(P<0.05);IPPV组PaO_2低于NPPV组及普通肺炎组,PaCO_2、CURB-65评分、住院天数高于NPPV组及普通肺炎组(P<0.01);直线相关分析结果显示,重症肺炎组患者PaO_2与PT、APTT、DD水平呈负相关(P<0.05),PaCO_2、CURB-65评分、住院天数与PT、APTT、DD水平呈正相关(P<0.05)。结论肺炎存在着不同程度的凝血功能异常,重症肺炎,尤其是需要有创机械通气的重症肺炎,其凝血功能异常更为明显,可作为临床评价肺炎病情严重程度及疾病转归的有效指标。

DEC2在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的研究分化型胚胎软骨发育基因(Sharp1,又名DEC2)在乳腺癌组织中的表达情况,探讨其在乳腺癌侵袭和转移中的作用及对乳腺癌预后的判断价值。方法应用SP法,对135例浸润性乳腺癌患者的原发灶及其中38例患者转移灶进行免疫组化检测。采用Spearman法分析DEC2表达与乳腺癌临床病理特征的关系,根据随访资料分析DEC2表达与复发转移的关系;采用Kaplan-Meire法绘制生存曲线并行Log-Rank检验。结果 DEC2的表达与淋巴结转移情况、临床分期、p53突变呈负相关;与乳腺癌复发转移呈负相关。DEC2低表达组患者生存时间显著低于高表达组患者。结论 DEC2可作为判断乳腺癌预后的重要指标,有望成为未来乳腺癌治疗的新靶点,从而为抑制乳腺癌复发转移的药物的研制奠定理论基础。