CBL教学法在血液科教学查房中的应用

随着基础医学尤其是细胞生物学和基因组学不断发展,血液系统疾病具有知识更新快,专业性强,内容抽象等特点,临床实习医生在血液科学习积极性不高,参与度低,学习效果欠佳,是临床实习教学的难点。医学院校的教学查房是学生在临床实习阶段将医学理论知识与临床具体实践相结合的重要途径,是一种重要的传授知识方法。我科将CBL教学法应用于血液系统疾病的日常教学查房中,让学生获得体验式的学习过程,激发学生学习的兴趣,鼓励学生主动思考探索,培养不断修正自我的临床思维能力和执业技能,树立正确的职业素养,帮助完成从理论到实践的过渡,获得良好的教学效果。

myPKFiT®软件辅助血友病A伴抑制物患者免疫耐受诱导治疗的病例报告

免疫耐受诱导(ITI)治疗是清除血友病A患者体内抑制物的一线治疗方案,应用注射用重组人凝血因子Ⅷ(rFⅧ)开启ITI治疗后的疗效评估及剂量调整是个性化治疗的重要组成部分。FⅧ的药代动力学(PK)参数可用于评估患者ITI治疗是否达到完全耐受,对抑制物滴度进行有效的监测。myPKFiT®软件是中国首个支持血友病PK指导的管理软件,也是目前国家药品监督管理局唯一批准的FⅧ个体化剂量指导软件,本病例报告中的两例血友病A伴抑制物患者,探索性采用myPKFiT®软件对其ITI治疗方案进行疗效评估和剂量调整,提示了PK指导在ITI治疗中的积极意义。

肺炎支原体肺炎患儿血清miR-126-5p、SPP1表达水平与病情严重程度的相关性分析

目的探讨肺炎支原体肺炎(MPP)患儿血清微小RNA-126-5p(miR-126-5p)、分泌性磷蛋白1(SPP1)表达及与病情严重程度的相关性。方法回顾性选取2018年6月至2021年10月在北大荒集团总医院治疗的199例MPP患儿作为观察对象,急性期106例,缓解期93例,根据临床肺部感染评分(CPIS)将急性期MPP患儿分为轻症组(CPIS≤6分)59例和重症组(CPIS>6分)47例,另选取同期健康体检儿童50例作为对照组。采用RT-qPCR检测血清miR-126-5p水平;酶联免疫吸附试验检测血清SPP1、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β水平;Pearson法分析急性期MPP患儿血清miR-126-5p、SPP1与hs-CRP、IL-6、IL-1β水平的相关性;Spearman法分析miR-126-5p、SPP1水平与CPIS评分的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-126-5p、SPP1对重症MPP患儿的预测价值。结果对照组、缓解期组、急性期组观察对象血清miR-126-5p、SPP1、hs-CRP、IL-6、IL-1β水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。与轻症MPP患儿比较,重症MPP患儿血清miR-126-5p、SPP1、hs-CRP、IL-6、IL-1β水平及CPIS评分显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,急性期MPP患儿血清miR-126-5p与SPP1呈正相关,且miR-126-5p、SPP1与hs-CRP、IL-6、IL-1β水平及CPIS评分呈正相关(P<0.001)。血清miR-126-5p、SPP1联合诊断重症MPP患儿曲线下面积为0.935,敏感度为86.79%,特异度为91.53%。结论MPP患儿血清miR-126-5p、SPP1水平升高,与患儿疾病严重程度有关,可作为MPP患儿病情评估的标志物。

DC-CIK细胞联合治疗158例恶性肿瘤的免疫疗效观察

目的探讨树突状细胞(DCs)与细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)联合治疗恶性肿瘤的免疫疗效。方法选取158例晚期恶性肿瘤患者进行研究,采集患者外周血单个核细胞,贴壁细胞经IL-4、GM-CSF、TNF-α诱导,并经流式细胞仪检测证实为DC,悬浮细胞经CD3单抗、γ-干扰素、IL-2诱导,并经流式细胞仪检测证实为CIK细胞,DCs在培养的第7 d、第8 d、第9 d、第10 d分别回输给患者,CIK细胞在培养的第11 d、第12 d、第13 d、第14 d分别回输给患者,于治疗结束4 w后,应用流式细胞仪检测患者外周血T细胞亚群水平,应用酶联免疫吸附实验(enzymelinked immunosorbent assay,ELISA)法检测白细胞介素7(IL-7)、干扰素-γ(INF-γ)和白细胞介素2(IL-2)水平,以评价细胞免疫功能,同时观察治疗过程中有无不良反应发生。结果 158例恶性肿瘤患者治疗前后外周血中CD3+、CD4+、CD8+T细胞百分数和CD4+/CD8+比值差异有显著性(P<0.05);IL-2、INF-γ和IL-7水平差异有显著性(P<0.01);除27例患者出现发热外,其余患者均无明显不良反应发生。结论 DC-CIK细胞联合治疗恶性肿瘤安全有效,能提高机体免疫功能。

重型血友病A患儿血清IL-1β、IL-6、外周血T细胞表面CD28及CTLA-4水平与血管内皮损伤指标的相关性分析

目的探讨重型血友病A患儿血清白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、外周血T细胞表面CD28及细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(cytotoxic T lymphocyte associated antigen-4,CTLA-4)水平与循环内皮细胞(circulating endothelial cells,CEC)和血管性血友病因子(von Willebrand factor,vWF)水平的相关性。方法选择本院2016年1月至2018年9月收治的重型血友病A患儿54例纳入观察组,另选择同期于本院进行健康体检的儿童60例纳入对照组。检测并比较两组研究对象血清IL-1β、IL-6及vWF水平、CD28和CTLA-4阳性细胞百分率、外周血CEC数目,分析血清IL-1β、IL-6、CD28及CTLA-4水平与血管内皮损伤指标的相关性。结果重型血友病A患儿血清IL-1β、IL-6、CTLA-4、CEC及vWF表达水平均显著高于对照组(P_均<0.05),CD28表达水平显著低于对照组(P <0.05)。CEC和vWF水平与IL-1β、IL-6及CTLA-4水平均呈线性正相关(P_均<0.05),与CD28水平均呈线性负相关(P_均<0.05)。结论血清IL-1β、IL-6、CTLA-4、CD28、CEC及vWF可能参与了重型血友病A的发病过程,IL-1β、IL-6、CTLA-4、CEC及vWF促进重型血友病A的发生发展,而CD28抑制重型血友病A的发生发展,检测上述指标可为临床诊断和治疗提供理论依据。

雷替曲塞治疗难治复发白血病临床观察

白血病是血液系统常见的恶性肿瘤。在我国35岁以下的恶性肿瘤患者中,白血病是导致死亡的主要原因。目前,白血病的治疗已经取得了很大进展,通过化疗、造血干细胞移植、分子生物学治疗等先进手段,已大大延长了白血病患者的生存期,但仍存在复发、难治的问题。多年来,关于难治及复发白血病的治疗问题一直是血液系统恶性肿瘤领域里研究的难点及热点。到目前为止，难治及复发白血病尚无理想的治疗方案。并且缓解率低。难治及复发白血病对多种化疗药物出现耐药现象，其治疗是目前临床上的难题，用普通化疗方案缓解率低，生存期短，近年来不断更新化疗方案，但疗效亦欠佳。本研究应用雷替曲塞治疗难治复发白血病取得一定的疗效，并且对其安全性进行了评估。

Hemin诱导K562细胞红系分化过程中BCR/ABL表达的变化

目的:观察氯化高铁血红素(Hemin)在诱导K562细胞红系分化过程中融合基因BCR/ABL表达的变化。方法:分别应用不同浓度的Hemin刺激K562细胞24 h后,光学显微镜下观察Hemin诱导前后细胞的形态变化,采用CCK8法检测0、10、20、30、40、50μmol/L的Hemin诱导24 h后细胞的增殖活性,并通过实时荧光定量PCR及蛋白质印迹分析分别从基因和蛋白水平检测各组BCR/ABL融合基因的表达。结果:经过不同浓度的Hemin诱导24 h后,细胞增殖活性降低,BCR/ABL融合基因的表达下调,且随着Hemin浓度的升高融合基因的表达量逐渐减低。结论:Hemin明显抑制BCR/ABL融合基因的表达,作用随着Hemin浓度的加大逐渐增强。

阿扎胞苷治疗高危骨髓增生异常综合征5例疗效观察

骨髓增生异常综合征（Myelodysplastic syndrome,MDS）是临床上常见的造血干细胞克隆性疾病,以血细胞病态造血,高风险向急性白血病转化为特征,

人抵抗素基因表达与白血病发病的相关性研究

抵抗素(resistin)自2001年被发现以来,人们对其生物学功能尚不清楚。本研究目的是通过抵抗素的组织表达分布以探讨人抵抗素的生物学功能、表达及与白血病发病的相关性。选择152例无炎症并发症的白血病病人作为实验组,100例健康志愿者作为对照组,采集静脉血血样,采用半定量PCR方法检测抵抗素在组织中的表达分布并比较抵抗素与内参基因表达的相对值,进行统计学分析。结果表明:抵抗素在正常人骨髓、胎儿肝脏,脐带血以及外周血细胞中有高水平表达,而在脂肪、脐带、胎盘以及成人肝脏组织中尚没有扩增出目的基因。实验发现,实验组抵抗素表达率为21%,对照组抵抗素表达率为27%,经卡方检验,χ2=0.84,差异不显著。对实验组与对照组抵抗素表达水平比较结果进行了统计学分析,差别无统计学意义(p>0.05)。结论:抵抗素在正常人骨髓、胎肝、脐血及外周血细胞中有高表达,此结果表明人抵抗素的表达与正常造血相关,但其表达率和表达水平与白血病无明显相关性。

Bikunin的分子克隆及真核分泌型表达载体的构建和表达

目的构建含有Bikunin的哺乳类细胞表达载体pSecTag2B-Bikunin,应用哺乳类细胞表达系统,表达分泌型Bikunin融合蛋白。方法用RT-PCR方法,从人肝细胞系L02扩增Bikunin编码区序列,将其克隆于pMD18-T Simple Vector中构建pMD18-T-Bikunin,经酶切、PCR及测序鉴定后,将Bikunin亚克隆至哺乳类细胞表达载体pSecTag2B中。用磷酸钙法转染NIH3T3细胞,24 h后,Western blot检测浓缩25倍的细胞培养上清中融合蛋白的表达。结果成功构建含有Bikunin的哺乳类细胞表达载体pSecTag2B-Bikunin。用磷酸钙法转染NIH3T3细胞,24 h后,Western blot检测浓缩25倍的细胞培养上清,有融合蛋白的表达。结论本实验成功克隆并在真核表达系统表达了分泌型Bikunin。

雷利度胺治疗难治复发急性粒细胞白血病临床观察

目的:观察雷利度胺治疗难治复发急性粒细胞白血病的疗效及不良反应。方法:给予雷利度胺单药治疗,雷利度胺50mg/d,口服给药,连续给药21天,28天为一个疗程。结果:应用雷利度胺4(2～6)个疗程,5例有效,2例获得完全缓解,2例部分缓解,1例因疾病迅速进展死亡退出试验。不良反应主要为疲乏4例,中性粒细胞减少性发热3例,中粒细胞减少4例,血小板减少1例,贫血1例。结论:应用雷利度胺治疗难治复发白血病有效,不良反应轻微且易于耐受。

骨髓增生异常综合征的研究进展

骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndrome,MDS）是一组起源于造血髓系定向干细胞或多能干细胞的异质性克隆性疾病,主要表现为病态造血、难治性血细胞减少、感染,晚期多造血功能衰竭或转为白血病。MDS起病较隐匿,大多数患者为50岁以上的老年人,30%的患者可能性转变为急性髓系白血病（AML）。在老年患者中突然出现病因不明且难治性的外周血细胞减少,通常要怀疑MDS。1遗传学长期以来,

急性髓系白血病免疫治疗方式及研究进展

急性髓系白血病(AML)是不成熟的造血细胞在骨髓内聚集、不断扩增并抑制造血的一类疾病,其核心治疗方案近30年基本保持不变,但疾病的预后及生存率仍不理想。然而,目前针对机体免疫机制的研究使得免疫治疗得到不断完善,因此免疫治疗可能成为今后治疗AML的有效方案,为该病的预后及生存率提供了新的武器。免疫治疗的执行方案包括:异基因造血干细胞移植、靶向治疗(基因工程T细胞、单克隆抗体等)等多种途径,通过不同机制杀伤肿瘤细胞。异基因造血干细胞移植作为AML最有效的治疗,通过免疫介导的移植物抗白血病效应根除白血病细胞,能有效预防AML复发。移植技术和单倍体移植模式进展使得"人人都能进行造血干细胞移植"。靶向治疗,如基因工程T细胞(嵌合抗原受体T细胞)、单克隆抗体、新型双特异性单抗,能特异性杀伤表达特殊抗原的白血病细胞而不伤害正常细胞,将成为AML免疫治疗的新策略。其他如自然杀伤细胞,结合NK细胞治疗可安全、有效降低AML复发风险,此外,增强NK细胞活性可能是今后最佳的白血病治疗方案。虽然现在仍然有部分方案尚处于研究阶段,但免疫治疗将成为今后治疗AML的重要手段。本文将对目前AML免疫治疗的研究进展及相关分子学机制进行综述。