色谱技术在中药物质基础研究中的应用

色谱是一门理论与技术研究很成熟的分离分析科学。本文扼要分析了几种色谱分离模式的原理及其在中药物质基础研究的应用,研究表明色谱将在复杂体系中药的分离分析中发挥重要的作用。

野西瓜多糖诱导人肝癌HepG2细胞凋亡的实验研究

目的观察野西瓜多糖诱导人肺癌HepG2细胞凋亡作用。方法通过MTT法测定野西瓜多糖对HepG2细胞的细胞毒作用;倒置显微镜观察野西瓜多糖对HepG2细胞形态的影响;AO/EB双染,激光共聚焦扫描显微镜观察野西瓜多糖对HepG2细胞形态的影响;PI染色法,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果MTT结果显示野西瓜多糖对HepG2细胞有抑制作用,IC50为471.53mg/L;倒置显微镜、激光共聚焦扫描显微镜下观察细胞形态,表现为细胞皱缩、碎裂、甚至出现凋亡小体;流式细胞术检测到野西瓜高剂量组凋亡率为74.926%。结论野西瓜多糖具有诱导HepG2细胞凋亡的作用。

野西瓜总生物碱诱导SGC-7901凋亡机制的研究

通过体外抗肿瘤实验探讨了野西瓜(C.S)总生物碱对诱导人胃癌SGC-7901细胞的抑制特点,并初步探讨了游离钙、活性氧水平的变化与野西瓜总生物碱诱导肿瘤细胞凋亡的关系.野西瓜总生物碱作用的实验组与阴性对照组相比实验组各时间段G1期细胞都多于阴性对照组,而实验组的S期细胞少于阴性对照组,即野西瓜总生物碱能够阻滞肿瘤细胞由G1期进入S期.野西瓜总生物碱给药24 h后,细胞出现凋亡,且作用较明显,与质量浓度有关.因此以上实验证明野西瓜总生物碱可引起SGC-7901细胞凋亡.75、150、300μg/mL的野西瓜中总生物碱作用于SGC-7901细胞24 h后,活性氧(ROS)水平明显上升.而不同质量浓度的野西瓜总生物碱作用于SGC-7901细胞24 h后,用荧光染料Flow-3/AM对细胞进行染色,经过激光共聚焦显微镜观察发现野西瓜总生物碱能提高肿瘤细胞内钙离子质量浓度,且呈一定的剂量依赖关系.通过流式细胞仪分析,野西瓜总生物碱能明显提高肿瘤细胞内活性氧的水平.所以体外实验证明了野西瓜总生物碱对SGC-7901细胞具有抗肿瘤活性.在作用机制方面,可能与其可通过提高肿瘤细胞内钙离子质量浓度和增加肿瘤细胞内活性氧的产生,进而启动细胞凋亡机制诱导肿瘤细胞凋亡有关.

肿瘤细胞的凋亡及其分子机制研究

细胞凋亡是近年来研究的一个热点问题,涉及到细胞内许多复杂的生化过程.综述了细胞凋亡过程中的各种调控因素的研究进展.其中包括细胞色素C;caspase;bcl-2;p53;p21;survivin在凋亡过程中的变化水平,它们在凋亡机制中都发挥着重大作用.现就从它们在凋亡中的作用以及相互之间的关系等方面进行综述.

芳香胺N-乙酰化转移酶的研究进展

芳香胺N-乙酰化转移酶(arylamineN-acetyltransferase,NATs)为Ⅱ相药物代谢酶,在药物代谢和毒物解毒方面起着重要作用,是一种很有前途的药物作用新靶点。目前对其的研究主要集中在酶的晶体结构上和在不同物种、人种及相同人种、物种的多态性研究方面,而对其本身的生理活性和药理作用方面的研究相对来说还比较薄弱。该文从NATs的结构、NAT致癌的药理学机制、NATs的内源性作用、NATs失活剂/抑制剂、NATs的替代品、动力学研究、NAT酶的多态性与疾病、NAT酶活性测定方法等几个方面进行一个较为全面的阐述。

中国南海红树植物老鼠簕的化学成分研究

通过柱层析和HPLC从中国南海红树植物老鼠簕中分离得到6个化合物,利用1DNMR、2DNMR(HCOSY,HMQC,HMBC)谱图分析,确定了化合物的结构.化合物1为(+)-lyon iresinol 3α-O-β-D-glucopyranoside,化合物2为(-)-lyon iresinol 3α-O-β-D-glucopyranoside,化合物3为(+)-lyon iresinol,化合物4为1H-Indole-3-carboxylic ac id,化合物5为1H-Indole-3-carboxal-dehyde,化合物6为1H-Indole-3-acetic ac id.

金匮肾气丸中三萜类成分的质量比测定研究

建立金匮肾气丸中三萜类成分的质量比测定方法.以HPLC法选用SymmetryC18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)测定该复方中茯苓酸、熊果酸及齐墩果酸的质量比.茯苓酸质量比测定色谱条件为:检测波长为242 nm;流动相为甲醇-水-磷酸(75∶25∶0.2);流速为1 mL/min;柱温为30℃.熊果酸及齐墩果酸的色谱条件:检测波长为215 nm;流动相为乙腈-甲醇-水-乙酸胺(62.5∶15.5∶22∶0.55);流速为0.8 mL/min;柱温为30℃.茯苓酸、熊果酸及齐墩果酸的质量比分别为0.116 mg/g、0.287 mg/g、0.134 mg/g.结果表明,该方法简便、准确、重现性好,适用于金匮肾气丸中三萜酸类成分的定量分析.

野西瓜总皂苷诱导SGC-7901凋亡的初步研究

探讨野西瓜总皂苷诱导人胃癌SGC-7901细胞的凋亡作用.采用MTT法检测野西瓜总皂苷对SGC-7901细胞增殖的抑制作用;采用荧光倒置显微镜观察细胞凋亡的形态学变化;采用流式细胞术分析野西瓜总皂苷对SGC-7901细胞凋亡率的影响;采用激光共聚焦显微镜观测细胞内[Ca2+]i的变化.5、25、50、100、200和400μg/mL的野西瓜总皂苷作用于SGC-7901细胞72 h后,野西瓜总皂苷可抑制SGC-7901细胞的增殖,其IC50为31.542μg/mL;野西瓜总皂苷作用SGC-7901细胞40 h后,细胞出现早期凋亡细胞的形态;15、30、60μg/mL的野西瓜总皂苷作用于SGC-7901细胞72 h后,细胞凋亡率分别为58.6%、92.298%、95.898%;15、30、60μg/mL野西瓜总皂苷作用SGC-7901细胞24 h后,细胞内[Ca2+]i升高,并随野西瓜总皂苷给药剂量的增加而升高.野西瓜总皂苷能够促进SGC-7901细胞的凋亡,其作用机制可能与野西瓜总皂苷升高细胞内[Ca2+]i有关.

中药提取成分抗阿尔茨海默病研究进展

随着世界人口的老龄化,阿尔茨海默病的发病率不断上升,严重威胁着人类健康和社会发展。关于其发病机制仍不清楚,目前认为与神经递质紊乱、基因突变、自由基损伤、神经细胞凋亡、淀粉样β蛋白沉积和tau蛋白异常磷酸化等有关。近年有关中药及其提取物防治阿尔茨海默病的研究日益受到重视,并取得了重大进展。本文对近几年来国内外关于中药提取成分抗阿尔茨海默病的研究进展进行综述。

野西瓜挥发油诱导SGC-7901凋亡的初步研究

研究野西瓜挥发油诱导SGC-7901细胞凋亡的机制.采用流式细胞术分析野西瓜挥发油对SGC-7901细胞早期凋亡的影响;采用激光扫描共聚焦技术观测野西瓜挥发油对肿瘤细胞内Ca2+浓度变化的影响;采用流式细胞术分析野西瓜挥发油对SGC-7901细胞线粒体跨膜电位的影响.野西瓜挥发油可以诱导SGC-7901细胞发生早期凋亡,使肿瘤细胞内的Ca2+浓度升高,并降低细胞线粒体跨膜电位.野西瓜挥发油具有明显的抗肿瘤作用,其抗肿瘤机制为诱导肿瘤细胞凋亡.通过升高肿瘤细胞内的[Ca2+]i而激活了Ca2+依赖性的核酸内切酶,同时通过PT孔的开放,引起线粒体跨膜电位下降而导致细胞凋亡.

龙葵碱对HepG_2细胞磷脂酰丝氨酸及断裂DNA研究

研究龙葵碱对肝癌细胞HepG2的诱导凋亡作用.采用倒置显微镜观察形态学变化,Annexin V-FITC联合PI双染法和Tunel法检测龙葵碱诱导人肝癌HepG2细胞凋亡作用.结果发现龙葵碱作用24 h后,贴壁细胞数量减少、体积缩小,变圆等明显凋亡形态;在激光共聚焦显微镜下观察到AnnexinV-FITC阳性信号为绿色荧光,PI为红色荧光;Tunel阳性信号为绿色荧光.表明龙葵碱通过诱导HepG2细胞凋亡达到抗肿瘤的作用.

虎眼万年青总皂苷提取工艺研究

目的:优化虎眼万年青总皂苷的提取工艺。方法:选用乙醇为提取溶剂,以总皂苷含量为指标,运用单因素实验对虎眼万年青总皂苷的提取工艺进行优化研究。结果:虎眼万年青总皂苷提取的最佳工艺条件为:80%乙醇以1:15固液比,在70℃水浴下提取3次,每次3h。结论:优化虎眼万年青总皂苷的提取工艺,为其开发应用奠定基础。

甜菜碱通过钙通道升高鼠脾淋巴细胞内[Ca^(2+)]i研究

研究甜菜碱对小鼠脾淋巴细胞内钙离子浓度的变化及相关钙通道的研究.应用激光共聚焦显微镜(LSCM)测小鼠脾淋巴细胞内钙浓度的变化,应用不同钙通道阻滞剂研究甜菜碱影响细胞内钙浓度变化途径.对终浓度4 mmol/L甜菜碱作用淋巴细胞不同时间的细胞内钙离子浓度值分析表明:甜菜碱可以使淋巴细胞内Ca2+浓度升高,6 h后效果最明显;对加入不同阻滞剂细胞内钙离子浓度变化分析表明:钙通道及蛋白阻滞剂硝苯地平、地尔硫卓、咪贝地尔、金雀异黄素对甜菜碱升高淋巴细胞内钙离子浓度没有影响;维拉帕米、新霉素、肝素、普鲁卡因能阻断甜菜碱对淋巴细胞内钙离子浓度的升高作用.由此可知:细胞内钙离子浓度升高主要通过以下途径:在G蛋白介导下通过影响L-型电压门控钙通道的α1亚单位而引起外钙内流;通过影响胞内钙库的IP3R钙通道和RyR钙通道而引起内钙外排.其共同引起胞质钙离子浓度增加.

激光扫描共聚焦显微技术及其在神经、肿瘤相关研究中的应用

介绍了近年来新出现的共聚焦显微镜新的种类,如传统激光共聚焦和活细胞激光共聚焦,对其功能及在神经、肿瘤研究中的应用进行了综述,使现代显微镜能够更加深入研究和分析细胞的变化过程和结构。活细胞激光扫描共聚焦显微镜与双光子激光扫描共聚焦显微镜实现了对肿瘤、神经活细胞长时间地动态观测,可更加真实地揭示细胞凋亡的机制与规律。

虎眼万年青粗多糖的提取工艺研究

目的:对虎眼万年青粗多糖的提取工艺进行优化。方法:采用水提醇沉的提取方法,以粗多糖的多糖含量为考察指标,通过单因素实验筛选出主要影响因素,分析料液比、提取次数、提取温度及提取时间对虎眼万年青粗多糖含量的影响。结果:单因素试验结果显示最佳料液比为1:25,提取次数为3次,提取温度为90℃,提取时间为3h。虎眼万年青粗多糖的多糖含量为9.79%。结论:该提取工艺操作简单,条件易于控制,为虎眼万年青的开发利用提供参考。

脂质体及传递体的研究概况

本文介绍了脂质体的结构、制备和作用特点以及一种新型的经皮给药载体一传递体，比较了传递体与脂质体的优缺点，并对传递体制备、性质进行了综述，提出了对传递体的展望。

芦笋皂苷诱导HepG-2细胞凋亡途径研究

目的：本文通过芦笋皂苷对体外培养HepG-2细胞的凋亡进行研究，对其凋亡途径进行了初步的揭示。方法与结果：酶标法检测表明，50mg·L-1、100mg·L-1、200mg·L-1的芦笋皂苷分别作用HepG-2细胞24h、48h后Caspase-8和Caspase-3活性均升高，且随着芦笋皂苷浓度的增加而增加。

细胞凋亡的线粒体途径机制研究

细胞凋亡是细胞有机体为调控机体发育，维护内环境稳定而主动采取的、由基因决定的、自动结束细胞生命的过程。线粒体在细胞凋亡中发挥着重要的作用。线粒体通透性转变孔（MPTP）开放导致线粒体内释放出包括细胞色素C（cyt-c、Smac／DIABLO和AIF等线粒体凋亡因子在内的各种蛋白，从而启动细胞凋亡程序引起细胞凋亡。Cyt—c释放到细胞浆后，Cyt—c、dATP、Aapf-1和procaspase-9组成聚合体，称为凋亡体。凋亡体可激活其下游的procaspase-3，从而导致细胞死亡。在凋亡诱导因素的刺激下，AIF可从线粒体转位进入胞核，直接引起染色质浓缩及DNA的断裂。AIF的转位足以介导体外细胞凋亡的发生。

脂质体载药方法的研究进展

脂质体作为药物载体具有提高药物疗效、减轻药物不良反应及靶向作用的特点，常用制备方法主要有薄膜分散法、逆相蒸发法、注入法、超声波分散法等。在制备含药脂质体时，根据药物被装载的机理不同，又可分为被动载药法（Passive Loading）与主动载药法（Active Loading）两大类。

不同给药途径脂质体特点的研究进展

本文对静脉注射、肌内注射和皮下注射、口服给药、眼内给药、肺部给药、外用(包括皮肤给药)以及鼻腔给药等不同给药途径的脂质体的特点进行了简要介绍及总结,希望能对不同给药系统的脂质体的进一步研究发展,提供一些帮助.