缓控释制剂的研究与设计浅析

介绍了缓控释药物的特点研究和设计制造的基本方法,以及应用情况和需要注意的问题。

仿制药的发展研究

介绍了仿制药物的发展背景和特点,以及在现代研发中存在的主要问题和方法。

哺乳动物细胞灌注培养工艺研究进展

随着动物细胞培养技术的不断改进，灌注培养体系以其特有的优势取得了广泛的发展。本文依据不同灌注培养系统的特点划分分为微载体悬浮灌注培养、悬浮细胞截流灌注培养、流化床及固定床灌注培养等几类，并对各类型的灌注体系进行了概述。

豨莶草水提取物对痛风性关节炎大鼠JNK信号通路影响

背景:现代药理研究表明豨签草主要含有豨签甙、生物碱、皂甙等有效成分,有明确的抗炎、镇痛、改善微循环作用,能有效控制急性痛风的炎症改变。目的:研究豨莶草水提取物对痛风性关节炎大鼠JNK信号通路影响。方法:将24只SD大鼠随机分为对照组、模型组和豨莶草组。对照组和模型组灌胃给予生理盐水,连续7 d,豨莶草组灌胃给予2 g/kg的豨莶草水提取物,连续7 d,第7天给药1 h后向模型组和豨莶草组大鼠膝关节腔注射尿酸钠建立痛风性关节炎模型,对照组给予同体积的生理盐水。采用苏木精-伊红染色观察大鼠膝关节滑膜组织病理情况,ELISA检测大鼠血清中白细胞介素β、白细胞介素8和肿瘤坏死因子α水平,Western bloting测定大鼠膝关节滑膜组织中JNK和p-JNK蛋白表达,RT-PCR测定大鼠膝关节滑膜组织中c-jun和AP-1 mRNA表达。结果与结论:(1)与对照组比较,模型组膝关节滑膜组织中炎性细胞浸润,滑膜细胞增生,成纤维细胞及小血管增生,豨莶草组膝关节滑膜组织中炎性细胞浸润明显减少,滑膜细胞增生和成纤维细胞增生明显减轻;(2)模型组大鼠血清中白细胞介素1β、白细胞介素8和肿瘤坏死因子α质量浓度明显增高,豨莶草组血清中白细胞介素1β、白细胞介素8和肿瘤坏死因子α质量浓度明显降低;(3)模型组滑膜组织中JNK和p-JNK蛋白表达明显增加,AP-1和c-jun mRNA表达明显增加,豨莶草组能够明显降低痛风性关节炎大鼠JNK和p-JNK蛋白及c-jun和AP-1mR NA表达;(4)结果表明,痛风性关节炎能够诱导JNK信号通路异常激活,豨莶草水提物能够明显改善痛风性关节炎症状,并且明显改善JNK信号通路异常激活。

滋阴补阳中药对成骨细胞OPG和RANKL表达的影响

目的:研究滋阴补阳中药骨乐冲剂对成骨细胞中生物活性因子OPG和RANKL表达影响,探讨滋阴补阳中药治疗骨质疏松症的作用机制。方法:采用酶消化法和茜素红染色法鉴定获大量细胞为成骨细胞,采用MTT和Western blot法测定不同剂量的骨乐冲剂体外成骨细胞增殖活性及成骨细胞中OPG和RANKL含量。结果:倒置显微镜下观察细胞多为单核、多边形及梭形,局部有细胞密集的细胞团,茜素红染色将钙化结节染成橘红色;高、中剂量的骨乐冲剂能够明显促进成骨细胞的增殖,低剂量骨乐冲剂对成骨细胞无作用;高、中剂量的骨乐冲剂能够明显增加OPG的表达,抑制RANKL的分泌,低剂量骨乐冲剂对OPG和RANKL无作用。结论:滋阴补阳中药骨乐冲剂能够促进成骨细胞的增殖,增加OPG表达,抑制RANKL分泌。

孙氏腹针对中风恢复期患者CD62p表达及下肢运动功能评分的影响

目的:观察孙氏腹针对中风恢复期患者CD62p表达及下肢运动功能评分的影响。方法:将60名患者随机分为对照组及腹针组,疗程均为2周。应用流式细胞仪技术检测治疗前、后两组患者静脉血中CD62p含量的变化,并选择健康志愿者30名测定参考值。选用简化的下肢运动功能Fugl-Meyer评分,评估孙氏腹针治疗下肢功能障碍的效果。结果:治疗前后两组患者CD62p水平均高于健康组(P<0.01);两组治疗后CD62p水平较治疗前均明显降低(P<0.05),腹针组CD62p水平降低更为显著;与治疗前比较,两组评分差异有统计学意义(P<0.05),而腹针组评分高于对照组(P<0.05),腹针组临床症状改善更为明显。结论:孙氏腹针结合体针对中风恢复期患者下肢功能障碍有更好的改善,降低CD62p表达水平,尚需进一步深入研究。

基于JNK信号通路探讨豨莶草对痛风性关节炎影响

目的基于JNK信号通路探讨豨莶草对痛风性关节炎影响。方法将48只SD大鼠随机分为对照组、模型组、SP600125组(JNK抑制剂)和豨莶草高(4 g/kg)、中(2 g/kg)、低(1 g/kg)组,对照组和模型组灌胃给予生理盐水,其他各组给予相应的药物,连续7天,第5天给药1 h后向大鼠膝关节腔注射尿酸钠建立痛风性关节炎模型,对照组不做处理,采用HE染色观察滑膜组织病理情况,ELISA检测大鼠血清中TNF-α,IL-1和IL-8含量,western bloting测定JNK和p-JNK蛋白含量和RTPCR测定c-jun、AP-1和NF-κB mRNA表达。结果与对照组比较,模型组炎性细胞浸润,滑膜细胞增生,成纤维细胞,SP600125组和不同浓度豨莶草组对滑膜组织炎性细胞浸润明显减少,滑膜细胞增生和成纤维细胞增生明显减轻;模型组大鼠血清中TNF-α,IL-1和IL-8含量明显增高,SP600125组和不同浓度豨莶草组血清中TNF-α,IL-1和IL-8含量明显降低;western bloting和RT-PCR结果显示模型组滑膜组织中JNK和p-JNK蛋白含量明显增加,AP-1、c-jun和NF-κB mRNA表达明显增加,不同浓度豨莶草组和SP600125组能够明显降低痛风性关节炎大鼠JNK和p-JNK蛋白含量及c-jun、AP-1和NF-κB mRNA表达。结论豨莶草能够改善急性痛风性关节炎症状,其可能机制是调控JNK信号通路异常激活。

基于TLR4信号通路探讨豨莶草对痛风性关节炎影响

目的:基于TLR4信号通路探讨豨莶草对痛风性关节炎影响。方法:将48只SD大鼠随机分为对照组、模型组、秋水仙碱组和豨莶草高(4 g/kg)、中(2 g/kg)、低(1 g/kg)组,对照组和模型组灌胃给予生理盐水,其他各组给予相应的药物,连续7天,第七天给药1 h后向大鼠膝关节腔注射尿酸钠,建立痛风性关节炎模型,对照组不做处理,采用HE染色观察滑膜组织病理情况,ELISA检测大鼠血清中TNF-α,IL-1和IL-8含量,RT-PCR测定MyD88,TRAF6,TBK1和NFκBmRNA表达。结果:与对照组比较,模型组炎性细胞浸润,滑膜细胞增生,成纤维细胞,不同浓度豨莶草组对滑膜组织炎性细胞浸润明显减少,滑膜细胞增生和成纤维细胞增生明显减轻;模型组大鼠血清中TNF-α,IL-1和IL-8含量明显增高,不同浓度豨莶草组血清中TNF-α,IL-1和IL-8含量明显降低;RT-PCR结果显示模型组滑膜组织MyD88、TRAF6、TBK1和NF-κB mRNA表达明显增加,不同浓度豨莶草组能够明显降低痛风性关节炎大鼠MyD88、TRAF6、TBK1和NF-κB mRNA表达。结论:豨莶草能够明显改善痛风性关节炎症状,抑制TLR4信号通路异常激活。

Wnt信号传导途径与骨质疏松

过去20年,在分子生物学和基础医学领域对骨质疏松症的研究取得了长足进展。Wnt信号通路在胚胎发育及生命体成长过程中起着关键的调控作用。2001年,基因学研究证实标准的Wnt信号通路在骨骼形成过程中起到关键的调控作用,最近,有报道非经典的Wnt信号通路在骨骼形成过程中有调控作用。由于目前应用调控合成代谢途径预防和治疗骨质疏松症尚无有效的报道。因此,本文主要从Wnt信号通路与骨质疏松症的发病机制及治疗进展的角度展开综述。

基于Nrf2/HO-1信号通路探讨豨莶草对尿酸钠诱导的滑膜细胞作用机制

目的:探讨Nrf2/HO-1信号通路介导豨莶草对尿酸钠诱导的滑膜细胞氧化应激作用的影响。方法:取SD大鼠滑膜组织剪碎进行自然沉降贴壁培养滑膜细胞,采用不同种浓度的豨莶草含药血清处理尿酸钠诱导的滑膜细胞,采用酶联免疫法测定各组滑膜细胞中ROS、SOD和MDA的含量;采用RTPCR法测定滑膜细胞中Nrf2、HO-1表达。结果:ELISA测定结果发现与对照组比较,模型组滑膜细胞中ROS和MDA含量明显增加,SOD含量明显降低;与模型组比较豨莶草高、中、低组都能够明显降低滑膜细胞中ROS和MDA含量,增加SOD含量;RT-PCR结果显示模型组滑膜组织中Nrf2、HO-1 m RNA表达明显增加,不同浓度豨莶草组能够明显提高滑膜细胞Nrf2、HO-1 m RNA表达。结论:豨莶草可能通过Nrf2/HO-1调节滑膜细胞促进Nrf2合成和核转位,从而促进下游抗氧化基因HO-1的表达有关,进而抑制氧化应激反应。

骨乐冲剂对前体破骨细胞OSCAR、NFATC1表达的影响

目的:研究骨乐冲剂对前体破骨细胞OSCAR,NFATC1表达的影响,探讨骨乐冲剂抑制破骨细胞增值和分化作用的机制。方法:采用骨髓细胞培养24 h,取未贴壁细胞进行诱导细胞培养,不同剂量的骨乐冲剂含药血清加入体外培养的前体破骨细胞中,测定前体破骨细胞增值率和骨吸收面积含量及OSCAR,NFATC1的表达。结果:高、中、低浓度骨乐冲剂血清能显著抑制前体破骨细胞OSCAR,NFATC1的表达,并能抑制前体破骨细胞的增殖使骨吸收减少。结论:骨乐冲剂能够抑制前体破骨细胞中OSCAR,NFATC1的表达,减少破骨细胞的增殖与分化。

五味消毒饮联合丹芷祛痘中药外敷治疗青少年中重度痤疮疗效分析

目的:分析五味消毒饮联合丹芷祛痘中药外敷对青少年中重度痤疮的治疗效果。方法:选取笔者医院2016年12月-2018年4月收治的100例中重度痤疮患者的临床资料进行分析,将患者随机分为两组。对照组:50例,采用丹芷祛痘中药外敷治疗;观察组:50例,采用五味消毒饮联合丹芷祛痘中药外敷治疗。比较两组患者治疗后的临床疗效,性激素水平、痤疮综合评分和生活质量评分。结果:观察组痊愈20例、显效17例、有效8例,总有效率90.00%;对照组痊愈15例、显效12例、有效10例,总有效率74.00%;两组患者总有效率比较有显著性差异,具有统计学意义(P<0.05);治疗后,观察组睾酮(testosterone,T)、硫酸脱氢表雄酮(Dehydroepiandrosterone sulfate,DHEAS)、P物质、TNF-α水平低于对照组(P<0.05);两组患者痤疮综合评分系统(GAGS)评分比较,观察组治疗后4周、8周GAGS评分低于对照组(P<0.05);治疗后,两组痤疮患者特异性生活质量量表(Acne-QOL)评分组间比较,观察组评分高于对照组(P<0.05)。结论:五味消毒饮联合丹芷祛痘中药外敷治疗青少年中重度痤疮疗效显著,同时降低患者性激素水平,改善其皮损情况及生活质量。

高效液相色谱法测定奥沙利铂相关杂质左旋异构体含量

目的 建立以高效液相色谱法测定奥沙利铂的相关杂质左旋异构体.方法 采用Chiralcel-OC-H手性色谱柱,以甲醇-乙醇（70：30）为流动相,流速为0.3 mL/min,柱温为40 ℃,检测波长为254 nm,进样量为20 μL.结果 奥沙利铂左旋异构体质量浓度在0.24 ～0.72μg/mL范围内与峰面积呈良好线性关系（r=0.999 2）,平均回收率为94.47％,RSD为2.75％（n=9）;奥沙利铂峰和左旋异构体（杂质D）峰的分离度、理论板数及检出灵敏度均达到要求.结论 该方法准确、简便、快速,可用于检测注射用奥沙利铂左旋异构体的含量.

HPLC法测定枸橼酸西地那非的含量

目的：建立枸橼酸西地那非含量及有关物质测定的方法。方法：采用高效液相色谱法，色谱柱为WatersSymme—tryC18柱（250×4．6mm，5μm），等度洗脱方法，流速为1．01nL／min；检测波长为290nm，柱温40℃。结果：枸橼酸西地那非的浓度在100～480μg／mL范围内线性关系良好（v=198．22x＋98．02R=0．999），方法的最低检测限为0．5ng（S／N=3．01）；高、中、低3种浓度的平均回收率（n=3）100．3％（RSD=0．84％）；中间精密度RSD=0．53％（n=6），各杂质峰与主峰达到基线分离。结论：此法操作简单，灵敏、准确、重复性好，适用于枸橼酸西地那非的含量测定。

间苯二酚法测定重组人红细胞生成素原液唾液酸含量方法验证

目的:验证间苯二酚法测定EPO原液唾液酸含量的可行性。方法:采用间苯二酚显色法自制EPO对照品唾液酸含量进行检测。结果间苯二酚法线性良好、精密度高、辅料对试验无干扰。结论:可以用于EPO原液样品唾液酸含量测定。

硫酸-蒽酮法测定EPO原液中性糖含量

目的:验证硫酸-蒽酮法测定EPO原液中性糖含量的可行性。方法:采用硫酸-蒽酮法自制EPO对照品中性糖含量进行检测。结果:硫酸-蒽酮法线性良好、精密度高、辅料对试验无干扰。结论:可以用于EPO原液样品唾液酸含量测定。

盐酸头孢甲肟杂质测定的方法学验证

对建立的盐酸头孢甲肟有关物质测定的方法,进行方法学验证。色谱柱:球状蛋白色谱用亲水硅胶为填料的色谱柱,流动相:pH6.5磷酸盐缓冲液(55:45),检测波长:231nm,进样量:20μl。经过实验证明系统适用性:头孢甲肟峰与其前杂质峰分离度为1.95;对照溶液线性和范围:头孢甲肟在浓度1.66μg/ml^7.92μg/ml;检测限与定量限:检测限为0.21ng,定量限为0.55ng;溶液进样精密度:连续进样5次,峰面积值的相对标准偏差不大于2.0%,F值测定重现性:F值的日内、日间的相对标准偏差均在5%以内。综上,建立的方法准确、可靠,能够满足实际生产要求。

HPLC测定盐酸头孢甲肟含量的方法学验证

目的对建立的HPLC法测定盐酸头孢甲肟含量方法,进行方法学验证。方法仪器:Agilent 1260,色谱柱:十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱填料的色谱柱,流动相:乙腈-水-冰醋酸(15:45:1),检测波长:254nm,进样量:20μl。结果线性和范围0.05522mg/ml^0.14678mg/ml,精密度RSD=0.03%,回收率98.4%~101.6%,耐用性对同一批次本品含量测定结果的RSD%为0.81%(n=13)。结论建立的方法准确、可靠,能够满足实际生产要求。

HPLC法测定多西他赛注射液的含量

目的:建立多西他赛注射液含量的测定方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Waters Sunfire C18柱(250×4.6mm,5μm),梯度洗脱方法,流速为1.0mL/min;检测波长为232nm,柱温40℃。结果:多西他赛的浓度在70～120μg/mL范围内线性关系良好(y=234.46x+137.48 R=0.999),方法的最低检测限为0.8ng(S/N=3.1);高、中、低3种浓度的平均回收率(n=3)100.4%(RSD=0.77%);日间精密度RSD=0.60%(n=6),各杂质峰与主峰达到基线分离。结论:此法操作简单,灵敏、准确、重复性好,适用于多西他赛注射液的含量测定。

骨乐冲剂对成骨细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响

目的研究中药骨乐冲剂对体外培养大鼠成骨细胞分化和增殖的影响,探讨其调节机制。方法采用双酶消化法获得大鼠成骨细胞,传代培养3代后用3种浓度的骨乐冲剂含药血清培养。采用MTT法测定成骨细胞增殖率和碱性磷酸酶活性。结果含高、中浓度骨乐冲剂的血清能显著促进成骨细胞的增殖并提高碱性磷酸酶活性。结论中药骨乐冲剂能够促进成骨细胞的增殖与分化。