NLRP3/IL-1β信号通路在CAP患者血清的表达及对人肺上皮细胞的干预作用

目的探究焦亡分子含NLR家族Pyrin域蛋白3(polyclonal antibody to NLR family,pyrin domain containing protein 3,NLRP3)/白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)信号通路在社区获得性肺炎(community-acquired pneumonia,CAP)患者血清的表达及对人肺上皮细胞的干预作用。方法选取2020年3月至2022年3月唐山市某医院就诊的90例CAP患者(实验组)和90例健康志愿者(对照组),通过酶联免疫吸附试验检测血清NLRRP3和IL-1β水平。通过CRISPRa激活技术对NLRRP3基因进行过表达,将人正常肺上皮细胞(BEAS-2B)株分为对照组、Lenti-NC(NC)病毒转染组(转染CRISPRA基因序列载体)和NLRP3过表达组(转染NLRRP3过表达载体),以细胞计数(cell counting kit-8,CCK8)试剂检测不同时间点细胞活力,以流式细胞仪检测细胞存活和凋亡,以定量聚合酶链反应(quantitative PCR,qPCR)和Elisa分别检测NLRRP3和IL-1β的mRNA表达和蛋白水平。结果与对照组相比,实验组患者血清NLRRP3,IL-1β表达水平显著升高,NLRP3过表达组细胞24h、48h、72h细胞活力下降,且具有时间依赖效应,细胞存活降低、早期凋亡和晚期凋亡比例升高;与对照组相比,NLRP3过表达组细胞IL-1β表达水平和分泌水平升高。结论细胞焦亡分子NLRRP3和IL-1β在CAP患者血清高表达,过表达NLRRP3可以抑制人正常肺上皮细胞增殖,诱导细胞凋亡,提高IL-1β分子表达水平。