lncRNA H19/Sirt3介导自噬在脑出血后损伤中的作用机制

目的探讨lncRNA H19(H19)/Sirt3介导自噬在脑出血(ICH)后损伤中的作用机制。方法通过胶原酶注射建立ICH小鼠模型。将经氧合血红蛋白(OxyHb)处理的SH⁃SY5Y细胞用作体外ICH模型。含有sh⁃H19的慢病毒载体用于抑制ICH小鼠和培养的SH⁃SY5Y细胞中的H19表达。在ICH模型建立后48 h,对小鼠神经功能缺损进行mNSS评分,并对病灶体积进行分析,同时分别采用RT⁃qPCR法、Tunel染色和免疫荧光分析损伤组织中H19表达、神经元细胞凋亡和LC3表达。分别采用MTT法测量细胞活力、Tunel染色检测细胞凋亡以及Western blot分析自噬相关蛋白和Sirt3/AMPK/mTOR信号通路蛋白表达情况。结果H19表达在ICH后和OxyHb处理细胞中以时间依赖性方式增强(P<0.05)。H19敲低降低了ICH模型建立后第2天病灶体积和mNSS评分(P<0.01),减少神经元细胞凋亡(P<0.01),并增强了ICH损伤期间自噬的调节作用。H19敲低增强了暴露于OxyHb的SH⁃SY5Y细胞活力,减少了细胞凋亡,促进细胞自噬。H19主要通过调节Sirt3表达和激活AMPK⁃mTOR信号通路促进自噬。结论H19在体内外ICH模型中以时间依赖性方式增强。H19敲低可能通过Sirt3/AMPK/mTOR信号通路诱导自噬减轻ICH损伤。