MiR-650通过靶向结合磷酸烯醇丙酮酸羧激酶1促进口腔鳞状细胞癌细胞增殖和糖酵解

目的:分析miR-650是否靶向磷酸烯醇丙酮酸羧激酶1(PCK1)促进口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖和糖酵解。方法:生物信息学筛选出差异表达且与细胞增殖、糖酵解有关的基因。构建稳定过表达PCK1的CAL-27和Tca8113细胞系,分成Vector组和PCK1组。构建稳定过表达miR-650的OSCC细胞,分成miR-NC组、miR-650组和miR-650+PCK1组。CCK-8和克隆形成检测各组细胞增殖能力。裸鼠成瘤实验检测瘤体质量、体积。免疫组织化学检测肿瘤组织中PCK1表达水平。免疫印迹测定各组细胞PCK1蛋白表达水平。葡萄糖和乳酸试剂盒检测各组细胞内葡萄糖和乳酸变化。数据库预测PCK1靶标,双荧光酶素报告实验进行验证。RT-qPCR测定转染后OSCC细胞中miR-650的表达。结果:PCK1在OSCC中表达下调,且与细胞增殖和糖酵解相关。与Vector组相比,PCK1组中PCK1蛋白水平升高;过表达PCK1抑制细胞增殖;过表达PCK1抑制裸鼠移植瘤体积和质量增长;过表达PCK1促进细胞葡萄糖产生和抑制其消耗,同时抑制乳酸产生。与癌旁组织相比,miR-650在OSCC中表达上调。数据库预测及双荧光酶素报告实验证实miR-650与PCK1的靶向关系。与miR-NC组相比,miR-650组中PCK1 mRNA和蛋白表达水平明显降低。miR-650通过调节PCK1表达,促进OSCC细胞增殖,调控细胞糖酵解。结论:miR-650可以通过靶向结合PCK1促进OSCC细胞增殖和糖酵解。

组织多肽特异性抗原联合癌抗原125检测在口腔癌诊断中的临床价值

目的探讨口腔癌患者血清中组织多肽特异性抗原(TPS)和癌抗原125(CA125)水平对口腔癌的临床诊断及病情监控的临床意义。方法用ELISA方法检测46例口腔癌和46例口腔良性肿瘤患者及46例健康对照者血清及唾液中TPS水平,同时用电化学发光法检测血清及唾液CA125水平。结果口腔癌组的TPS、CA125水平明显高于口腔良性肿瘤组和健康对照组(P<0.05);进展期口腔癌患者的血清及唾液中TPS和CA125明显高于稳定期患者(P<0.05)。治疗后不同预后患者的TPS和CA125浓度差异有统计学意义(P<0.05)。TPS联合CA125检测敏感性及特异性均高于TPS、CA125单独检测的敏感性及特异性。结论血清TPS联合CA125检测可作为口腔癌早期诊断的指标,对疾病的诊断及预后具有很高的临床价值。

碘甘油联合利多卡因治疗小儿疱疹性口腔炎

目的对碘甘油联合利多卡因治疗小儿疱疹性口腔炎的效果进行探讨。方法对象为120例疱疹性口腔炎患儿,都选自2016年2月至2018年12月,采用盲选法将患儿平均分为两组,其中60例采用常规方式治疗的患儿纳入对照组,另外60例在对照组治疗基础上采用碘甘油联合利多卡因治疗的患儿纳入观察组,比较两组治疗效果,记录两组患儿的临床症状改善情况及不良反应发生率。结果综合比较后可得,观察组96.7%的治疗有效率,明显高于对照组85.0%的治疗有效率,差异显著(P<0.05);综合比较后可得,观察组患儿发热、头痛及疱疹等症状消失时间明显短于对照组(P<0.05);综合比较后可得,两组患儿不良反应发生率无统计学意义(P>0.05)。结论针对疱疹性口腔炎患儿,除了常规的抗感染对症治疗外,联合使用碘甘油联合利多卡因治疗效果更佳,患儿发热、头痛及疱疹等临床症状消失时间明显加快,缩短患儿病程的同时,不良反应未出现明显增加,此种安全有效的治疗方式极具医学推广价值。

沉默PIWIL2抑制口腔鳞癌细胞CAL27增殖、侵袭、迁移和裸鼠移植瘤生长

目的探究精原干细胞自我更新基因PIWIL2对口腔鳞癌细胞CAL27增殖、侵袭、迁移和裸鼠移植瘤生长的影响。方法将口腔鳞癌细胞CAL27随机分为空白组(不作处理)、阴性对照组(转染慢病毒阴性对照病毒scramble)和PIWIL2-shRNA慢病毒组(转染PIWIL2-shRNA慢病毒)。采用实时荧光定量PCR和蛋白印迹法检测细胞中PIWIL2 mRNA及蛋白表达水平,集落形成实验检测细胞增殖能力,Transwell实验和划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力,JC-1探针检测线粒体膜电位变化,蛋白印迹法检测Ki67、血管内皮生长因子(VEGF)、E-cadherin、N-cadherin、Snail表达水平。裸鼠皮下注射慢病毒感染的CAL27细胞构建裸鼠移植瘤模型,免疫组化染色检测肿瘤组织中VEGF的表达水平,观察沉默PIWIL2对肿瘤生长的影响。结果PIWIL2-shRNA慢病毒感染后CAL27细胞中PIWIL2 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与阴性对照组比较,PIWIL2-shRNA慢病毒组细胞集落形成率,侵袭细胞数,划痕愈合率,细胞中Ki67、VEGF、N-cadherin、Snail蛋白表达水平,移植瘤重量、体积,移植瘤组织中VEGF阳性表达率显著降低/减少,细胞中E-cadherin蛋白表达水平显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。JC-1探针检测结果显示,PIWIL2-shRNA慢病毒感染后细胞中红色荧光减少,绿色荧光增多。结论沉默PIWIL2可明显抑制口腔鳞癌细胞CAL27增殖、侵袭、迁移及裸鼠移植瘤的生长。

MiR-663b/ALDH6A1轴通过ROS调节口腔鳞状细胞癌细胞增殖

目的 探讨microRNA-663b(miR-663b)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖的调控作用及机制。方法 利用基因表达汇编(GEO)数据库的OSCC组织芯片数据进行差异表达基因分析;采用基因富集分析(GSEA)探寻OSCC与miR-663b相关的生物学功能。将miR-663b mimic以及醛脱氢酶6家族成员A1(ALDH6A1)过表达质粒转染至人OSCC细胞系HSC-3、CAL-27;采用CCK-8实验、克隆形成实验及裸鼠皮下移植瘤实验检测miR-663b对HSC-3、CAL-27细胞体内、外增殖的影响;采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-663b与ALDH6A1的靶向关系。结果 GEO数据库组织芯片数据显示,miR-663b在OSCC细胞中表达上调;GSEA发现miR-663b生物学功能与调节细胞增殖、氧化还原反应及活性氧(ROS)相关。功能试验中,过表达miR-663b显著促进HSC-3、CAL-27细胞的体外增殖、克隆形成能力以及裸鼠皮下移植瘤的生长(P <0.05),下调ALDH6A1蛋白表达和ROS水平(P <0.05),升高NADPH/NADP~+比值(P <0.05);而上调ALDH6A1表达则显著抑制HSC-3、CAL-27细胞体外增殖和和克隆形成能力,上调ALDH6A1蛋白表达和ROS水平(P <0.05),降低NADPH/NADP~+比值(P <0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果证实miR-663b能靶向结合ALDH6A1 mRNA的3’UTR区。结论 miR-663b在OSCC细胞中表达上调,并可通过靶向抑制ALDH6A1表达调节ROS水平,进而促进OSCC细胞增殖发挥致癌基因作用。

2型糖尿病合并慢性牙周炎患者糖化血红蛋白水平变化与抗菌治疗预后的相关性分析

目的观察并分析2型糖尿病合并慢性牙周炎患者糖化血红蛋白水平变化与牙周综合抗菌治疗预后的相关性。方法收集2016年4月—2019年7月唐山市第八医院口腔科收治的104例2型糖尿病合并慢性牙周炎患者的临床资料。所有患者均接受牙周综合抗菌治疗,分别于治疗前后测定空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、糖化血红蛋白(hemoglobin A1c,HbA1c)水平,并记录治疗后的牙周附着丧失(attachment loss,AL)、探诊出血指数(bleeding on probing,BOP)、菌斑指数(plaque index,PLI)、牙周探诊深度(probing depth,PD)等牙周临床指标并进行比较。结果与治疗前相比,接受治疗后患者的AL、BOP、PLI、PD等指标水平均明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05),接受治疗后,与治疗前相比,接受治疗后患者的FBG及HbA1c等指标水平均明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05),治疗前后患者AL、BOP、PLI、PD等指标与HbA1c的水平变化明显(P<0.05),BOP与FBG呈正相关,多元回归分析结果显示控制性别、年龄等混杂因素后,AL、BOP、PLI与HbA1c的变化幅度呈正相关(P<0.05)。结论牙周综合抗菌治疗能够明显降低2型糖尿病合并慢性牙周炎患者HbA1c水平,并且其变化幅度与AL、BOP、PLI等指标呈正相关;HbA1c水平检测有望成为评估糖尿病伴牙周炎患者诊断及预后的重要指标。

洛伐他汀促进颌面部骨折愈合过程中BMP-2表达的研究

目的探讨洛伐他汀促进颌骨骨折愈合过程中对骨形成蛋白-2（BMP-2）的影响。方法健康家兔24只,于颌骨制造骨折模型,再随机分为给药组和对照组,每组12只,给药组手术次日给予10mg/（kg·d）洛伐他汀灌胃,疗程为28天,对照组给予安慰剂。利用RT-PCR及Western blot检测骨折愈合过程中给药组和对照组骨折后3、7、10、14、21和28天骨痂中BMP-2的表达,同时应用ELISA检测血清中BMP-2的含量。结果 RT-PCR结果显示,给药组BMP-2基因表达高峰出现在第7天,对照组出现在第14天,且峰值较低。同时Western blot结果显示,术后7~14天骨痂中BMP-2蛋白给药组明显高于对照组,术后21~28天给药组与对照组没有明显差异。血清学检测两组BMP-2升高,在术后14天含量达到高峰,且给药组明显高于对照组（P〈0.05）。结论洛伐他汀明显促进颌骨骨折愈合过程中BMP-2的合成与分泌,进而有利于骨折的愈合。

钛板内固定治疗下颌骨骨折的临床疗效观察

本文研究的主要目的,就是对下颌骨骨折患者进行治疗的时候,应用钛板内固定的方式进行治疗取得的临床效果。采用的方法是选择近两年在我院接收治疗的41例下颌骨骨折患者,作为研究对象,对其进行分组。对照组患者20例,采用经颌间结扎的方法进行治疗;观察组患者21例,采用手术钛板内固定方法进行治疗。比较其治疗效果。得出的结果是,对照组的治疗有效率为75.00%,观察组的为100.00%,组间比较差异明显,且P<0.05,说明满足统计学条件。最终得出的结论,在临床治疗中,采用钛板内固定方法治疗下颌骨骨折,临床治疗效果明显,能显著促进患者咬合关系恢复正常及骨折复位,非常值得在临床上推广使用。

牙周基础治疗对2型糖尿病合并慢性牙周炎患者糖脂代谢及炎症反应的影响

目的:探讨牙周基础治疗对2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)合并慢性牙周炎患者糖脂代谢及炎症反应的影响。方法:按照随机数字表法将2019年1月-2019年12月笔者医院收治的150例T2DM合并慢性牙周炎患者分为对照组与观察组,每组75例。对照组患者进行糖尿病常规治疗,观察组患者在糖尿病常规治疗的基础上进行牙周基础治疗,均连续治疗3个月。比较两组糖代谢指标[空腹血糖(Fasting blood-glucose,FBG)、餐后2h血糖(2h postprandial blood glucose,2hPG)、糖化血红蛋白(Glycosylated hemoglobin,HbA1c)],脂代谢指标[总胆固醇(Total cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglyceride,TG)、低密度脂蛋白(Low density lipoprotein,LDL)、高密度脂蛋白(High density lipoprotein,HDL)]及炎症因子[肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、IL-10]的变化。结果:治疗后,观察组的FBG[(5.99±0.40)mmol/L vs(6.87±0.80)mmol/L]、2hPG[(7.41±0.46)mmol/L vs(8.93±0.90)mmol/L]、HbA1c[(6.45±0.58)%vs(7.84±0.66)%]水平均明显低于对照组(P<0.05);观察组的TG[(0.98±0.22)mmol/L vs(2.20±0.79)mmol/L]水平明显低于对照组(P<0.05);观察组的TNF-α[(1.15±0.32)pg/ml vs(2.87±0.65)pg/ml]、IL-1β[(0.40±0.15)pg/ml vs(3.71±0.94)pg/ml]水平明显低于对照组(P<0.05),IL-10[(11.25±1.44)pg/ml vs(7.82±1.90)pg/ml]水平明显高于对照组(P<0.05)。结论:牙周基础治疗对T2DM合并慢性牙周炎患者的糖脂代谢及炎症反应具有明显的改善作用。

核转录因子-κB/p65在口腔鳞癌患者中的表达研究

目的通过对NF-κB/p65在口腔鳞癌中表达进行研究,初步探讨它们在口腔鳞癌中的作用,为临床治疗提供一种新的思路。方法无菌提取口腔癌患者及其对照外周血单核细胞,利用实时定量PCR检测p65的基因表达,通过Western blot检测单核细胞中的p65的磷酸化水平,并通过免疫组化技术检测癌组织中的p65的表达水平的差异。结果口腔癌患者外周单核细胞p65的基因表达明显增加,p65磷酸化水平也明显增强。口腔癌组织中p65的磷酸化水平较正常组织明显明显增加。结论核转录因子-κB/p65在口腔癌的发生发展过程中被大量表达并大量被激活,可能在其侵袭和转移中发挥重要作用,以此将为口腔癌的发病机理及治疗提供分子生物学基础。