为精准医学时代头颈病理亚专科发展助力——河北省医学会病理学分会头颈学组工作纪要

随着精准医学深入发展,病理学已从传统形态学诊断迈向更全面细化的病理学时代,成立专科病理学组已十分必要,这将为疾病预后判断及个体化治疗提供精确指导。1头颈病理学组成立是承载病理亚专科发展的载体分子生物学技术的飞速发展开启了精准医疗时代,疾病治愈率和患者生存质量显著提高^[1]。精准医疗的前提是精准诊断。钟南山院士曾说'病理诊断水平代表一个国家的医疗水平'^[2]。

不同HPV检测法及p16表达在喉鳞状细胞癌病理诊断中的应用价值

目的探讨人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)的不同检测方法及p16表达,在喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)病理诊断中的作用和应用价值。方法收集有完整临床病理资料的21例LSCC,按WHO(2017)头颈部肿瘤分类诊断标准,分别采用PCR-DNA反向点杂交法检测肿瘤组织中HPV-DNA,RNAscope法检测HPV 16型及18型E6、E7的mRNA,同时应用免疫组化SP法进行p16染色并分析其表达特点。结果 LSCC患者发病年龄37～62岁,中位年龄46岁;男性13例,女性8例,其中HPV 16-DNA检测5例为阳性(5/21,23. 8%),16例为阴性(16/21,76. 2%)。HPV阳性患者中1例p16强阳性(1/5,20. 0%); HPV 16 mRNA检测8例为阳性(8/21,38. 1%),其中5例同时为HPV 16-DNA阳性,3例p16阳性(3/8,37. 5%); 13例HPV 16 mRNA检测为阴性(13/21,61. 9%)。HPV阳性LSCC组织学多表现为非角化型鳞状细胞癌,肿瘤细胞呈卵圆形或梭形,细胞核深染,核仁不明显,细胞边界不清。结论 LSCC组织主要为HPV 16型,以非角化型鳞状细胞癌为主。应用RNAscope法检测HPV 16 mRNA比PCR-DNA反向点杂交法具有更高的灵敏性和特异性,p16不能作为检测LSCC组织中HPV感染状态的替代标志。

三级医院病理科档案资料分类管理在科室建设中的作用

病理科档案资料主要用于查阅、核实当前患者的病变及与既往病史的关系、提高病理诊断质量、为低年资医师提供学习和科研的资料及解决医疗纠纷提供重要参考依据。加强档案资料分类管理对病理科各项工作的顺利开展具有不可忽视的作用。

E-cadherin在胃癌中的表达及意义

目的检测胃癌中上皮性黏附蛋白(E-cadherin)的表达,探讨其在胃癌发生、发展及转移中的作用。方法应用流式细胞术检测54例胃癌标本中E-cadherin的表达。结果E-cadherin在胃癌组织中的表达量明显低于正常胃黏膜组织,在不同分化程度、不同浸润深度、有无淋巴结转移的胃癌组织之间E-cadherin表达差异有显著性(P<0.05)。结论胃癌组织中E-cadherin的表达,可能是判断患者预后的指标。

口腔鳞状细胞癌组织中HPV感染及EGFR、Sox2蛋白表达与肿瘤预后的相关性

目的探讨口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)组织中人乳头状瘤病毒(human papiloma virus,HPV)感染及EGFR、Sox2表达与肿瘤复发的关系。方法收集OSCC组织标本85例,分别采用PCR-DNA反向点杂交及免疫组化SP法检测蜡块组织中HPV感染及EGFR、Sox2表达,收集患者病理资料并进行随访。结果 HPV在OSCC组织中的检出率为29.4%(25/85),阳性患者以非吸烟者居多,高于阴性患者(P<0.001)。HPV感染与患者性别、年龄、肿瘤部位、临床分期、分级及淋巴结转移无明显相关性(P>0.05);EGFR、Sox2的阳性率分别为69.4%(59/85)、71.8%(61/85);EGFR表达与肿瘤分化程度有关(P<0.001);Sox2表达与肿瘤分化程度及TNM分期有关(P<0.001、P<0.009)。随访2年以上的OSCC患者中17例出现复发(复发组),HPV阳性患者治疗后复发率为5.9%(1/17),低于HPV阴性患者(P=0.037);EGFR、Sox2蛋白在复发组和未复发组中阳性率分别为88.2%、94.1%及64.7%、66.2%;Sox2蛋白在复发组中的阳性率明显高于未复发组(P=0.047)。结论 OSCC中存在一定比例的HPV感染及EGFR、Sox2表达;HPV阳性患者复发率低于阴性患者;EGFR表达与肿瘤分级有关;Sox2表达与肿瘤分级、TNM分期及复发相关。HPV阴性、EGFR及Sox2阳性患者治疗后应定期随诊。

下咽鳞状细胞癌中HPV感染、p16表达及其与患者预后的关系

目的探讨下咽鳞状细胞癌中HPV感染、p16表达及其与患者预后的关系。方法收集46例下咽鳞状细胞癌手术标本,应用免疫组化SP法检测p16的表达;采用PCR-DNA反向点杂交技术检测HPV感染情况,收集临床病理资料并进行随访。结果下咽鳞状细胞癌组织中HPV感染率为26.1%(12/46),HPV感染与患者年龄、性别、发病部位、分化程度、TNM分期无关(P>0.05)。下咽鳞状细胞癌患者p16蛋白阳性率为39.1%(18/46),p16蛋白阳性率与患者年龄、性别、发病部位、分化程度、TNM分期无关(P>0.05)。HPV感染与p16蛋白表达呈正相关(r=0.437,P=0.002)。Kaplan-Meier生存分析显示:HPV阳性者比HPV阴性者中位生存期高(P=0.001);HPV阳性者中位无进展生存期亦高于HPV阴性者(P=0.002)。p16蛋白阳性者比p16阴性者中位生存期高(P=0.001);p16蛋白阳性者中位无进展生存期亦高于p16阴性者(P=0.003)。多因素Cox回归模型分析显示:临床分期、HPV感染及p16表达,是影响患者预后的独立因素(RR值分别为1.969、4.324、0.294,P值分别为0.018、0.015、0.013)。结论下咽鳞状细胞癌中HPV感染与p16蛋白表达相关,临床分期早、HPV感染及p16阳性的患者预后较好。

唐山地区头颈部癌组织HPV与肿瘤复发相关性

目的人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)相关头颈部癌构成了头颈部肿瘤一个独特亚组,本研究分析唐山地区头颈部癌组织中HPV检出情况、HPV阳性头颈癌患者的临床病理特征及与肿瘤复发的相关性。方法选取2003-01-01-2013-12-31唐山市头颈疾病病理研究基地头颈部癌手术切除标本418例,采用PCR反向斑点杂交技术检测肿瘤组织中HPV-DNA,分析HPV阳性头颈癌患者的临床病理特征及与肿瘤复发的相关性。结果唐山地区头颈部癌组织中HPV平均检出率为20.8%(87/418),多数为HPV16型,少数为HPV11、HPV35和HPV58型。其中,喉癌、口腔癌、下咽癌和口咽癌组织检出率分别为19.0%(19/100)、29.3%(24/82)、26.1%(12/46)和28.6%(32/112),涎腺腺样囊性癌组织中无一例HPV检出(0/78),不同部位肿瘤组织中HPV检出差异有统计学意义,z=25.245,P<0.001;吸烟组HPV检出率为13.1%,低于非吸烟组33.3%,差异有统计学意义,χ2=17.675,P<0.001;复发组HPV检出率为3.9%,低于未复发组30.7%,差异有统计学意义,χ2=30.164,P<0.001。HPV检出率与患者性别、年龄、肿瘤分级和分期无明显相关性,均P>0.05。多因素Logistic回归分析显示,肿瘤分化程度(OR=1.549,95%CI:1.131~2.122)和HPV感染(OR=0.089,95%CI:0.038~0.210)是影响复发的主要因素,均P<0.01。结论唐山地区头颈部癌组织中HPV检出率低,HPV阳性者多为非吸烟患者;肿瘤分化程度低及HPV阴性的头颈癌患者复发率高;常规HPV检测对头颈癌患者的肿瘤复发有预警作用。

MMP-9在骨肉瘤中的表达及意义

目的检测骨肉瘤中MMP-9的表达,探讨其在骨肉瘤发生、发展及转移中的作用。方法应用免疫组织化学技术检测46例骨肉瘤标本中MMP-9的表达。结果MMP-9在骨肉瘤组织中的表达量明显高于良性骨肿瘤组织,在有无软组织浸润及不同Ennecking分期的骨肉瘤之间比较,MMP-9表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论骨肉瘤组织中MMP-9高表达,MMP-9在骨肉瘤发展中起重要作用。

CD105在胃癌中的表达及意义探讨

目的检测胃癌患者中CD105的表达,探讨其在胃癌发生、发展及转移中的作用。方法应用流式细胞术检测54例胃癌标本中CD105的表达,并与11例正常胃黏膜组织作对照。结果 CD105在胃癌组织中的表达量明显高于正常胃黏膜组织(P<0.01);不同浸润深度、有无淋巴结转移的胃癌组织之间CD105表达差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 CD105高表达与胃癌预后有关。

血管内皮生长因子在乳腺癌中的表达及其意义

目的探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在乳腺癌中的表达,探讨其与病理参数的关系。方法应用流式细胞术检测53例乳腺癌及15例正常乳腺组织中VEGF的表达。结果乳腺癌中VEGF表达的阳性率为81.1%,与正常乳腺组织表达差异有统计学意义。VEGF的表达随着组织学分级增高,VEGF在有淋巴结转移组高表达。结论VEGF可能参与乳腺癌的血管生成,与预后有一定相关性。

肛周一穴肛原癌1例

患者,女,19岁,主因肛门区肿物伴疼痛入院。入院以来,无血便、无消瘦。查体：心肺肝脾无异常,截石位肛周3~6点位距肛缘2cm处可见2.5cm×2.0cm×2.0cm大小一硬性肿物,色红、质硬,无波动感,压痛轻,活动度差,边界清楚。肛门指诊：直肠黏膜光滑，未触及肿物，指套无脓血及血性分泌物。患者被诊断为肛周脓肿而行手术治疗，局部麻醉下将肿物连同其上皮肤一并切除至基底层正常组织为止。病理检查：肿物切面为灰白色鱼肉状实质组织，质地较硬。镜下所见：肿瘤呈不规则巢状生长，基底细胞样癌癌细胞较小，

涎腺分泌性癌7例并文献复习

目的根据WHO(2017)涎腺肿瘤分类新标准,对既往已确诊的65例涎腺腺泡细胞癌病理诊断重新复查阅片。方法连续选取唐山市协和医院病理科2015-01-2018-12期间,依据WHO(2005)涎腺肿瘤分类标准已确诊的涎腺腺泡细胞癌65例,再依据WHO(2017)涎腺肿瘤分类诊断新标准,结合组织形态、免疫组织化学染色和荧光原位杂交检测结果进行重新分类。结果65例涎腺腺泡细胞癌中有7例为分泌性癌,涎腺分泌性癌的病理形态与腺泡细胞癌极其相似,但免疫组化Mammaglobin、S-100蛋白(+),Dog-1蛋白(-),荧光原位杂交显示ETV6基因重排。结论涎腺分泌性癌与腺泡细胞癌组织形态极其相似,仅依靠常规形态特征较难鉴别,结合免疫组化和荧光原位杂交检测结果可以有效鉴别分泌性癌与腺泡细胞癌。

唐山地区EBV及HPV感染与口咽鳞癌预后相关性分析

目的检测唐山地区口咽鳞癌(oropharyngeal squamous cell carcinoma,OPC)组织中EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)和人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染情况及其对疾病预后判断的价值。方法选取2003-01-01-2010-12-31唐山市协和医院明确诊断的OPC手术切除标本98例,分别采用原位杂交及PCR-反向点杂交方法检测蜡块组织中EB病毒编码的小RNA(EBV-encoded small RNA,EBER)及HPV感染情况,同时对所有患者进行电话随访。应用SPSS 18.0进行统计分析,Kaplan-Meier模型分析中位生存期,Log-rank检验比较生存曲线,Cox回归模型进行多因素分析。结果 98例OPC组织中29.6%(29/98)检测出HPV感染,4.1%(4/98)检测出EBER阳性;HPV感染与口咽癌患者的性别、年龄、饮酒状态、肿瘤部位、临床分期及分级均无明显相关性;HPV阳性病例以非吸烟者居多,明显高于吸烟者,P<0.001。Kaplan-Meier生存曲线显示,随访>30个月OPC患者中Ⅰ和Ⅱ期中位生存期为29个月,明显高于Ⅲ和Ⅳ期19个月,χ2=36.602,P<0.001;HPV阳性患者的中位生存期为35个月,高于HPV阴性患者23个月,χ2=34.413,P<0.001;病理分级为高、中分化患者的中位生存期分别为39和27个月,明显高于低分化的患者19个月,P<0.001。EBER表达与患者的各临床特征均无明显相关性;EBER阳性的OPC患者总体生存率与阴性患者比较差异无统计学意义,P=0.200。结论唐山地区OPC组织中存在一定程度的HPV及EBV感染情况,HPV阳性、临床分期早及分化程度高的OPC患者具有较好的预后。EBV感染对OPC患者的预后并无明显的判断价值。

光生物调节促进慢性低灌注大鼠海马神经元再生改善认知功能及其抗炎症作用

目的探讨光生物调节(photobiomodulation,PBM)对脑慢性低灌注大鼠海马神经元再生及认知功能和炎症损伤的影响。方法将雌性SD大鼠去双侧卵巢,1周后随机分为假手术组(Sham)、BCCAO组、PBM干预组(BCCAO+PBM),每组8只。BCCAO组永久性结扎大鼠双侧颈总动脉(bilateral common carotid artery occlusion,BCCAO)建立脑慢性低灌注模型,但不予光照;Sham组只钝性分离左、右侧颈总动脉,但不结扎,不予光照。BCCAO+PBM组在永久性结扎BCCAO的基础上,采用808 nm激光隔日照射大脑额叶皮层1个月,每次5 min,光剂量为20 mW/cm^(2)。造模完成后第86~90天行Morris水迷宫测试观察大鼠的空间学习记忆功能,第90天处死大鼠进行免疫荧光染色和Western blot分析。免疫荧光染色检测海马齿状回(dentate gyrus,DG)区细胞增殖标记物5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)、星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、新生神经元前体细胞的特异性标志蛋白DCX、成熟神经元标志蛋白NeuN以及小胶质细胞标志蛋白Iba1的表达情况。Western blot分析海马区Iba1,炎症小体组成NLRP3、ASC、cleaved caspase-1的蛋白水平。结果水迷宫潜伏实验中,与BCCAO组相比,PBM干预组大鼠找到水下平台的时长缩短;在探索实验中,移除平台后大鼠在原平台象限探索的时间增加(P<0.05)。与BCCAO组相比,PBM干预组GFAP、Iba1的免疫荧光强度减弱(P<0.01);与Sham组和BCCAO组相比,PBM干预组可增加海马DG区BrdU阳性细胞的数量(P<0.05);3组间NeuN阳性细胞数差异无统计学意义,而PBM干预组DCX阳性细胞数增加(P<0.001),且DCX~+/NeuN~+共定位的细胞数较BCCAO组增多(P<0.001)。Western blot结果显示,与BCCAO组相比,PBM干预组Iba1、NLRP3、cleaved caspase-1蛋白的表达量均降低(P<0.05),ASC蛋白的表达量差异无统计学意义。结论PBM能有效改善慢性低灌注大鼠的空间学习记忆功能,抑制胶质细胞的激活、降低NLRP3炎症小体介导的炎症损伤,促进大鼠海马DG区内源性神经干细胞的再生。

HPV感染及p53与Cdc2蛋白表达对喉癌术后复发的预测价值

目的检测人乳头状瘤病毒(human papilloma virus,HPV)及p53和Cdc2蛋白表达与喉鳞状细胞癌发生及复发的关系。方法选取2003-01-01-2011-12-31唐山市协和医院92例喉鳞状细胞癌手术切除标本,采用PCR-反向点杂交方法检测喉癌组织中HPV感染情况,SP免疫组化方法检测p53和Cdc2蛋白表达,收集临床病理资料并进行随访。结果随访>2年的喉癌患者中有18例出现复发(复发组),74例无复发(未复发组)。92例喉癌组织中HPV的感染率为19.57%(18/92);喉癌组织中p53和Cdc2蛋白的阳性表达率分别为60.87%(56/92)和65.22%(60/92)。HPV感染、p53及Cdc2蛋白表达与喉癌的分化程度、分期均无明显相关性,P值均>0.05;HPV阳性和阴性喉癌患者术后复发率分别为0(0/18)和24.32%(18/74),差异有统计学意义,χ2=4.007,P=0.045;喉癌复发组和未复发组中的p53蛋白表达率分别为72.22%(13/18)和58.11%(43/74),差异无统计学意义,χ2=0.691,P=0.406;喉癌复发组和未复发组中Cdc2蛋白表达率分别为88.89%(16/18)和59.46%(44/74),差异有统计学意义,χ2=4.307,P=0.038。喉癌组织中HPV的感染与p53(χ2=0.316,P=0.574)及Cdc2(χ2=0.574,P=0.487)蛋白表达均无相关性。结论喉癌组织中存在着一定程度的HPV感染及p53、Cdc2蛋白质的表达,但三者与喉癌的分期及分化程度无关;HPV阳性患者术后复发率低于HPV阴性患者;Cdc2蛋白表达阳性者术后复发率高于阴性患者。HPV感染、p53及Cdc2 3种因素可能参与了喉癌的发生、发展及复发过程。

金龙胶囊联合化疗治疗晚期大肠癌的临床观察

目的：观察奥沙利铂、亚叶酸钙和氟尿嘧啶方案联合金龙胶囊治疗晚期大肠癌的临床疗效和不良反应。方法：80例患者随机分为两组：单纯化疗组（对照组）40例,奥沙利铂130 mg·m-2第1天＋CF 100 mg·m-2第1~5天＋5-Fu 500 mg·m-2第1~5天,每3周为1个周期,2个周期后评价疗效;金龙胶囊＋化疗组（治疗组）40例,在单纯化疗组基础上加服金龙胶囊（北京健生药业有限公司生产）,4粒·次-1,3次·d-1,连续服用30 d为1个疗程,间隔7 d再进行第2疗程。结果：治疗组临床疗效及生活质量改善优于对照组（P〈0.05）,治疗组化疗副反应明显低于对照组（P〈0.05）。结论：金龙胶囊联合化疗可提高晚期大肠癌患者临床疗效及生活质量,同时减轻化疗反应。

49例口咽鳞癌与高危型HPV感染的关联分析

目的高危型人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染与多种头颈部鳞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)的发生有关,口咽鳞癌(oropharyngeal squamous cell carcinoma,OPSCC)是HNSCC中的常见类型。本研究检测OPSCC组织中HPV及p53、p21、Cdc2蛋白的表达情况,探讨OPSCC预后影响因素及其临床检测价值。方法收集2012-01-01-2017-12-31唐山市协和医院头颈病理研究基地临床资料完整的OPSCC蜡块49例。采用RNAscope法检测肿瘤组织中HPV 16型、18型的E6、E7mRNA,免疫组化SP法观察p53、p21及Cdc2蛋白表达,对所有病例进行生存情况随访。Kaplan-Meier法分析中位生存时间,Log-rank检验进行预后单因素分析,Cox回归模型进行多因素分析。结果HPV-DNA检测阳性患者28.6%(14/49),阴性为71.4%(35/49);所有病例进行HPV16型E6、E7mRNA检测,阳性率为40.8%(20/49),其中11例同时为HPV 16DNA阳性;HPV 18-mRNA阳性患者4.08%(2/49);HPV16/18mRNA检测阴性患者55.1%(27/49);HPV检出多为非吸烟组患者68.8%(11/16),高于吸烟组患者33.3%(10/33),χ^2=5.463,P=0.019,差异有统计学意义;HPV检出与患者性别、年龄、饮酒、肿瘤分化程度及临床分期均无关,均P>0.05;p53在OPSCC组织中的表达率为63.3%(31/49),p21为65.3%(32/49),Cdc2为67.3%(33/49)。p53、p21及Cdc2蛋白表达与患者性别、年龄、吸烟、饮酒、肿瘤分化程度及临床分期无关,均P>0.05;HPV检出与p53、p21及Cdc2蛋白表达无关,均P>0.05;Cox多因素回归分析提示HPV检出(HR=0.275,95%CI:0.146~0.517)、肿瘤分化程度(HR=1.751,95%CI:1.231~2.492)、分期(HR=3.268,95%CI:1.758~6.074)及Cdc2蛋白表达(HR=1.804,95%CI:0.990~3.286)与患者生存期有关,均P<0.05。结论HPV阳性OPSSC多为非吸烟患者;HPV阴性、分化程度低、临床分期晚及Cdc2阳性表达的患者提示预后不良,临床需加强随访。