白皮杉醇对青光眼大鼠视网膜神经节细胞的保护作用

目的观察白皮杉醇对青光眼大鼠视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)的保护作用并探讨其可能的机制。方法将40只大鼠随机分为对照组、模型组、白皮杉醇低剂量组和白皮杉醇高剂量组。采用光凝法建立青光眼大鼠模型,白皮杉醇低、高剂量组分别给予100 mg·kg^(-1)和200 mg·kg^(-1)白皮杉醇灌胃。测量各组大鼠眼压;荧光金逆行标记各组大鼠RGCs并计数;HE染色观察各组大鼠视网膜组织病理形态;免疫印迹法检测各组大鼠视网膜组织中磷酸化原癌基因蛋白Jun(proto oncogene protein Jun,c-Jun)氨基末端激酶(phosphorylation c-Jun N-terminal kinase,p-JNK)、磷酸化c-Jun(phosphorylation c-jun,p-c-Jun)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(phosphorylation extracellular regulated protein kinases,p-ERK)、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶p38(phosphorylation mitogen activated protein kinases p38,p-p38 MAPK)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)蛋白表达。结果模型组眼压、p-JNK、p-c-Jun、p-ERK、p-p38 MAPK和TNF-α蛋白表达均显著高于对照组(均为P<0.05),RGCs低于对照组(P<0.05),视网膜组织结构可见空泡和水肿样改变。与模型组相比,白皮杉醇低剂量组和白皮杉醇高剂量组大鼠RGCs显著增多(P=0.003、P=0.002),视网膜组织水肿和空泡样状况改善,p-JNK、p-c-Jun、p-ERK、p-p38 MAPK和TNF-α蛋白表达明显减少(均为P<0.05),且高剂量组的改善作用更为显著。结论白皮杉醇具有保护青光眼大鼠RGCs的作用,其作用机制可能与抑制MARK信号通路有关。

改良纳米羟基磷灰石/聚乙烯醇多孔复合水凝胶人工角膜材料的生物相容性

背景:如何提高人工角膜在宿主体内的稳定性,减少并发症仍是当前需要解决的关键问题。因此寻找一种理想的生物相容性高的支架材料仍是研究的重点。目的:探讨改良纳米羟基磷灰石/聚乙烯醇多孔复合物水凝胶和单纯聚乙烯醇水凝胶作为人工角膜材料的生物相容性。方法:(1)倒置显微镜观察改良纳米羟基磷灰石/聚乙烯醇和单纯聚乙烯醇提取液培养48 h后兔角膜基质成纤维细胞生长情况;(2)MTT法检测改良纳米羟基磷灰石/聚乙烯醇和单纯聚乙烯醇提取液培养不同时间兔角膜基质成纤维细胞的相对增殖率;(3)新西兰白兔进行人工角膜移植实验,于植入48 h后观察过敏、热原反应以及死亡情况;(4)人工角膜植入4周后取角膜进行苏木精-伊红染色;(5)人工角膜植入4周后,采用ELISA检测血清炎症因子水平;(6)人工角膜植入1-4周,裂隙灯观察角膜、结膜充血水肿、角膜新生血管变化,并统计新生血管出现时间以及新生血管生长面积评分。结果与结论:(1)与空白对照组相比,加入2种人工角膜材料提取液培养细胞48 h后,细胞均稀疏,生长速度缓慢,改良纳米羟基磷灰石/聚乙烯醇组细胞较聚乙烯醇组生长较快,呈梭形,拉丝现象不明显;(2)与空白对照组相比,加入2种材料提取液培养细胞不同时间后,细胞相对增殖率均明显降低(P<0.05),改良纳米羟基磷灰石/聚乙烯醇组的细胞增殖率高于聚乙烯醇组(P<0.05);(3)植入2种材料48 h后,改良纳米羟基磷灰石/聚乙烯醇组仅有2只兔子发生过敏反应,无热原反应和死亡,而聚乙烯醇组有2只兔发生过敏反应,2只发生热原反应,无死亡;(4)植入4周后,与空白对照组比较,两组兔血清炎性因子水平明显增加(P<0.05),改良纳米羟基磷灰石/聚乙烯醇组的炎性因子水平少于聚乙烯醇组(P<0.05);(5)改良纳米羟基磷灰石/聚乙烯醇组新生血管出现时间晚于聚乙烯醇组,新生血管生长面积小于聚乙烯醇组(P<0.05);(6)结果表明,改良纳米羟基磷灰石/聚乙烯醇多孔复合水凝胶作为人工角膜材料,在细胞生物相容性方面均优于单纯聚乙烯醇水凝胶,这为临床上人工角膜材料的应用提供了科学依据。