喀拉库勒湖两株侵染同一宿主黄杆菌低温噬菌体的分离及生物学特性研究

低温噬菌体作为高原湖泊中的主要生物类群,在调控原核菌群结构及C,N等元素循环方面意义重大.从喀拉库勒湖中分离纯化低温噬菌体并对其生物学特性进行研究,采用双层平板法分离纯化低温噬菌体,利用透射电镜观察噬菌体粒子形态;结合16S rDNA序列比对及系统发育分析确定宿主菌分类地位;对噬菌体最佳感染复数、一步生长曲线和吸附速率等基本生物学特性进行比较,分析理化因素对噬菌体的影响;采用PEG沉淀法浓缩噬菌体颗粒;酚-氯仿法提取噬菌体基因组并进行酶切.结果表明:从喀拉库勒湖分离到两株能侵染同一宿主黄杆菌Flavobacterium sp.KHhb03的噬菌体KH-sph01和KH-sph02,其均能在4℃侵染宿主并增殖,从形态上分别归属为长尾噬菌体科(Siphoviridae)和肌尾噬菌体科(Myoviridae).KH-sph01和KH-sph02均对热敏感,在pH值为7~8范围内最稳定,对氯仿、表面活性剂等不敏感,对蛋白酶K敏感;最佳感染复数分别为10和0.1,吸附速率均较强,裂解量分别为3.16个和10.22个,基因组均为dsDNA,初步估算基因组大小分别为60~65 kb和40~45 kb.得出噬菌体KH-sph01和KH-sph02能侵染同一宿主菌Flavobacterium sp.KHhb03,但生物学特性各异.