基于DNA条形码技术甜瓜迷实蝇的分子鉴定

以口岸截获的甜瓜迷实蝇蛹和成虫作为研究对象,提取其基因组DNA,检索ITS2、COI、COII、CYTB基因引物,PCR扩增后产物用双脱氧法测序,结合Genebank中的相关数据,借助生物信息学分析软件验证甜瓜迷实蝇分子鉴定序列,构建NJ系统进化树,分析遗传进化关系,以获得更多甜瓜迷实蝇快速鉴定的分子数据.结果表明,从甜瓜迷实蝇蛹和成虫中获得的8条序列,仅有COI基因达到鉴定标准;ITS2、COII、CYT-B基因未达到鉴定标准,并非数据质量不合格,而是NCBI数据库相关数据不足.由于研究扩增模板相同,此类序列为新发掘的甜瓜迷实蝇的序列,从NJ系统进化树聚类分析可以看出,这些序列均可作为甜瓜迷实蝇分子鉴定序列.

滴灌棉花源库器官对化学打顶的响应特征

【目的】研究化学打顶对棉花光合特性及不同部位棉铃物质积累的影响和变化规律,为棉花优质高产提供基础。【方法】以新陆中70号和新陆中82号为材料,设置2种化学打顶药剂,人工打顶为对照。【结果】在喷施药剂10 d后,化学打顶处理的主茎功能叶净光合速率较人工打顶高,中上部叶片SPAD值化学打顶处理高于人工打顶处理,而新陆中82号下部叶片SPAD值表现为化学打顶低于人工打顶;新陆中70号积累量大于新陆中82号,但积累速率小于新陆中82号;化学打顶处理的全铃干物质积累表现为前2个花期促进后期棉铃的物质积累,2个品种分别是发育35和28 d后,而7月21日开花期促进是前期棉铃的物质积累,分别是发育28和21 d内;化学打顶处理的前2个开花期的增长特征值时间较人工打顶处理的有所推迟或增加,而7月21日开花期表现为化学打顶处理较人工打顶均有前移和增加,最大增长速率均表现为化学打顶处理大于人工打顶处理。【结论】化学打顶可以提高棉花主茎功能叶的光合作用,加速棉铃物质积累速率,有利于棉铃集中吐絮。

基于多壁碳纳米管作为吸附剂的分散固相萃取/GC-MS对食用植物油中16种多环芳烃的快速测定

为了快速检测食用植物油中的16种多环芳烃(PAHs),以氨基化多壁碳纳米管(NH2-MWCNTs)作为样品前处理的吸附剂,采用分散固相萃取(d-SPE)/气相色谱-质谱联用(GCMS)同时测定食用植物油中的16种PAHs。通过单因素实验对样品前处理条件(吸附剂用量、吸附时间、洗脱剂类型及用量、洗脱时间)进行了优化,对所建立的方法进行了方法学考察,并与已有检测方法进行了对比分析,同时采用所建立的方法对实际样品进行了测定。结果表明:样品前处理最优条件为吸附剂用量15mg(样品食用植物油质量1.0g)、吸附时间1min、洗脱剂甲苯、洗脱剂用量500μL、洗脱时间5min;16种PAHs在1~200μg/kg范围内线性关系良好,方法的检出限在0.05~0.43μg/kg之间,定量限在0.17~1.42μg/kg,加标回收率和相对标准偏差分别为70.67%~101.83%和1.34%~9.32%;与已有前处理方法相比,d-SPE高效、简便,且最大程度地减少了有机溶剂的消耗;6种市售食用植物油中苯并[a]芘含量均小于2μg/kg。综上,所建立的方法适用于食用植物油中16种PAHs的测定。

马病毒性动脉炎病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立

为建立检测马病毒性动脉炎病毒(EAV)的荧光定量RT-PCR检测方法,本研究针对EAV ORF7基因序列设计引物及探针,并对其反应体系进行优化,建立标准曲线,结果显示,EAV荧光定量RT-PCR方法在退火温度为61℃、引物和探针终浓度均为0.6μmol/L的反应条件下效果最优;质粒标准品体外转录的cRNA在1.6×10^(7)拷贝/μL~1.6×10^(2)拷贝/μL时与Ct值之间呈现良好的线性关系,标准曲线方程为y=-2.68x+32.88,R^(2)=0.9927,初步建立了EAV荧光定量RT-PCR方法。采用该方法检测EAV、马焦虫、马疱疹病毒1型、马疱疹病毒4型、马流感病毒,结果显示,该方法仅能特异性检测到EAV,其他病原检测均为阴性,该方法特异性强;将体外转录合成的质粒标准品cRNA 10倍倍比稀释后利用该方法检测,结果显示该方法最低检测限为1.6×10^(2)拷贝/μL,灵敏性高;重复性试验结果显示,该方法组内及组间变异系数均小于2.0%,重复性好。采用本实验建立的荧光定量RT-PCR方法和文献发表的EAV荧光定量RT-PCR方法分别对234份临床样品进行检测,两者的阳性检出率均为14.1%(33/234),两种方法的符合率为100%。本研究建立的荧光定量RT-PCR检测方法为马病毒性动脉炎的防控提供了新的技术手段和思路。

全自动消解-原子荧光法测定管网水中硒和砷

建立了全自动湿法消解–氢化物发生原子荧光光谱法同时对水中痕量硒(Se)和砷(As)元素进行分析测定的方法。标准曲线线性关系良好(r≥0.9995),方法加标回收率(n=6)为89.0%~104.2%,RSD值(n=6)为1.3%~6.4%,方法检出限分别为0.048μg/L及0.051μg/L。该法具有操作简单和高效分析的优点,并成功用于大批量水中硒和砷的同时定量分析。

株行距配置对南疆无地膜棉花农艺和产量性状的影响

为筛选出适宜南疆无地膜机采棉花的合理株行距配置,本试验以中619为供试品种,在幅宽2.28 m机采棉种植模式下,设置3种株行距配置,依次为D1(一幅三行,76 cm等行距,株距7 cm)、D2(一幅四行,行距为70 cm+12 cm+70 cm,平均行距57 cm,株距10 cm)、D3(一幅六行,行距为10 cm+66 cm+10 cm+66 cm+10 cm,平均行距38 cm,株距14.6 cm),研究不同株行距配置对南疆无地膜棉花农艺和产量性状的影响。结果表明:棉花株高、主茎日增长量、茎粗随着行距增大呈增加趋势;中部叶面积指数,D1较D3处理高43.11%。各处理光分布均呈“V”型曲线,不同处理间差异显著,D1处理光照度最大,D2次之,D3最小。综合棉铃横向和纵向分布来看,D2处理棉铃空间分布最合理,对增加群体产量效果明显;棉铃纵向表现为中部铃>上部铃>下部铃,中部铃在群体产量形成中作用较大;棉铃横向分布表现为内围铃>外围铃,产量主要来源于内围铃。D2处理产量(5 528.75 kg·hm^(-2))显著高于D1(5 064.57 kg·hm^(-2))和D3处理(4 798.98 kg·hm^(-2))。综上,南疆无地膜棉花在一幅四行的株行距配置下,株型及冠层结构较优,产量最高。

超声萃取-高效液相色谱法同时测定纺织品中4种限用酰胺类物质

建立了超声辅助萃取高效液相色谱(HPLC)法测定纺织品中4种酰胺类物质的方法。样品经甲醇超声提取后,采用Athena C18-WP反相色谱柱分离,以磷酸二氢钾水溶液和乙腈为流动相等度洗脱,以DAD为检测器进行定性定量分析。结果表明,1-甲基-2-吡咯烷酮、N,N-二甲基乙酰胺、N,N-二甲基甲酰胺、甲酰胺等4种酰胺类物质的定量限分别为0.38、0.28、0.20、0.32 mg/kg,回收率分别为92.3%~99.4%、90.5%~99.2%、93.4%~99.2%、93.5%~98.7%,相对标准偏差分别为3.41%~7.25%、3.12%~8.21%、2.74%~6.85%、2.74~7.42%。实验结果满足残留物技术分析要求。

污水污泥无害化改性生物碳基有机肥的研究进展

污水污泥因其数量巨大,处理难度较高,探究处理新工艺已显得十分迫切。为深入解决污泥处置与矿物肥料紧缺的问题,以污水污泥无害化处理改性有机矿物肥料的研究为引导,简述了有机矿物肥料在改善作物生长与减少营养物质在环境中的损失方面的极大潜力。通过回顾近些年矿物肥料的需求量、价格与时间的关系,分析污水污泥的处置方式与所含有机成分对提高土壤肥力的作用,表明污水污泥无害化改性生物碳基有机矿物质肥料在提高土壤肥力的效果方面具有极大的应用前景。通过总结和对比可预测将污泥中提取的有机矿物肥料经添加矿物元素后进行有效改良,并加入一定量的酸或碱进行灭菌后,可显示出比常规肥料更加高效的作物产量反应值,同时营养物质的缓慢释放效应显示出更加高效和持久的肥效释放能力。

液相色谱-串联质谱法测定纺织品中全氟2-甲基-3-氧杂己酸

建立了测定纺织品中全氟2-甲基-3-氧杂己酸的液相色谱-串联质谱方法。样品经甲醇超声萃取,再经C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱分离,以乙腈和10 mmol/L的乙酸铵水溶液为流动相梯度洗脱,经液相色谱-串联质谱测定,电喷雾离子源,负离子模式检测,外标法定量。结果表明:全氟2-甲基-3-氧杂己酸在质量浓度为0.1~5.0μg/mL范围内具有优良的线性关系,线性相关系数大于0.995,定量检测下限为1.0 mg/kg,加标回收率在87.4%~107.0%,相对标准偏差(RSD)均小于7.5%。该方法操作简单、灵敏度高、能够满足纺织品中痕量残留物的检测要求。

六种蚊虫DNA条形码序列分析

传统分类学鉴定需要有完整无残缺的成虫标本,对于非昆虫分类学研究人员应用传统分类学方法鉴定蚊虫较为困难;本研究旨在发掘更多适用于蚊类鉴定的DNA条形码,实现口岸一线蚊类的快速准确鉴定。本文通过提取14个蚊虫样品的基因组DNA,使用通用引物PCR扩增ITS1、ITS2、Cytb、COI基因及序列,PCR产物双脱氧法测序,结合NCBI中相关数据分析部分ITS2、Cytb、COI序列的相似性和遗传关系。结果显示:获得了14个蚊虫样品的部分ITS1、ITS2、Cytb、COI序列的非全长碱基序列共计39条;依据种内遗传距离和相似度将14个未知蚊虫分子分类鉴定为6种蚊虫:凶小库蚊、致倦库蚊、尖音库蚊、赫坎按蚊、白纹伊蚊、里海伊蚊;碱基使用率统计表明所测样品的Cytb、COI基因符合昆虫线粒体DNA碱基组成;构建基因ITS2、Cytb、COI系统进化树,符合蚊虫系统发育遗传进化理论。本研究对14个未知蚊虫样品的进行了分子鉴定,为蚊类的快速准确识别鉴定提供基础数据。

检疫性有害生物枣咔实蝇的快速分子鉴定

枣咔实蝇Carpomya vesuviana Costa是枣树果实的一种重要检疫性害虫,其寄主枣树在我国种植广泛,该虫一旦传入和扩散,将对我国新疆红枣产业造成严重危害。本研究以枣咔实蝇蛹和成虫为对象,通过提取枣咔实蝇蛹和成虫样品的基因组DNA,借助生物信息学分析软件挖掘枣咔实蝇ITS2、16S rRNA、CYT-B-D、CYT-B-C、COI-5'、COI-3'、COII等分子鉴定靶点序列并设计扩增引物,以建立枣咔实蝇的快速分子鉴定技术。PCR扩增、测序和序列相似性结果显示,从枣咔实蝇蛹和成虫中获得的16条序列(含14条新序列),分析表明其中CYT-B、COI、COII可作为枣咔实蝇分子鉴定序列。该技术可应用于枣咔实蝇的识别鉴定、实时监测、早期防治等项工作。

水热合成不同形貌的纳米三氧化钨及形成机理探讨

以钨酸钠和盐酸为原料,柠檬酸、酒石酸、对硝基苯甲酸、对氨基苯甲酸和尿素为辅助试剂,在一定温度下通过水热法制备出不同形貌的纳米三氧化钨。对所得产物进行X射线衍射(XRD)、透射电镜(TEM)和扫描电镜(SEM)的分析。结果表明:使用不同的助剂将制备不同形貌的纳米三氧化钨,推测可溶性有机酸在水热反应中起到"软模板剂"的作用,尿素在高压下产生的气体有助于增强产物的分散性,得到尺寸均匀的纳米粉体。

出入境人员传染病检测结果分析及新形势下卫生检疫应对策略研究

为了对我国出入境人员传染病检测结果进行分析,制定有效的卫生检疫应对策略,本文选取我国59475名出入境人员作为研究对象,对其传染病检测数据进行统计分析。结果显示,其中有794例传染性疾病,病毒性肝炎阳性率为0.12%,梅毒阳性率为1.15%,人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体阳性率为0.04%,肺结核阳性率为0.03%。劳务人员在出境人员总人数中占比例最大,为91.67%;入境人员主要以留学人员为主,其占总人数的4.19%。我国现阶段应该将出入境人员传染病的检测工作重点放在劳务人员的健康体检方面,充分重视梅毒、艾滋等检出率逐渐上升的疾病,并积极做好卫生检疫工作。

基于DNA条形码基因快速鉴定帕米尔高原南麓部分地区农田叶蝉

【目的】研究更加便捷高效的鉴定技术,提高叶蝉鉴定的速率,为帕米尔高原南麓部分地区叶蝉的鉴定及防治提供基础数据。【方法】利用DNA条形码技术,选择mtDNA COI、Cytb、ITS2基因,运用通用引物PCR扩增并直接测序,借助生物信息学分析软件对比分析目的基因序列的相似性,构建系统进化树,分析遗传进化关系,获取叶蝉DNA条形码。【结果】获得了19条mtDNACO1、Cytb及ITS2基因序列,COI基因6条、Cytb基因7条、ITS2基因6条,可作为叶蝉的DNA条形码,包括其中1条COI新序列,5条Cytb和6条ITS2序列。【结论】获得19条叶蝉的DNA条形码,实现了帕米尔高原南麓部分地区农田4种叶蝉的快速准确鉴定。

基于人才需求的动植物检验检疫专业实践教学改革

为了培养高素质人才,文章首先分析了动植物检验检疫行业人才需求,然后论述了动植物检验检疫专业实践教学存在的问题,最后提出了基于人才需求的动植物检验检疫专业实践教学改革策略。

国境口岸国际关注的突发公共卫生事件风险措施探讨

本文对国境口岸国际关注的突发公共卫生事件风险措施进行了深入性的探讨,对突发公共卫生事件风险识别的必要性、突发公共卫生事件风险识别的内容进行阐述。根据不同等级的突发公共卫生事件,构建完善的国境口岸突发公共卫生事件风险措施体系,以此更好地加强突发公共卫生事件的防范与控制,降低公共卫生风险事件的发生率,确保出入境人员的生命安全。

检疫性害虫石榴螟的生物学特性及防控措施

石榴螟(Ectomyelois ceratoniae)是一种重要的检疫性害虫,其寄主范围广、危害大。目前该虫在我国尚未分布,但其寄主如石榴、无花果、核桃等经济作物在新疆乃至全国均有栽培,由于该虫可通过水果、干果等植物产品的贸易及非贸易途径传入,又在我国多地中度至高度适生,一旦传入与定殖,将对我国林果产业构成巨大威胁。鉴于国内缺少其生物学特性及防控措施方面的资料,整理国外的相关研究报道,为我国开展针对性的监测预警与防控研究提供参考。

国境口岸病原体检测新方向—重组酶聚合酶扩增技术

作为一项快速、高效、便捷的等温核酸扩增技术,重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)技术运用在病原体检测研究中,表现出灵敏度高、特异度好、用时短、应用广泛、操作简单等优势,有望应用于口岸病原体现场快速检测。本文在对比几种等温核酸扩增技术的基础上,重点介绍RPA技术原理和方法,以几种国境口岸重点关注病原体为例,探讨RPA在病原体检测、生物反恐、移动实验室方面的研究进展,为口岸卫生检疫工作提供新的技术参考和方向。

1株境外输入性新冠病毒奥密克戎BQ.1.1全基因组测序及特征分析

目的 针对1例境外输入性新冠病毒感染者咽拭子样本开展全基因组测序,掌握输入性新冠病毒基因组特征,为口岸新冠肺炎疫情防控提供科学依据。方法 对1例从江苏口岸入境的输入性新冠病毒感染者的咽拭子样本,用二代测序技术进行全基因组测序,并通过生物信息学软件进行序列分析并构建进化树。结果 获得1株输入性新冠病毒全基因组序列(GenBank No. OP804248),基因组全长29 762 bp,基因分型结果显示为奥密克戎BQ.1.1型。与原始毒株(GenBank No. NC_045512.2)相比,该毒株共有78个碱基发生了突变,59个区域发生了缺失;氨基酸突变有62个,氨基酸缺失14个。结论 奥密克戎BQ.1.1型为江苏口岸首次检出的输入性新冠病毒基因型,为当地口岸新冠病毒的溯源及防控提供重要科学依据。

纺织品中4-叔丁基苯酚含量快速测定方法研究

本研究以甲醇为溶剂,建立了超声波萃取-气相色谱-质谱法测定纺织品中4-叔丁基苯酚含量的分析方法。实验考察了萃取方式、萃取溶剂和用量、萃取时间对萃取效果的影响,并对气相色谱和质谱条件进行了优化。结果显示,4-叔丁基苯酚质量浓度在0.1~10μg/mL范围内具有良好线性关系,线性相关系数为0.9996,方法检出限为0.05 mg/kg。并进行了准确度和精密度实验,加标回收率为90.6%~108.2%,相对标准偏差(RSD)小于6.8%,实验室间验证RSD均小于2.6%,说明本方法重现性良好,适用于分析测定纺织品中4-叔丁基苯酚的含量。