新形势下生物化学实验教学改革初探

近年来。随着分子生物学的深入研究。生物化学实验技术和方法得到了飞速发展，这就要求生物化学的实验教学作出相应的改革，以适应新形势下学科创新的需要和培养高素质创新性医学人才的需求。传统的生物化学实验大多是一些验证性实验，注重知识的传授，却忽视学生综合能力的培养和综合素质的提高。教学改革可以从缓解这种矛盾人手，可以尝试把学科发展中的新技术移植到教学实验中，以提高生物化学实验的教学质量，使学生在生化实验技术方面及时跟上生物科学的发展．对培养基本功扎实、动手能力强的创新型医学人才具有重要意义。

基于轮转调度模型的循环模式实验运行改革

为了提高实验设备利用率,降低实验设备损耗率,节约教学资源,提高实验教学的运行管理效率,降低实验教学、管理人员的劳动强度和管理难度,提高学生的实验资源的分配率,提高实验教学质量。我院集中人体解剖学实验室教学资源;在培养方案的基础上,优化实验项目;模块化分配组合各实验项目与实验资源,进行轮转调度、循环进行各实验项目。对于临床医学和护理学两个专业有差别的实验项目在实验运行过程中进行微调。通过改革,解决了人体解剖学实验室资源在传统的"一过性"、"爆发性"利用难题,提高了实验设备的利用率,提高了学生的各实验项目人均资源占有率,极大降低了实验设备的损耗率,节约了实验教学资源购置,降低了实验教学、管理人员的劳动强度和管理难度,提高了教学质量。

高表达人源Her2乳腺癌小鼠模型的建立及鉴定

目的构建并鉴定高表达人源Her2乳腺癌转基因小鼠模型。方法构建pMD18T-MMTV-huHER2-EGFP转基因构件,通过原核显微注射方法将线性化、纯化后的外源质粒pMD18T-MMTV-huHER2-EGFP注射入C57BL/6J小鼠受精卵中,胚胎移植至同期发情的假孕受体母鼠输卵管内,获得子代小鼠。采用PCR鉴定子代小鼠尾部组织基因组DNA,用蛋白质免疫印迹法检测乳腺组织Her2蛋白的表达,通过组织病理学切片观察转基因小鼠乳腺组织的病理学变化。结果经PCR方法检测得到转基因阳性小鼠。蛋白质免疫印迹结果显示,与野生型小鼠相比,F2代阳性小鼠的乳腺组织中Her2蛋白高表达。病理组织切片表明25周龄阳性小鼠的乳腺组织已经出现明显的癌变倾向。结论高表达人源Her2乳腺癌小鼠模型成功建立并能稳定遗传,可自发形成乳腺癌,其生物学特性和病理学改变与人乳腺癌相近,可作为研究乳腺癌发生发展的动物模型。

鼻腔内长期输送脐血单个核细胞对大鼠脑梗死体积及行为学的影响

背景:通过鼻腔输送细胞和具有生物活性的因子到大脑内是一种新的非侵入性输送方法,克服了其他给药方法受到血脑屏障限制和产生外周不良反应的缺点。目的:观察鼻腔内长期输送人脐血单个核细胞大鼠脑梗死梗死体积及行为学的变化。方法:直接切断Wistar大鼠一侧大脑中动脉制作脑梗死模型,将神经功能评分相当的模型大鼠,抽签随机分成对照组、单个核细胞组,随即单个核细胞组从鼻腔滴入培养的第3代人脐血单个核细胞,对照组滴入磷酸盐缓冲液,1次/d,共6周,每周进行1次行为学评价;最后1次行为学评价后行脑梗死体积量化检测。结果与结论:与对照组比较,治疗后3周单个核细胞组脑梗死大鼠改良的神经病学严重程度评分开始改善,之后进一步改善到5周(P<0.05,P<0.01);治疗后1～5周单个核细胞组Morris水迷宫实验平均潜伏期明显缩短(P<0.05,P<0.01),并且随着时间的延长,效果越明显。与行为学改善相一致,单个核细胞组脑梗死体积(9.15±4.36)%较对照组(30.56±4.65)%显著缩小(P<0.01)。说明经鼻腔早期长期输注单个核细胞治疗大鼠脑梗死能改善其行为能力和缩小脑梗死体积,是治疗脑梗死的一种简便易行治疗方法。

经鼻腔长期输送骨髓基质细胞改善大鼠缺血再灌注性脑损伤

背景:经鼻腔黏膜给药是一种可以克服血脑屏障、减少外周不良反应、效能高的脑内给药方式。目的:验证经鼻腔长期输送骨髓基质细胞治疗大鼠缺血再灌注性脑损伤的可行性。方法:贴壁培养法分离大鼠骨髓基质细胞。缺血再灌注脑损伤大鼠随机分成实验组和对照组。实验组经鼻腔滴入骨髓基质细胞,对照组同法给予磷酸盐缓冲液,隔天1次,共4周。每周进行1次行为学评价,最后1次行为学评价后进行脑病理学检测。结果与结论:与对照组比较,从第2周开始神经病学严重程度评分和Morris水迷宫实验检测结果表明实验组行为学逐步改善(P<0.05,P<0.01)。与行为学改善相一致,缺血再灌注导致对照组CA1区海马细胞数量减少了66%,而实验组CA1区细胞丢失明显要少,只丢失了25%(P<0.01)。说明了经鼻腔长期输注骨髓基质细胞具有改善大鼠缺血再灌注脑损伤的作用。

术前口服曲马多缓释剂对瑞芬太尼复合麻醉病人术后急性阿片类药物耐受的影响

目的评价术前口服曲马多缓释剂对靶控输注瑞芬太尼复合麻醉病人术后急性阿片类药物耐受的影响。方法择期拟行腹腔镜胆囊切除术病人60例，ASAⅠ或Ⅱ级，年龄18～64岁，随机分为2组（n=30）：安慰剂组（C组）和曲马多组（T组）。C组于术前48、36、24、12、0．5h时口服维生素C片1片（100mg），T组于相同时点口服曲马多缓释片1片（100mg），共计500mg。两组均采用靶控输注瑞芬太尼和异丙酚复合麻醉，拔除气管导管后在麻醉恢复室（PACU）观察1h送返病房。PACU内静脉注射芬太尼5～10μg，5min后重复注射，维持VAS评分〈4分。病房内采用10μg/ml芬太尼100ml行PCIA（负荷量10μg、背景输注速率20μg／h、PCA剂量5μg、锁定时间15min）。记录PACU内芬太尼用量、术后48h内PCIA芬太尼用量、有效按压次数（D1）和实际按压次数（D2），计算D1／D2比值。结果与C组比较，T组术后PACU内芬太尼用量减少（P〈0．05），术后48h内PCIA芬太尼用量和D1／D2比值差异无统计学意义（P〉0．05）。结论术前口服500mg曲马多缓释剂可减轻靶控输注瑞芬太尼复合麻醉病人术后急性阿片类药物耐受。

小组互评式方法对护理本科生护基操作技能提升效果的影响

目的了解影响本科护理系学生操作技能提升的相关因素，为培养高素质的应用型护理人才提供依据。方法比较两学年220名护理本科生的实践操作技能及理论考核，分析影响学生掌握操作技能的因素。结果2008级理论考试成绩为（87．10±7．50）分（t=4．77，P〈0．01），操作考试成绩为（91．09±5．07）分（t=3．92，P〈0．01），与2007级比较差异具有统计学意义。结论实行小组互评式操作技能培训方法，结合课外开放实验室、模拟病例及护理技能操作竞赛，可明显提升学生的实践操作技能。

慢性前列腺炎患者病原体感染分析

目的探讨慢性前列腺炎患者病原体感染及诊治意义,为慢性前列腺炎的预防治疗提供客观依据。方法将2011年1-12月的86例慢性前列腺炎患者作为研究对象,对其进行病原体检测、药敏试验及荧光标记PCR技术检测。结果 86例患者中沙眼衣原体DNA阳性2例、解脲脲支原体DNA阳性14例、淋菌DNA阳性5例、细菌培养阳性52例,分别占2.33%、16.28%、5.81%、60.47%;52例细菌培养阳性患者中共检出细菌70株,其中革兰阳性球菌57株占81.43%,革兰阴性杆菌13株占18.57%;金黄色葡萄球菌对青霉素G的耐药率最高,达94.12%,对万古霉素100.00%敏感;表皮葡萄球菌对红霉素的耐药率为86.36%,对青霉素G的耐药率为95.45%,对万古霉素100.00%敏感;大肠埃希菌对亚胺培南100.00%敏感,对四环素耐药率较高为77.27%。结论对慢性前列腺炎患者进行病原学分析有助于了解患者的感染情况,及时掌握细菌耐药性的变迁,可促进医师选用敏感的抗菌药物进行合理治疗,对病情的临床诊治意义重大。