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雌二醇通过增加端粒酶活性影响人LECs生长动力学的实验研究
被引量:
3
1
作者
王杰
康刚劲
+3 位作者
袁雪峰
徐曼华
蒋燕
罗波
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第3期219-225,共7页
背景人LECs表达端粒酶活性,其活性改变与白内障的形成相关。研究证实,雌激素能增加人子宫内膜癌及乳腺癌细胞的端粒酶活性,从而发挥促进增生、抗凋亡作用,但能否增加人LECs中的端粒酶活性从而影响其生物学功能,国内外鲜见报道。目...
背景人LECs表达端粒酶活性,其活性改变与白内障的形成相关。研究证实,雌激素能增加人子宫内膜癌及乳腺癌细胞的端粒酶活性,从而发挥促进增生、抗凋亡作用,但能否增加人LECs中的端粒酶活性从而影响其生物学功能,国内外鲜见报道。目的探讨B型雌二醇(β-E2)是否能增加人LECs端粒酶活性及其对人LECs增生和凋亡的影响。方法体外培养并传代人LECs细胞系,先用1×10-6mol/Lβ-E2分别作用人LECs0、6、12、24和48h,采用RT—PCR法确定增加人LECs中端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA表达的最佳时间。将培养的人LECs细胞分为5个组,空白对照组细胞进行常规培养,溶剂对照组在培养液中添加体积分数0.1%乙醇,不同浓度p—E2组分别在培养液中添加1×10-8、1×10-7和1×10-6mol/Lβ-E2,继续培养细胞24h,采用RT—PCR法检测各组人LECs中hHERTmRNA的相对表达量;采用端粒重复序列扩增(TRAP)-ELISA法检测端粒酶活性;采用细胞计数试剂盒-8(CCK_8)法检测各组细胞的增生值;采用Hoechst33258荧光染色法分析人LECs的凋亡情况。结果1×10-6mol/Lβ-E2浓度下能够增加人LECs中hTERTmRNA相对表达量的最佳作用时间为24h。1×10-8、1×10-7和1×10-6mol/Lβ-E2组人LECs中hTERTmRNA的相对表达量分别为0.477±O.015、0.7120.013和0.914和0.031,明显高于空白对照组的0.428±O.010及溶剂对照组的0.426±0.010,差异均有统计学意义(均P〈0.05)。1×10-8、1×10-7和1×10^-6mol/Lβ-E2组端粒酶活性值分别为0.711±O.015、0.941±0.010和1.249±0.047,明显高于空白对照组的0.535±0.013和溶剂对照组的0.543±O.013,差异均有统计学意义(均P=0.000)。1×10-7mol/Lβ-E2组细胞的增生值(A值)明显高于1×10-7mol/Lp—E2组和1×10^-6mol/Lβ-E2组,差异均有统计学意义(均P=0.000),而1×10-7mol/Lβ-E2组和1x10-6moULβ-E2组与空白对照组间细胞中的细胞增生值间差异均无统计学意义(P=0.718、0.856)。1×10-8、l×10-7和1×10^-6mol/Lβ-E2组的细胞凋亡率均低于空白对照组和溶剂对照组(均P=0.000);空白对照组与溶剂对照组间比较差异无统计学意义(P=0.777)。人LECs增生值与hTERTmRNA相对表达量及端粒酶活性值间无明显直线相关关系(r=-0.299,P=0.278;r=-0.157,P=0.576)。人LECs凋亡率与hTERTmRNA相对表达量及端粒酶活性值间均呈明显负相关(r=-0.975,P=0.000;r=-0.981,P=0.000)。结论β-E2能上调人LECs中的端粒酶活性,稍高浓度的β-E2可能通过增加人LECs的端粒酶活性而抑制细胞凋亡,但无促增生作用。
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关键词
晶状体上皮细胞
雌二醇
端粒酶
年龄相关性
白内障
凋亡
增生
细胞培养
细胞系
下载PDF
职称材料
βB_2晶状体蛋白与白内障
被引量:
3
2
作者
蒋燕
康刚劲
+1 位作者
徐曼华
李开明
《国际眼科杂志》
CAS
2016年第2期261-264,共4页
βB_2晶状体蛋白是β族晶状体蛋白中含量最多的一种,在维持晶状体的透明性和屈光性中起着重要作用。βB_2晶状体蛋白异常可能与多种类型白内障的形成有关。近年来,CRYBB_2基因突变所致白内障的机制成为研究的热点。本文将对βB_2晶状体...
βB_2晶状体蛋白是β族晶状体蛋白中含量最多的一种,在维持晶状体的透明性和屈光性中起着重要作用。βB_2晶状体蛋白异常可能与多种类型白内障的形成有关。近年来,CRYBB_2基因突变所致白内障的机制成为研究的热点。本文将对βB_2晶状体蛋白的结构、功能、相关突变、与各类型白内障关系做一综述。
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关键词
βB2晶状体蛋白
白内障
功能
结构
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职称材料
叔丁基对苯二酚对2型糖尿病大鼠视网膜核因子E2相关因子、血红素氧合酶1表达的影响
被引量:
6
3
作者
李晶艳
田敏
+3 位作者
张思远
韩佩晏
黄棋
吕红彬
《中华眼底病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第6期581-585,共5页
目的观察叔丁基对苯二酚(tBHQ)对2型糖尿病(DM)大鼠视网膜组织中核因子E2相关因子(Nrf2)、血红素氧合酶1(HO-1)表达的影响。方法健康雄性Sprague Dawley大鼠60只,随机抽取20只大鼠为正常对照组(NC组),其余40只大鼠为造模组...
目的观察叔丁基对苯二酚(tBHQ)对2型糖尿病(DM)大鼠视网膜组织中核因子E2相关因子(Nrf2)、血红素氧合酶1(HO-1)表达的影响。方法健康雄性Sprague Dawley大鼠60只,随机抽取20只大鼠为正常对照组(NC组),其余40只大鼠为造模组。造模组大鼠腹腔注射30mg/kg剂量链脲佐菌素诱导2型DM模型。剔除血糖恢复鼠5只,造模组随机分成DM组、tBHQ组,分别为17、18只大鼠。tBHQ组大鼠给予添加1%tBHQ的高脂高糖饲料喂养。tBHQ喂养后4、12周,苏木精-伊红染色观察大鼠视网膜组织结构;免疫组织化学染色法检测大鼠视网膜组织中Nrf2、HO-1蛋白表达;荧光定量聚合酶链反应(PCR)测定大鼠视网膜组织中Nrf2、HO—1mRNA表达。结果光学显微镜观察,4周时,tBHQ组大鼠视网膜细胞排列较整齐,个别细胞可见轻度水肿;12周时,视网膜组织结构较清晰,部分细胞水肿。免疫组织化学染色结果显示,4、12周时,DM组大鼠视网膜组织中Nrf2(t=3.115、3.781)、HO-1(t=3.485、3.785)蛋白表达较NC组增多,差异均有统计学意义(P〈0.01)。tBHQ组大鼠视网膜组织中Nrf2(t=2.473、2.576)、HO-1(t=2.785、2.879)蛋白表达较DM组增多,差异有统计学意义(P〈0.05)。DM组组内比较,12周大鼠视网膜中Nrf2蛋白表达较4周时增高,差异有统计学意义(t=0.276,P〈0.05);tBHQ组组内比较,12周大鼠视网膜中Nrf2(t=2.516)、HO1(t=2.776)蛋白表达较4周时增高,差异有统计学意义(P〈0.05)。荧光定量PCR检测结果显示,4、12周时,DM组大鼠视网膜组织中Nrf2(t=4.758、4.285)、H0—1mRNA(t=5.114、4.514)表达较NC组增多,差异有统计学意义(P〈0.05);tBHQ组大鼠视网膜组织中Nrf2(t=5.133、4.976)、HO1mRNA(t=4。758、4.251)表达较DM组增多,差异有统计学意义(P〈0.05)。DM组组内比较,12周时视网膜组织中Nrf2mRNA表达高于4周,差异有统计学意义(t=5.114,P〈0.05);tBHQ组组内比较,12周时视网膜组织中Nrf2、HO-1mRNA表达高于4周,差异有统计学意义(t=4.292、4.974,P〈0.05)。结论tBHQ干预可以有效诱导2型DM大鼠视网膜组织中Nrf2、HO-1的表达。
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关键词
糖尿病视网膜病变/病理生理学
NF-E2相关因子2
血红素氧化酶(脱环)
动物实验
原文传递
题名
雌二醇通过增加端粒酶活性影响人LECs生长动力学的实验研究
被引量:
3
1
作者
王杰
康刚劲
袁雪峰
徐曼华
蒋燕
罗波
机构
四川医科大学附属第一医院眼科
资阳市
第一
人民
医院
耳鼻喉科
四川
医科
大学
生物化学教研室
出处
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第3期219-225,共7页
基金
泸州市科技计划项目[2015LZCYD-S05(4/12)]
文摘
背景人LECs表达端粒酶活性,其活性改变与白内障的形成相关。研究证实,雌激素能增加人子宫内膜癌及乳腺癌细胞的端粒酶活性,从而发挥促进增生、抗凋亡作用,但能否增加人LECs中的端粒酶活性从而影响其生物学功能,国内外鲜见报道。目的探讨B型雌二醇(β-E2)是否能增加人LECs端粒酶活性及其对人LECs增生和凋亡的影响。方法体外培养并传代人LECs细胞系,先用1×10-6mol/Lβ-E2分别作用人LECs0、6、12、24和48h,采用RT—PCR法确定增加人LECs中端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA表达的最佳时间。将培养的人LECs细胞分为5个组,空白对照组细胞进行常规培养,溶剂对照组在培养液中添加体积分数0.1%乙醇,不同浓度p—E2组分别在培养液中添加1×10-8、1×10-7和1×10-6mol/Lβ-E2,继续培养细胞24h,采用RT—PCR法检测各组人LECs中hHERTmRNA的相对表达量;采用端粒重复序列扩增(TRAP)-ELISA法检测端粒酶活性;采用细胞计数试剂盒-8(CCK_8)法检测各组细胞的增生值;采用Hoechst33258荧光染色法分析人LECs的凋亡情况。结果1×10-6mol/Lβ-E2浓度下能够增加人LECs中hTERTmRNA相对表达量的最佳作用时间为24h。1×10-8、1×10-7和1×10-6mol/Lβ-E2组人LECs中hTERTmRNA的相对表达量分别为0.477±O.015、0.7120.013和0.914和0.031,明显高于空白对照组的0.428±O.010及溶剂对照组的0.426±0.010,差异均有统计学意义(均P〈0.05)。1×10-8、1×10-7和1×10^-6mol/Lβ-E2组端粒酶活性值分别为0.711±O.015、0.941±0.010和1.249±0.047,明显高于空白对照组的0.535±0.013和溶剂对照组的0.543±O.013,差异均有统计学意义(均P=0.000)。1×10-7mol/Lβ-E2组细胞的增生值(A值)明显高于1×10-7mol/Lp—E2组和1×10^-6mol/Lβ-E2组,差异均有统计学意义(均P=0.000),而1×10-7mol/Lβ-E2组和1x10-6moULβ-E2组与空白对照组间细胞中的细胞增生值间差异均无统计学意义(P=0.718、0.856)。1×10-8、l×10-7和1×10^-6mol/Lβ-E2组的细胞凋亡率均低于空白对照组和溶剂对照组(均P=0.000);空白对照组与溶剂对照组间比较差异无统计学意义(P=0.777)。人LECs增生值与hTERTmRNA相对表达量及端粒酶活性值间无明显直线相关关系(r=-0.299,P=0.278;r=-0.157,P=0.576)。人LECs凋亡率与hTERTmRNA相对表达量及端粒酶活性值间均呈明显负相关(r=-0.975,P=0.000;r=-0.981,P=0.000)。结论β-E2能上调人LECs中的端粒酶活性,稍高浓度的β-E2可能通过增加人LECs的端粒酶活性而抑制细胞凋亡,但无促增生作用。
关键词
晶状体上皮细胞
雌二醇
端粒酶
年龄相关性
白内障
凋亡
增生
细胞培养
细胞系
Keywords
Epithelial ceils, lens
Estradiol
Telomerase
Cataract, age-related
Apoptosis
Proliferation
Cell, cultured
Cell line
分类号
R96 [医药卫生—药理学]
下载PDF
职称材料
题名
βB_2晶状体蛋白与白内障
被引量:
3
2
作者
蒋燕
康刚劲
徐曼华
李开明
机构
四川医科大学附属第一医院眼科
出处
《国际眼科杂志》
CAS
2016年第2期261-264,共4页
文摘
βB_2晶状体蛋白是β族晶状体蛋白中含量最多的一种,在维持晶状体的透明性和屈光性中起着重要作用。βB_2晶状体蛋白异常可能与多种类型白内障的形成有关。近年来,CRYBB_2基因突变所致白内障的机制成为研究的热点。本文将对βB_2晶状体蛋白的结构、功能、相关突变、与各类型白内障关系做一综述。
关键词
βB2晶状体蛋白
白内障
功能
结构
Keywords
beta B2-crystallin
cataract
function
structure
分类号
R776.1 [医药卫生—眼科]
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职称材料
题名
叔丁基对苯二酚对2型糖尿病大鼠视网膜核因子E2相关因子、血红素氧合酶1表达的影响
被引量:
6
3
作者
李晶艳
田敏
张思远
韩佩晏
黄棋
吕红彬
机构
四川医科大学附属第一医院眼科
出处
《中华眼底病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第6期581-585,共5页
基金
四川省科学技术厅项目(14JC01723-LH36)
文摘
目的观察叔丁基对苯二酚(tBHQ)对2型糖尿病(DM)大鼠视网膜组织中核因子E2相关因子(Nrf2)、血红素氧合酶1(HO-1)表达的影响。方法健康雄性Sprague Dawley大鼠60只,随机抽取20只大鼠为正常对照组(NC组),其余40只大鼠为造模组。造模组大鼠腹腔注射30mg/kg剂量链脲佐菌素诱导2型DM模型。剔除血糖恢复鼠5只,造模组随机分成DM组、tBHQ组,分别为17、18只大鼠。tBHQ组大鼠给予添加1%tBHQ的高脂高糖饲料喂养。tBHQ喂养后4、12周,苏木精-伊红染色观察大鼠视网膜组织结构;免疫组织化学染色法检测大鼠视网膜组织中Nrf2、HO-1蛋白表达;荧光定量聚合酶链反应(PCR)测定大鼠视网膜组织中Nrf2、HO—1mRNA表达。结果光学显微镜观察,4周时,tBHQ组大鼠视网膜细胞排列较整齐,个别细胞可见轻度水肿;12周时,视网膜组织结构较清晰,部分细胞水肿。免疫组织化学染色结果显示,4、12周时,DM组大鼠视网膜组织中Nrf2(t=3.115、3.781)、HO-1(t=3.485、3.785)蛋白表达较NC组增多,差异均有统计学意义(P〈0.01)。tBHQ组大鼠视网膜组织中Nrf2(t=2.473、2.576)、HO-1(t=2.785、2.879)蛋白表达较DM组增多,差异有统计学意义(P〈0.05)。DM组组内比较,12周大鼠视网膜中Nrf2蛋白表达较4周时增高,差异有统计学意义(t=0.276,P〈0.05);tBHQ组组内比较,12周大鼠视网膜中Nrf2(t=2.516)、HO1(t=2.776)蛋白表达较4周时增高,差异有统计学意义(P〈0.05)。荧光定量PCR检测结果显示,4、12周时,DM组大鼠视网膜组织中Nrf2(t=4.758、4.285)、H0—1mRNA(t=5.114、4.514)表达较NC组增多,差异有统计学意义(P〈0.05);tBHQ组大鼠视网膜组织中Nrf2(t=5.133、4.976)、HO1mRNA(t=4。758、4.251)表达较DM组增多,差异有统计学意义(P〈0.05)。DM组组内比较,12周时视网膜组织中Nrf2mRNA表达高于4周,差异有统计学意义(t=5.114,P〈0.05);tBHQ组组内比较,12周时视网膜组织中Nrf2、HO-1mRNA表达高于4周,差异有统计学意义(t=4.292、4.974,P〈0.05)。结论tBHQ干预可以有效诱导2型DM大鼠视网膜组织中Nrf2、HO-1的表达。
关键词
糖尿病视网膜病变/病理生理学
NF-E2相关因子2
血红素氧化酶(脱环)
动物实验
Keywords
Diabetic retinopathy/physiopathology
NF-E2-related factor 2
Heme oxygenase (decyclizing)
Animal experimentation
分类号
R587.2 [医药卫生—内分泌]
R774.1 [医药卫生—眼科]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
雌二醇通过增加端粒酶活性影响人LECs生长动力学的实验研究
王杰
康刚劲
袁雪峰
徐曼华
蒋燕
罗波
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016
3
下载PDF
职称材料
2
βB_2晶状体蛋白与白内障
蒋燕
康刚劲
徐曼华
李开明
《国际眼科杂志》
CAS
2016
3
下载PDF
职称材料
3
叔丁基对苯二酚对2型糖尿病大鼠视网膜核因子E2相关因子、血红素氧合酶1表达的影响
李晶艳
田敏
张思远
韩佩晏
黄棋
吕红彬
《中华眼底病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015
6
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