成年大鼠心肌细胞的分离和培养

目的:建立获得较高比例的活性成年大鼠心肌细胞的分离和培养方法。方法:Langendorff灌流,胶原酶消化分离钙耐受成年大鼠心肌细胞,加血清培养。光镜观察,结合形态学和台盼蓝染色评价心肌细胞。结果:分离的活性心肌细胞比率约70%～80%,杆状、横纹清晰。加血清贴壁培养的细胞逐渐发生形态学改变。结论:通过本方法可以对成年大鼠心肌细胞进行良好的分离培养。

如何建立成年大鼠心肌细胞钙超载模型

目的：探讨建立成年大鼠心肌细胞钙超载模型的方法。方法：Langendorff灌流，分离钙耐受成年大鼠心肌细胞，采用不同浓度钙离子导入剂-伊屋诺霉素（ionomycin）作用心肌细胞1小时，用荧光分光光度计测定心肌细胞内的游离钙浓度。结果：1．分离的活性心肌细胞比率约70～80％，杆状、横纹清晰。2．实验组1（ionomycin0．5μmol／L）心肌细胞[Ca^2＋]1明显高于对照组（282．07±25．19 vs 115±21．21nmol／L，P〈0．05）；实验组2（ionomycin 1．0μmol／L）心肌细胞[Ca^2＋]1（376．35±29．44）显著高于正常对照组（P〈0．05）。结论：通过本方法可以建立成年大鼠心肌细胞钙超载模型。

缓激肽在依那普利干预心肌梗塞大鼠心肌胶原代谢中的作用

目的 探讨缓激肽 (BK)对大鼠心肌梗塞 (MI)后心肌胶原生化改建的影响 ,以及血管紧张素转换酶抑制剂 (ACEI)对心肌胶原的影响是否与抑制BK的降解有关。方法 复制大鼠MI模型后 ,第 3天开始给予依那普利(5 0 0 μg·kg-1·d-1) 4周 ,测定左心室非梗塞区组织的胶原含量及Ⅰ、Ⅲ型胶原的比值 (Ⅰ /Ⅲ ) ,并与依那普利 +BKB2 受体阻断剂HOE 14 0 (5 0 0 μg·kg-1·d-1由微渗透泵给入 )组、血管紧张素ⅡⅠ型受体 (AT1)阻断剂Losartan(3mg·kg-1·d-1)组及对照组相比较。结果 依那普利、Losartan组的胶原含量及其Ⅰ /Ⅲ比值均较对照组降低(P <0 0 5 ) ,而Losartan组的胶原含量及其Ⅰ /Ⅲ比值又低于依那普利组 (P <0 0 5 ) ,依那普利 +HOE 14 0组的胶原含量及Ⅰ /Ⅲ比值较单独用依那普利组明显升高 (P <0 0 5 )。结论 BK能抑制大鼠MI后左心室胶原的生成及降低胶原Ⅰ /Ⅲ比值 ;ACEI阻抑左心室胶原生化改建的作用机制是既抑制了血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )的生成又促使了心肌局部BK的积累。