血清CXC趋化因子配体14和肿瘤坏死因子超家族成员13水平对卵巢子宫内膜异位症患者术后复发的预测价值

目的探讨血清CXC趋化因子配体14(CXCL14)和肿瘤坏死因子超家族成员13(TNFSF13)水平对卵巢子宫内膜异位症(OEM)患者术后复发的预测价值。方法选取2016年2月至2018年4月于四川大学华西三亚医院诊治的OEM患者90例为OEM组。根据美国生殖医学会修正的子宫内膜异位症分期(r-AFS分期)标准,将OEM患者分为Ⅰ~Ⅱ期(45例),Ⅲ~Ⅳ期(45例)。根据疼痛视觉模拟量表评分,将OEM患者的痛经程度分为轻度(1~3分,42例)、中度(4~7分,28例)和重度(8~10分,20例)。另选取同期本院体检健康的44名育龄期妇女作为对照组。记录OEM患者术后复发情况,检测受试者血清CXCL14、TNFSF13水平。分析OEM术后复发的影响因素以及血清CXCL14、TNFSF13对OEM术后复发的预测价值。结果OEM组血清CXCL14水平低于对照组、TNFSF13水平高于对照组(均P<0.001)。r-AFS分期Ⅲ~Ⅳ期患者血清CXCL14水平低于Ⅰ~Ⅱ期患者、TNFSF13水平高于Ⅰ~Ⅱ期患者;中重度痛经患者血清CXCL14水平低于轻度痛经患者、TNFSF13水平高于轻度痛经患者(均P<0.001)。随访期间共34例患者复发,单因素分析结果显示r-AFS分期、痛经程度、术后用药、血清CXCL14和TNFSF13水平与OEM术后复发有关(均P<0.05)。多因素Cox回归分析结果显示,r-AFS分期、痛经程度、CXCL14、TNFSF13水平是OEM术后复发的独立危险因素,术后用药是独立保护因素(均P<0.05)。受试者工作特征曲线分析结果显示,血清CXCL14、TNFSF13预测OEM术后复发的曲线下面积分别为0.741(95%置信区间:0.687~0.795)、0.728(95%置信区间:0.670~0.788),二者联合检测的曲线下面积为0.872(95%置信区间:0.828~0.947),联合检测的曲线下面积大于CXCL14、TNFSF13单独检测(均P<0.001)。结论OEM患者血清CXCL14水平降低,TNFSF13水平升高,二者是影响OEM术后复发的独立危险因素。血清CXCL14、TNFSF13联合检测对OEM术后复发具有较高的预测价值。

宫颈癌组织中NEK2和circPITX1的表达水平与放疗敏感度及预后的相关性研究

目的探讨宫颈癌组织中中心体相关激酶2(never in mitosis geneA related kinase-2,NEK2)和环状RNA配对同源结构域基因1(circRNA paired homology domain gene 1,circPITX1)表达与放疗敏感度及预后的关系。方法选取2017年1月~2018年1月四川大学华西三亚医院接受放疗治疗的82例宫颈癌患者为研究对象。依据放疗后病灶退缩情况评价放疗疗效,分为放疗抵抗组(n=51)和放疗敏感组(n=31)。应用免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHCS)检测宫颈癌癌组织和癌旁组织中NEK2蛋白表达。采用荧光实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测circPITX1mRNA和NEK2mRNA表达。统计学分析癌组织中circPITX1mRNA和NEK2 mRNA与放疗敏感度、临床病理特征的关系。采用KaplanMeier生存曲线分析宫颈癌患者circPITX1mRNA和NEK2 mRNA表达水平与患者生存预后的关系。COX回归分析宫颈癌患者预后不良的危险因素。结果宫颈癌癌组织中NEK2蛋白表达阳性率[85.37%(70/82)]高于癌旁组织[12.20%(10/82)],差异有统计学意义(χ^(2)=87.857,P<0.05)。癌组织中circPITX1mRNA(1.92±0.24),NEK2 mRNA表达(2.04±0.31)高于癌旁组织(0.81±0.20,0.93±0.27)表达,差异均有统计学意义(t=32.174,24.450,均P<0.05)。宫颈癌组织中NEK2 mRNA与circPITX1mRNA表达呈显著正相关(r=0.618,P<0.05)。FIGO分期ⅢA~ⅢB期宫颈癌患者NEK2 mRNA(2.54±0.23),circPITX1mRNA(2.33±0.19)表达明显高于IIB期患者(1.17±0.40,1.21±0.30)表达,差异均有统计学意义(t=19.730,20.710,均P<0.05)。宫颈癌放疗抵抗组NEK2 mRNA(2.39±0.38),circPITX1mRNA(2.50±0.21)均显著高于放疗敏感组(1.83±0.28,0.97±0.28),差异有统计学意义(t=7.109,28.149,均P<0.05)。NEK2 mRNA[(48.78%(20/41)]和circPITX1mRNA[54.76%(23/42)]高表达组的三年总生存率显著低于NEK2 mRNA[90.24%(37/41)],circPITX1 mRNA低表达组[85.00%(34/40)],差异均有统计学意义(χ^(2)=5.118,4.890,均P<0.05);NEK2 mRNA[(26.10±3.62)个月]和circPITX1mRNA[(25.87±3.81)个月]高表达组的平均生存时间显著短于NEK2 mRNA[(33.25±4.09)个月]和circPITX1mRNA低表达组[(32.02±4.02)个月],差异均有统计学意义(t=8.382,7.140,均P<0.05)。FIGO分期ⅢA~ⅢB(HR=3.754,95%CI:1.621~8.694),NEK2 mRNA高表达(HR=2.874,95%CI:2.504~3.497),circPITX1mRNA高表达(HR=2.679,95%CI:2.485~3.184)是宫颈癌患者预后不良的独立危险因素(均P均<0.05)。结论NEK2和circPITX1在宫颈癌组织中表达升高,可成为放疗敏感度及预后预测的标志物。

miR-25-3p和ZEB2在宫颈癌中表达的临床意义及对宫颈癌细胞增殖和侵袭的作用探讨

背景微小RNA-25-3p(microRNA-25-3p,miR-25-3p)是与肿瘤密切相关的miRNA,锌指E盒结合的同源盒蛋白2(zinc finger E-box binding homeobox 2,ZEB2)是miR-25-3p的靶基因,而miR-25-3p能否通过靶向ZEB2在宫颈癌进展中发挥作用尚不清楚。目的探讨miR-25-3p、ZEB2在宫颈癌组织中表达的临床意义及对宫颈癌细胞增殖和侵袭的作用。方法选取四川大学华西三亚医院2013年1月-2014年12月治疗的宫颈癌患者84例,获取病理组织,另收集因良性疾病切除的正常宫颈组织40例作为对照,检测宫颈癌组织和正常宫颈组织中miR-25-3p、ZEB2 mRNA及蛋白的表达情况;分析miR-25-3p、ZEB2 mRNA及蛋白的表达与宫颈癌患者临床病理参数及预后的关系。Pearson线性相关分析miR-25-3p与ZEB2 mRNA及蛋白在宫颈癌组织中表达的相关性。常规培养宫颈癌细胞HeLa,分为NC组、miR-25-3p mimic组和miR-25-3p+oe-ZEB2组,MTS实验检测各组细胞的增殖能力,Boyden实验检测各组细胞的侵袭能力。结果miR-25-3p在宫颈癌组织中的表达显著低于其在正常宫颈组织中的表达(P<0.05),ZEB2 mRNA及蛋白在宫颈癌组织中的表达显著高于其在正常宫颈组织中的表达(P<0.05)。miR-25-3p在宫颈癌组织中的表达水平与淋巴结转移、肌层浸润深度和FIGO分期相关(P<0.05)。ZEB2 mRNA及蛋白在宫颈癌组织中的表达水平与组织学分级、淋巴结转移和FIGO分期相关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线显示,miR-25-3p低表达组宫颈癌患者5年总生存率低于miR-25-3p高表达组患者(P<0.05),ZEB2 mRNA及蛋白高表达的宫颈癌患者5年总生存率低于ZEB2低表达组患者(P<0.05)。宫颈癌组织中miR-25-3p与ZEB2 mRNA及蛋白的表达呈负相关(P<0.05)。Target Scan7.1软件预测及双荧光素酶报道基因实验结果显示ZEB2为miR-25-3p的靶基因。与NC组相比,miR-25-3p mimic组和miR-25-3p+oe-ZEB2组细胞增殖和侵袭能力降低(P<0.05);与miR-25-3p mimic组相比,miR-25-3p+oe-ZEB2组细胞增殖和侵袭能力增加(P<0.05)。结论miR-25-3p、ZEB2与宫颈癌患者的不良病理参数和预后相关,miR-25-3p靶向负调控ZEB2抑制宫颈癌的增殖和侵袭。miR-25-3p和ZEB2有可能成为宫颈癌预后新的标志物和治疗靶标。

lncRNA SOX21-AS1的表达对卵巢癌细胞增殖和转移能力的影响及机制研究

目的 探讨长链非编码RNA SRY-box转录因子21反义RNA 1(lncRNA SOX21-AS1)对卵巢癌细胞增殖和转移能力的影响及其作用机制。方法 选取卵巢癌组织和其邻近的癌旁组织各75例,另选取卵巢癌细胞株SKOV3、A2780、OVCR3和人卵巢正常上皮细胞HOSE作为实验对象,实时荧光定量PCR法检测lncRNA SOX21-AS1在组织和细胞中的表达。根据是否干扰lncRNA SOX21-AS1表达将细胞分为si-NC组和si-SOX21-AS1组。MTS实验和平板克隆实验检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞转移能力,TOP/FOP荧光素酶实验和Western blot实验检测细胞中Wnt/β-catenin信号通路活性和相关蛋白表达水平。结果 与癌旁组织相比,lncRNA SOX21-AS1在卵巢癌组织中的表达上调(P<0.05)。与卵巢正常上皮细胞HOSE相比,lncRNA SOX21-AS1在卵巢癌细胞中的表达上调,SKOV3中最高(P<0.05)。与FIGO分期Ⅰ-Ⅱ期、无淋巴结转移的患者相比,FIGO分期Ⅲ-Ⅳ期、有淋巴结转移患者lncRNA SOX21-AS1相对表达水平升高(P<0.05)。干扰lncRNA SOX21-AS1表达可抑制卵巢癌细胞增殖和转移能力、抑制Wnt/β-catenin信号通路活性并降低Wnt/β-catenin信号通路各蛋白的表达水平(P<0.05)。结论 lncRNA SOX21-AS1在卵巢癌组织和细胞中高表达,干扰lncRNA SOX21-AS1的表达可抑制卵巢癌细胞增殖和转移能力。