重组人表皮生长因子加速皮肤创伤修复的实验研究

目的:观察局部应用重组人表皮生长因子(recombined human epidermal growth factor,rhEGF)对大鼠皮肤深Ⅱ度烫伤以及家兔皮肤切割伤愈合有无促进作用。方法:建立约10的大鼠烫伤面积和长约10cm家兔切割伤后,测定给不同剂量的rhEGF治疗后不同时间的烫伤创面愈合面积,创伤组织的病理组织学以及测定愈合时间来观察rhEGF对皮肤创伤的治疗作用。结果:rhEGF小、中、大剂量(每cm_2创面200IU,400IU,800IU)可以缩短大鼠皮肤深Ⅱ度烫伤和家兔皮肤切割伤愈合的时间,同一时间内大鼠烫伤愈合面积高于对照组,同时还可以增加表皮细胞和毛细血管的增生,三个剂量之间未见明显的剂量依赖性。

重组人表皮生长因子加速皮肤创伤修复的实验研究

目的:观察局部应用重组人表皮生长因子(recombinedhumanepidermalgrowthfactor,rhEGF)对大鼠皮肤深Ⅱ度烫伤以及家兔皮肤切割伤愈合有无促进作用。方法:建立约10%的大鼠烫伤面积和长约10cm家兔切割伤后,测定给不同剂量的rhEGF治疗后不同时间的烫伤创面愈合面积,创伤组织的病理组织学以及测定愈合时间来观察rhEGF对皮肤创伤的治疗作用。结果:rhEGF小、中、大剂量(每cm2创面200IU,400IU,800IU)可以缩短大鼠皮肤深Ⅱ度烫伤和家兔皮肤切割伤愈合的时间,同一时间内大鼠烫伤愈合面积高于对照组,同时还可以增加表皮细胞和毛细血管的增生,三个剂量之间未见明显的剂量依赖性。结论:局部应用rhEGF可以促进实验性皮肤创伤愈合。

结核分支杆菌Rv0901基因置换型打靶载体的构建

目的 :对结核杆菌H3 7Rv的Rv0 90 1基因进行体外扩增 ,构建基因打靶载体 ,利用基因打靶技术进行结核分支杆菌基因Rv0 90 1功能的研究。方法 :结核分支杆菌标准毒力株H3 7Rv体外培养 ,扩增目的基因 ,连接载体及目的片段 ,切除目的基因 ,筛选阳性克隆 ,酶切鉴定。结果 :经酶切鉴定PCR产物及插入片段大小与预期值相符 ,鉴定证实PCR产物及插入片段为所需目的基因片段 ,成功切除靶片段。证实标记基因插入片段插入方向正确。结论 :成功构建了用于结核分支杆菌基因打靶的置换型载体 ,为随后将进行的Rv0 90 1基因敲除株的建立 ,Rv0 90 1基因功能的研究奠定了基础。

HNP对肺炎克雷伯杆菌粘附呼吸道上皮细胞的影响

目的:探讨呼吸道抗感染防御机制,观察人中性粒细胞α-防御素(HNP)对肺炎克雷伯杆菌粘附呼吸道上皮细胞的影响。方法:从人中性粒细胞分离纯化HNP。A549细胞与HNP(20μg.ml-1)及两株肺炎克雷伯杆菌临床分离株共同孵育4小时,用平板培养菌落计数法测定与细胞粘附的活菌数。结果:在HNP存在的情况下,Kp03183株细菌对肺上皮细胞的粘附提高了12倍(P<0.01),Kp03116株细菌对上皮细胞的粘附提高了5倍(p<0.01)结论:HNP显著增强肺炎克雷伯杆菌粘附于呼吸道上皮细胞,可能有利于呼吸道清除细菌。

肺炎克雷伯杆菌在T24细胞内存活的动态观察

目的:了解肺炎克雷伯杆菌与膀胱上皮细胞的相互关系,观察肺炎克雷伯杆菌在人膀胱上皮细胞株T24中生存的动态变化。方法:采用肺炎克雷伯杆菌临床分离株03138侵袭T24细胞,并用庆大霉素杀死细胞外的细菌,分别于细菌进入细胞后的4、24、48及72h裂解细胞,释放出细胞内的活细菌,用平板菌落计数法计数胞内活菌数。结果:T24细胞内的肺炎克雷伯杆菌03138株在实验48h内有一定生长,试验72h细胞内活菌数量明显减少。加入细胞因子(TNF-α和INF-γ)可以促进上皮细胞清除胞内细菌。结论:膀胱上皮细胞清除进入细胞内的肺炎克雷伯杆菌,可能是泌尿道天然免疫的一种防御机制,而细胞因子可以调控上皮细胞的抗菌作用。

口腔局部使用干扰素对小鼠唾液SIgA的调节

目的 :了解干扰素对口腔粘膜分泌SIgA的调节作用。方法 :以生物素 -ELISA法检测口腔使用干扰素前后小鼠唾液SIgA的水平。结果 :大、小剂量干扰素组在用药后 10天、2 0天和 3 0天都能增高唾液SIgA ,并同对照组相比有显著差异 (P <0 0 5 ) ;大剂量组SIgA的增高更多 ,特别是在 2 0天时明显高于小剂量组 (P <0 0 5 ) ;干扰素的调节作用持续至少 3 0天 ,小剂量在维持作用方面不亚于大剂量。结论 :干扰素直接作用于口腔粘膜 ,可提高局部的SIgA的分泌水平。

卡介苗阿拉伯糖苷转移酶embC基因敲除株的构建和初步鉴定

目的采用基因敲除技术构建了卡介苗embC基因缺失株。方法从卡介苗基因组中扩增出embC基因,定向插入自杀质粒p2NIL中,切除embC基因中约1000 bp片段使其失活,再定向插入标记片段,筛选鉴定阳性克隆,电穿孔转入卡介苗,筛选重组菌株。结果PCR和酶切鉴定证明构建成功用于基因打靶的置换型自杀质粒,并筛选成功获得重组卡介苗。结论获得了卡介苗embC基因敲除株,为进一步研究对卡介苗免疫活性的影响奠定了基础。