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树突状细胞负载人工合成甲胎蛋白表位肽后诱导的细胞毒作用
被引量:
2
1
作者
张兵
董薇
+1 位作者
朱月明
蔡美英
《航天医学与医学工程》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期102-105,共4页
目的观察HLA-A2树突状细胞(dendritic cells,DCs)负载人甲胎蛋白(humanα-fetoprotein,hAFP)HLA-A2限制性九肽(FMNKFIYEI,AFP158-166)后,激活特异的细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic Tlymphocytes,CTLs),杀伤肝癌细胞株的能力。方法用贴壁...
目的观察HLA-A2树突状细胞(dendritic cells,DCs)负载人甲胎蛋白(humanα-fetoprotein,hAFP)HLA-A2限制性九肽(FMNKFIYEI,AFP158-166)后,激活特异的细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic Tlymphocytes,CTLs),杀伤肝癌细胞株的能力。方法用贴壁法分离HLA-A2成人外周血单核细胞,分次加入IL-4与GM-CSF共同诱导培养6d,给予单核细胞调控培养液(monocyte conditioned medium,MCM)诱导成熟2d,然后负载AFP158-166,激活特异性CTLs,用MTT法检测CTL杀伤肝细胞癌(hepa-tocellular carcinoma,HCC)细胞株HepG2和T2细胞株的能力。结果采用贴壁法、多次加入细胞因子和MCM为成熟诱导剂的培养方法可以获得足量的成熟DCs,并且在去除细胞因子后,仍能保持成熟的DCs形态;负载AFP158-166的DCs激活的CTLs对HepG2和负载AFP158-166的T2具有较强的杀伤作用。结论负载HLA-A2限制性表位肽AFP158-166的DCs对表达AFP的HLA-A2HCC有潜在的治疗作用,具有一定的临床运用前景。
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关键词
树突状细胞
甲胎蛋白
肝细胞癌
限制性表位肽
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职称材料
抗FLT3受体单克隆抗体的制备与鉴定
2
作者
童师雯
宣景秀
+1 位作者
章崇杰
魏大鹏
《西部医学》
2009年第1期3-5,8,共4页
目的制备抗FLT3受体的单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定。方法以PET146-FLT3-His-tag表达蛋白作为免疫原免疫BALB/C小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经多次筛选及克隆化,建立可以稳定分泌抗FLT3受体的单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用EL...
目的制备抗FLT3受体的单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定。方法以PET146-FLT3-His-tag表达蛋白作为免疫原免疫BALB/C小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经多次筛选及克隆化,建立可以稳定分泌抗FLT3受体的单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用ELISA、Western blot、免疫组化对此抗体特性进行鉴定。结果筛选到两株能稳定分泌抗FLT3受体单克隆抗体的细胞株5F3B11B1和D3H2C12,亚类鉴定两种单抗为IgG1,ELISA法测定两株细胞腹水抗体效价分别为1∶409600和1∶102400,抗体相对亲和力为7.85×106L/mol。Western blot显示抗体能特异识别免疫原。细胞免疫组化显示此单抗可以特异的识别急性髓系白血病病人骨髓中原始细胞表达的FLT3受体。结论成功制备抗FLT3受体单克隆抗体,为进一步研究其与白血病等血液疾病的关系奠定了基础。
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关键词
FLT3受体
单克隆抗体
白血病
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职称材料
防御素HNP-3成熟肽酵母双杂交诱饵质粒的构建及自激活和毒性检测
被引量:
1
3
作者
马生秀
邓璐霞
+8 位作者
罗林
彭媛媛
路会侠
张敏
熊文碧
冯云
吴琦
王伯瑶
黄宁
《航天医学与医学工程》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期151-153,共3页
目的用含防御素HNP-3成熟肽cDNA片段构建酵母双杂交诱饵质粒,进行自激活和毒性检测。方法培养HL-60细胞,提取RNA,RT-PCR扩增含防御素HNP-3成熟肽的cDNA片段,克隆入pBlue-script-SK-II质粒,经测序鉴定后,再亚克隆到人酵母双杂交诱饵载体p...
目的用含防御素HNP-3成熟肽cDNA片段构建酵母双杂交诱饵质粒,进行自激活和毒性检测。方法培养HL-60细胞,提取RNA,RT-PCR扩增含防御素HNP-3成熟肽的cDNA片段,克隆入pBlue-script-SK-II质粒,经测序鉴定后,再亚克隆到人酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中,PCR及测序鉴定。重组诱饵质粒用缺陷培养基筛选方法进行自激活和毒性检测。结果构建的重组质粒pBluescript-SK-II-HNP-3,经测序鉴定,插入片段为HNP-3成熟肽的cDNA序列。亚克隆构建的重组诱饵质pGBKT7-HNP-3,测序鉴定表明其插入目的基因序列无误。重组诱饵质粒自激活和毒性检测显示无自激活现象发生,对酵母细胞AH109无毒性作用。结论成功构建了防御素HNP-3成熟肽的酵母双杂交诱饵载体;为用酵母双杂交技术研究与防御素HNP-3成熟肽相互作用蛋白质打下了基础。
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关键词
防御素
HNP-3
成熟肽
酵母双杂交
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职称材料
题名
树突状细胞负载人工合成甲胎蛋白表位肽后诱导的细胞毒作用
被引量:
2
1
作者
张兵
董薇
朱月明
蔡美英
机构
四川大学
华西
医学
中心
基础医学
与法
医学院
免疫
学
教研室
出处
《航天医学与医学工程》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期102-105,共4页
基金
国家自然科学基金项目(30070855)
文摘
目的观察HLA-A2树突状细胞(dendritic cells,DCs)负载人甲胎蛋白(humanα-fetoprotein,hAFP)HLA-A2限制性九肽(FMNKFIYEI,AFP158-166)后,激活特异的细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic Tlymphocytes,CTLs),杀伤肝癌细胞株的能力。方法用贴壁法分离HLA-A2成人外周血单核细胞,分次加入IL-4与GM-CSF共同诱导培养6d,给予单核细胞调控培养液(monocyte conditioned medium,MCM)诱导成熟2d,然后负载AFP158-166,激活特异性CTLs,用MTT法检测CTL杀伤肝细胞癌(hepa-tocellular carcinoma,HCC)细胞株HepG2和T2细胞株的能力。结果采用贴壁法、多次加入细胞因子和MCM为成熟诱导剂的培养方法可以获得足量的成熟DCs,并且在去除细胞因子后,仍能保持成熟的DCs形态;负载AFP158-166的DCs激活的CTLs对HepG2和负载AFP158-166的T2具有较强的杀伤作用。结论负载HLA-A2限制性表位肽AFP158-166的DCs对表达AFP的HLA-A2HCC有潜在的治疗作用,具有一定的临床运用前景。
关键词
树突状细胞
甲胎蛋白
肝细胞癌
限制性表位肽
Keywords
dendritic cells
α-fetoprotein
hepatocellular carcinoma
restricted epitopes
分类号
R392.32 [医药卫生—免疫学]
Q789 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
抗FLT3受体单克隆抗体的制备与鉴定
2
作者
童师雯
宣景秀
章崇杰
魏大鹏
机构
四川大学华西医学中心基础医学与法医学院免疫教研室
出处
《西部医学》
2009年第1期3-5,8,共4页
文摘
目的制备抗FLT3受体的单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定。方法以PET146-FLT3-His-tag表达蛋白作为免疫原免疫BALB/C小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经多次筛选及克隆化,建立可以稳定分泌抗FLT3受体的单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用ELISA、Western blot、免疫组化对此抗体特性进行鉴定。结果筛选到两株能稳定分泌抗FLT3受体单克隆抗体的细胞株5F3B11B1和D3H2C12,亚类鉴定两种单抗为IgG1,ELISA法测定两株细胞腹水抗体效价分别为1∶409600和1∶102400,抗体相对亲和力为7.85×106L/mol。Western blot显示抗体能特异识别免疫原。细胞免疫组化显示此单抗可以特异的识别急性髓系白血病病人骨髓中原始细胞表达的FLT3受体。结论成功制备抗FLT3受体单克隆抗体,为进一步研究其与白血病等血液疾病的关系奠定了基础。
关键词
FLT3受体
单克隆抗体
白血病
Keywords
FLT3 receptor Monoclonal antibody Preparation and identification
分类号
R733.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
防御素HNP-3成熟肽酵母双杂交诱饵质粒的构建及自激活和毒性检测
被引量:
1
3
作者
马生秀
邓璐霞
罗林
彭媛媛
路会侠
张敏
熊文碧
冯云
吴琦
王伯瑶
黄宁
机构
四川大学华西医学中心基础医学与法医学院免疫教研室
四川大学
华西
医院麻醉科
出处
《航天医学与医学工程》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期151-153,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目(3040763
30671963)
文摘
目的用含防御素HNP-3成熟肽cDNA片段构建酵母双杂交诱饵质粒,进行自激活和毒性检测。方法培养HL-60细胞,提取RNA,RT-PCR扩增含防御素HNP-3成熟肽的cDNA片段,克隆入pBlue-script-SK-II质粒,经测序鉴定后,再亚克隆到人酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中,PCR及测序鉴定。重组诱饵质粒用缺陷培养基筛选方法进行自激活和毒性检测。结果构建的重组质粒pBluescript-SK-II-HNP-3,经测序鉴定,插入片段为HNP-3成熟肽的cDNA序列。亚克隆构建的重组诱饵质pGBKT7-HNP-3,测序鉴定表明其插入目的基因序列无误。重组诱饵质粒自激活和毒性检测显示无自激活现象发生,对酵母细胞AH109无毒性作用。结论成功构建了防御素HNP-3成熟肽的酵母双杂交诱饵载体;为用酵母双杂交技术研究与防御素HNP-3成熟肽相互作用蛋白质打下了基础。
关键词
防御素
HNP-3
成熟肽
酵母双杂交
Keywords
human heutrophil defensins
HNP-3
mature peptides
yeast two-hybrid
分类号
R392.32 [医药卫生—免疫学]
O789 [理学—晶体学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
树突状细胞负载人工合成甲胎蛋白表位肽后诱导的细胞毒作用
张兵
董薇
朱月明
蔡美英
《航天医学与医学工程》
CAS
CSCD
北大核心
2007
2
下载PDF
职称材料
2
抗FLT3受体单克隆抗体的制备与鉴定
童师雯
宣景秀
章崇杰
魏大鹏
《西部医学》
2009
0
下载PDF
职称材料
3
防御素HNP-3成熟肽酵母双杂交诱饵质粒的构建及自激活和毒性检测
马生秀
邓璐霞
罗林
彭媛媛
路会侠
张敏
熊文碧
冯云
吴琦
王伯瑶
黄宁
《航天医学与医学工程》
CAS
CSCD
北大核心
2007
1
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职称材料
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