牛骨形态发生蛋白的提取及消毒方法的改进研究

目的:降低牛骨形态发生蛋白提取成本,增加提纯率,更加安全可靠地对其进行消毒贮存。方法:取1岁以内小牛长管状骨深低温保存、粉碎,依次以冰浴自来水、去郭子水洗涤,Urist非酶法分离提纯BMP,环氧乙烷熏蒸4℃低温消毒,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定提纯物蛋白质分子量,Wastar大鼠肌袋内植入BMP鉴定其生物活性。结果:用冰浴自来水部分地代替去离子水可节约后者用量且不影响BMP的提纯;在冰浴环境中缓慢搅拌0.6NHCI浸泡的骨粉并适时更换浸泡液可使脱钙更完全;将BMP以双层聚乙烯薄膜包裹后置于冷藏格内,适当延长环氧乙烷熏蒸消毒时间,既可达到确切的消毒效果,又不会影响BMP的生物活性。结论:采用改良理化法使脱钙更完全、可增加BMP提取量,低温环境下长时间熏蒸消毒不影响BMP的生物活性。