Raw264.7细胞蛋白和PD-L1抗体在小鼠黑色素瘤(B16)中的抑瘤效果评价

目的探讨小鼠来源白血病毒诱导的肿瘤细胞(Raw264.7)蛋白和程序性死亡-配体(PD-L1)在C57BL/6小鼠黑色素瘤(B16)中的抑瘤效果。方法采用6~8周龄清洁级C57BL/6小鼠30只(雌雄各半),平均分为3组。各组小鼠分别于皮下接种B16细胞(2×10^(5)个/只),待小鼠肿瘤平均体积达到100 mm^(3)时,给予治疗。group A:腹腔注射Raw264.7细胞蛋白(50μg/只),每周1次,共2次。group B:腹腔注射PD-L1抗体(600μg/只,本课题组生产纯化),每3天1次,共4次。group C:相同时间点给予等体积生理盐水对照。各组小鼠给药后,测量肿瘤大小,末次测量后,各组小鼠无菌取脾脏,应用流式细胞术分析CD3/4/8^(+)T细胞群比例。结果各组荷瘤小鼠给予相应治疗后,组C小鼠肿瘤体积增长迅速,末次测量平均体积达到4004 mm^(3);组B小鼠增长次之,末次平均体积达到1637 mm^(3);组A小鼠体积增长最慢,末次平均体积仅为882 mm^(3)(P<0.01)。对小鼠脾脏免疫细胞分析显示,组B小鼠中CD3^(+)CD8^(+)T cell比例明显上调,平均达到77.65%,而CD3^(+)CD4^(+)T比例明显下调,仅为11.86%(P<0.01);而组A和组C两组小鼠CD3^(+)CD4^(+)T和CD3^(+)CD8^(+)T没有明显区别(P>0.05)。结论制备的RAW264.7细胞灭活蛋白和PD-L1抗体对于B16荷瘤小鼠均有抑瘤作用,且前者效果更为明显。

甲氨蝶呤(MTX)与匹莫齐特(Pimozide)联合使用对人胃癌细胞的抑制效果

目的 探讨甲氨蝶呤和匹莫齐特联合使用对胃癌细胞系MKN45和MKN74的抑制效果。方法 培养人胃癌细胞系MKN45和MKN74,以每孔1.2×10^(4)个细胞的密度接种于96孔板中,每孔体积为100μL。配置相应浓度的MTX,使作用药物浓度分别为0.01μM、0.1μM、1μM、10μM和20μM;配置相应浓度的Pimozide,使作用药物浓度分别为0.1μM、0.5μM、1μM、2μM和4μM。设置空白对照孔:仅含培养基;细胞对照孔:仅含细胞和完全培养基;药物处理孔:含细胞和不同浓度药物(包括单独使用MTX、单独使用Pimozide以及MTX和Pimozide联合使用)。将96孔板置于二氧化碳孵箱中培养72 h后,使用CCK8检测细胞存活率,并使用CompuSyn软件计算药物协同效率。结果 单独使用0~1μM Pimozide对MKN45和MKN74细胞几乎没有抑制效果,2~4μM对MKN45和MKN74细胞有抑制效果(存活率<70%),且随着Pimozide浓度增加,抑制效果增加。单独使用MTX时,对MKN45和MKN74细胞均没有显著抑制作用。Pimozide和MTX联合使用后,当Pimozide浓度为4μM,MTX浓度为0.01~20μM时,MKN45和MKN74细胞活性受到十分显著抑制(细胞存活率<15%)。使用CompuSyn软件分析显示,Pimozide和MTX联合使用对MKN45和MKN74的抑制效果具有协同增效作用。结论 与单一药物相比,甲氨蝶呤和匹莫齐特联合使用可显著抑制胃癌细胞系MKN45和MKN74的活性,且具有协同增强效应。

单克隆抗体技术进展及上市药物分析

自二十世纪八十年代杂交瘤技术建立以来,抗体制备技术取得了长足的发展。抗体是由B淋巴细胞分泌的一种免疫球蛋白,因其能与受体特异性结合而产生许多生物学活性,如经典阻断作用、中和活性、激活补体、通过Fc受体对靶细胞产生杀伤作用和调节机体免疫活性等,在临床治疗中广泛应用。抗体技术的发展经历了鼠源性单克隆抗体、嵌合抗体、人源化抗体和全人源单克隆抗体的漫长历程。从鼠源性抗体到全人源抗体的过渡中,实现了多种生物技术的突破,如抗体库技术、人源化小鼠技术和B细胞克隆技术等。如今,抗体药物在整个药物市场中拥有举足轻重的地位。十年来(2011年1月~2021年11月),已有78种单克隆抗体药物被FDA批准上市使用,广泛分布于肿瘤领域、免疫性疾病领域、抗病原体感染领域、神经系统和代谢性疾病领域。文章就单克隆抗体技术进展和抗体药物上市情况进行综述,为新型抗体的制备和药物靶点的选择提供了思路。

STAT3的非转录功能研究进展

信号转导与转录激活因子3 (STAT3)是重要的转录因子,通过调节下游靶基因表达对细胞活性产生影响。肿瘤及自身免疫病患者的STAT3处于过度激活状态,据此已开发多款抑制STAT3转录活性的抑制剂,以及靶向降解STAT3的蛋白质水解靶向嵌合体(PROTAC)技术。然而,除细胞核之外,STAT3也被发现定位于线粒体、内质网及溶酶体等细胞器,并参与这些细胞器正常功能的调节,因此该综述总结了STAT3的非转录因子功能研究进展。

外泌体源性microRNAs在肺癌转移及早期诊断中的研究进展

肺癌转移是导致肺癌高死亡率的最重要原因。外泌体是由多种活细胞释放到胞外的直径为30~150nm的微囊泡。其中,肿瘤细胞,尤其是肺癌细胞分泌的外泌体通过向临近和远端的受体细胞传递microRNAs(miRNAs),从而调控转移细胞的远端定植及血管新生等过程。此外,肺癌细胞来源的外泌体miRNAs可以表征肿瘤细胞的病理和生理状态,因此,在肺癌的早期诊断、预测和生存预后中具有重要的应用价值。该综述主要对外泌体miRNAs在肺癌转移过程中的调控作用及其作为早期诊断标志物的潜在应用价值进行介绍。