细胞因子和脂多糖对人结肠癌细胞系HT-29 Toll样受体4表达和调控的影响

背景:正常肠上皮作为物理屏障能限制肠道微生物的入侵。肠上皮细胞极低表达Toll样受体(TLR)4和髓样分化蛋白(MD)-2,不与脂多糖(LPS)反应。目的:探讨以细胞因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、干扰素(IFN)-γ和LPS刺激人结肠癌细胞系HT-29后,TLR4和MD-2的表达及其对LPS反应性的变化。方法:将HT-29细胞分为8组,分别加入RPMI1640、TNF-α、IL-1β、IFN-γ、LPS、TNF-α+LPS、IL-1β+LPS、IFN-γ+LPS干预;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测各组细胞上清液内IL-8水平;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组细胞TLR4和MD-2mRNA的表达。结果:TNF-α、IL-1β和IFN-γ能显著上调HT-29细胞TLR4、MD-2mRNA和IL-8的表达(P<0.01);HT-29细胞与TNF-α、IL-1β、IFN-γ预孵育后再以LPS刺激,IL-8的表达进一步上调(P<0.01)。结论:细胞因子(TNF-α,IL-1β,IFN-γ)可增加肠上皮细胞TLR4和MD-2的表达,促进其对LPS的反应,引起肠上皮细胞对常驻菌的过度反应,从而启动或加重肠道炎症。

马桑内酯诱导神经元微丝表达及其与细胞缝隙连接通道关系的研究

目的:研究马桑内酯(CoriariaLactone,CL)对神经元微丝F-actin的影响及其与缝隙连接通道的关系,以及它们在癫痫发病中的意义。方法:利用培养的神经元,采用直接免疫荧光法,用激光扫描共聚焦显微镜观察细胞骨架F-actin的结构及分布,同时测定F-actin含量。结果:致痫剂量的马桑内酯作用于神经元48h后,F-actin的荧光强度较对照组降低(P<0.01),给予CL+1-庚醇(1-hepatal),CL+1-庚醇+丙戊酸钠,CL+1-庚醇+卡马西平作用于神经元48h后F-actin的荧光强度较对照组明显升高(P<0.01),且以加丙戊酸钠和卡马西平组更显著。结论:CL可引起细胞内F-actin含量的降低,而通道阻滞剂1-庚醇,抗癫痫药丙戊酸钠、卡马西平可引起细胞内F-actin含量的增加,这种变化影响细胞骨架微丝装配和神经元胞间信号传导,可能在癫痫的产生中发挥重要作用。

造血干细胞向肝系分化研究进展

干细胞横向分化是近年生物医学领域颇受关注又很有争议的研究课题。造血干细胞分化为肝实质细胞这一报道的出现,为治疗终末性肝病点燃了希望,但争议也随之出现,横向分化的发生概率、频率以及调控因素尚不明了,从实验室到临床应用道路还很漫长。

塞来昔布联合奥曲肽抑制胃癌转移的体内试验研究

目的探讨塞来昔布联合奥曲肽能否抑制人胃癌细胞转移。方法75例胃癌患者被随机分为3组,每组25例。(1)对照组:术前不用任何抗肿瘤药物。(2)塞来昔布组:术前口服塞来昔布200mg/d,7d。(3)联合组:术前口服塞来昔布200mg/d(7d)+奥曲肽100μg/d(皮下注射7d)。免疫组化显示胃癌上皮性钙黏附蛋白(E-Cad)及基质金属蛋白酶(MMP)的表达,免疫印迹法定量检测胃癌组织MMP-2及MMP-9蛋白表达。术后胃癌组织经消化、免疫磁珠分离而得原代胃癌细胞,用改良的BodyenChamber膜侵袭系统比较3组术后胃癌细胞运动能力。结果胃癌组织E-Cad异常表达率在联合组(28·0%)及塞来昔布组(44·0%)明显低于对照组(56·0%,P<0·05)。3组MMP-2、MMP-9蛋白条带面积光密度积分值分别为99±20、260±15、314±11及89±13、180±13、241±12,联合组及塞来昔布组也都明显低于对照组(P<0·05)。联合组胃癌细胞迁移力较对照组低了38%(P<0·05)。结论塞来昔布联合奥曲肽有助于抑制胃癌细胞在人体内的转移。

FAD2基因rs174570C/T多态性与血脂及冠心病关系的研究

目的探讨中国汉族人群FAD2基因内rs174570C/T单核苷酸多态性与血脂及冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary heart disease,CHD)的相关性。方法用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术分析264例经冠状动脉造影确诊的冠心病组和303例正常对照组FAD2基因rs174570C/T基因多态性。比较两组间rs174570C/T多态位点等位基因和基因型频率分布差异。并进一步分析不同基因型间血脂指标的差异。结果冠心病组与对照组中均可检出CC、CT、TT基因型。3种基因型在冠心病组和对照组中分布差异无统计学意义。冠心病组中各基因型的冠脉造影结果的定性分析及Gensini评分的差异无统计学意义。对照组中C等位基因携带者(CC、CT型)低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)水平及总胆固醇(totalcholesterol,TC)高于TT纯合子(P<0.05)。结论中国四川汉族人群中FAD2基因rs174570C/T多态性与LDL-C及TC水平相关,但与冠心病发病及严重程度无关。