左西孟旦对冠心病心力衰竭患者血流动力学和HIF-1α活化水平的影响

目的探讨非洋地黄类正性肌力药左西孟旦对于冠心病心力衰竭患者血流动力学和HIF-1α活化水平的影响。方法随机将80例心功能(NYHA)III-IV冠心病患者平均分为两组,即常规治疗组(对照组)和左西孟旦联合常规治疗组(治疗组)。在治疗前和治疗7天时,记录和监测患者血流动力学指标(LVEF、SV、CO和CI值)和血浆NTpro-BNP水平,同时使用western blot法检测血细胞HIF-1α活化水平。结果两组患者在给予治疗7天后,血流动力学指标(LVEF、SV、CO和CI值)、血浆NTpro-BNP水平和血细胞HIF-1α活化水平均较治疗前有明显改善,差异均有显著统计学意义(P均<0.05)。同时,与对照组相比较治疗组血流动力学指标(LVEF、SV、CO和CI值)、血NTproBNP水平和血细胞HIF-1α活化水平改善更加显著,差异有显著统计学意义(P均<0.05)。在临床研究期间患者均未出现与药物相关的严重不良反应。结论非洋地黄类正性肌力药左西孟旦可以有效改善冠心病心力衰竭患者血流动力学异常和降低血NTpro-BNP水平,并可能与抑制HIF-1α活化水平密切相关。

托伐普坦改善失代偿期冠心病心力衰竭患者心脏功能的临床研究

目的探讨特异性血管加压素v2受体（V2R）拮抗药托伐普坦对治疗失代偿期冠心病心力衰竭患者的价值和意史。方法将80例皿～Ⅳ级心功能的冠心痛患者随机均分为两组，即常规治疗组（对照组）和托伐普坦辅助治疗组（观察组）。在治疗前和治疗3天后，记录和监测患者呼吸困难评分、心功能指标（LVEF、SV、CO和CI值）、血浆钠离子浓度和血浆NTpro-BNP水平。结果两组患者在治疗3天后，呼吸困难评分、心脏功能指标（LVEF、SV、CO和CI值）、血浆钠离子浓度和血浆NTpro-BNP水平均较治疗前明显改善，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。同时与对照组相比较，观察组呼吸困难评分、心脏功能指标（LVEF、SV、CO和CI值）、血浆钠离子浓度和血NTpro-BNP水平改善更加明显，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。同时在研究期间患者均未出现与药物相关的严重不良反应。结论特异性血管加压素V2受体（V2R）拮抗药托伐普坦可以通过减轻液体负荷（前负荷）有效改善冠心病心力衰竭患者的心脏功能和临床症状。

脱氢穿心莲内酯琥珀酸半酯上调水通道蛋白5减轻LPS诱导的急性肺损伤肺水肿的实验研究

目的探讨脱氢穿心莲内酯琥珀酸半酯(DAS)对于急性肺损伤状态下水通道蛋白5(AQP-5)的调节作用及对肺水肿清除的影响。方法 30只雄性BALB/C小鼠平均分为对照组(Control组)、治疗组(LPS+DAS组)和内毒素组(LPS模型组),每组10只。通过HE染色观察肺组织病理学改变;使用湿/干比(W/D)分析肺水肿程度;使用RTPCR和western blotting对AQP-5的表达进行测量。结果小鼠气道内注射内毒素(LPS)72小时后肺损伤评分和W/D比值明显增加,AQP-5表达量水平明显下降,差异有显著统计学意义(均P<0.05)。同时发现,LPS+DAS组小鼠肺损伤评分及W/D比值较LPS组较低,而AQP-5表达量较之升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论脱氢穿心莲内酯琥珀酸半酯可以有效减轻LPS诱导的小鼠ALI导致的肺水肿,其机制可能与上调了AQP-5的表达相关。该结果为脱氢穿心莲内酯琥珀酸半酯治疗ALI/ARDS相关的肺水肿奠定了实验基础。

桑皮素通过抑制STAT3磷酸化下调卵巢癌SKOV3细胞Cyclin D1表达的实验研究

目的探讨桑皮素对卵巢癌SKOV3细胞的抑制作用和对Cyclin D1表达的调节作用及潜在的分子机制。方法使用不同浓度的桑皮素(0μM、10μM和50μM)对卵巢癌SKOV3细胞进行干预。在不同时间点(0h、24h和48h)使用MTT法对SKOV3细胞活性进行测定。在干预48h后,使用qPCR对在不同浓度桑皮素干预的SKOV3细胞Cyclin D1mRNA的表达水平进行测定。使用western blot对在不同浓度桑皮素的SKOV3细胞Cyclin D1蛋白表达水平和STAT3磷酸化水平进行测定。结果使用不同浓度桑皮素对卵巢癌SKOV3细胞进行干预后,细胞活性呈时间依赖性和浓度依赖性降低,差异均存在显著统计学意义(P均<0.05)。桑皮素干预48h后,卵巢癌SKOV3细胞Cyclin D1mRNA和蛋白的表达水平以及STAT3磷酸化水平水平呈浓度依赖性的下降,差异均存在显著统计学意义(P均<0.05)。结论本实验表明桑皮素可以通过抑制STAT3磷酸化显著抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖并下调Cyclin D1的表达。

低氧状态下芹黄素通过抑制HIF-1α下调卵巢癌SKOV3细胞GluT-1表达的实验研究

目的研究在低氧状态下芹黄素能否通过抑制HIF-1α下调卵巢癌SKOV3细胞GluT-1表达。方法将卵巢癌SKOV3细胞分为常氧组、低氧组和低氧+芹黄素组。在低氧状态下对卵巢癌SKOV3细胞使用终浓度为50μM的芹黄素进行干预,在不同时间点(0h、24h和72h)使用MTT法对SKOV3细胞活性进行检测;同时在干预24h后,分别使用qPCR法和western blot法对卵巢癌SKOV3细胞GluT-1和HIF-1αmRNA和蛋白表达水平进行检测。结果低氧环境下SKOV3细胞活性呈时间依赖性下降,差异均有显著统计学意义(P均<0.05);且在各时间点低氧+芹黄素组活性较低氧组下降更加明显,差异均有显著统计学意义(P均<0.05)。同时,在干预24h后卵巢癌SKOV3细胞GluT-1和HIF-1αmRNA和蛋白的表达水平较非干预组细胞明显降低,差异均有显著统计学意义(P均<0.05)。结论在低氧状态下,芹黄素可以通过抑制HIF-1α的合成下调卵巢癌SKOV3细胞GluT-1的表达,从而抑制肿瘤细胞的增殖。该基础研究为芹黄素应用于卵巢癌等恶性肿瘤的治疗奠定了一定的理论基础。

ADAM33基因研究进展

ADAM33基因定位于20号染色体短臂20p13,属于ADAM基因超家族。ADAM基因超家族编码的蛋白质具有金属蛋白酶活性,这种活性与多种疾病的发生相关。在不同人群中的病例对照及家系研究提示ADAM33基因可作为哮喘的候选基因,其抑制剂有望用于哮喘病的治疗。

大黄素上调PPARγ促进HeLa细胞PTEN表达的实验研究

目的探讨大黄素对于宫颈癌HeLa细胞增殖的调控作用及其相关机制。方法使用大黄素和/或GW9662(PPARγ拮抗剂)对HeLa细胞进行干预。在不同时间点(0h、24h、48h和72h)使用MTT法对HeLa细胞活性进行测定。在干预48h后,使用qPCR和western blot对HeLa细胞PTEN和PPARγmRNA和蛋白表达水平进行测定。结果 GW9662组、大黄素+GW9662组与对照组相比较各时间点细胞活性未见显著统计学差异(P均>0.05);但大黄素组与对照组相比较细胞活性呈时间依赖性降低,差异有显著统计学意义(P均<0.05)。干预48h后,大黄素组PTEN、PPARγmRNA和蛋白表达较对照组明显增加,差异有显著统计学意义(P均<0.05);但GW9662组和大黄素+GW9662组PTEN、PPARγmRNA和蛋白表达水平与对照组比较未见显著统计学差异(P均>0.05)。结论实验表明大黄素可以有效抑制HeLa细胞的增殖,并可能与上调PPARγ表达后促进宫颈癌HeLa细胞PTEN的合成密切相关。

橙皮苷通过下调HMGB1抑制LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞MCP-1表达的实验研究

目的探讨橙皮苷对LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症反应的抑制作用及相关的分子机制。方法将小鼠巨噬细胞系(RAW264.7巨噬细胞)分为对照组(Control组)、LPS组和LPS+橙皮苷组(LPS+HPD组)3组,在干预24小时后使用qPCR法和western blotting法对RAW264.7巨噬细胞MCP-1和HMGB1mRNA及蛋白的表达水平进行检测。结果与Control组比较,在LPS干预24小时后RAW264.7巨噬细胞MCP-1和HMGB1mRNA及蛋白的表达水平显著增加,差异均有统计学意义(均P<0.05);但LPS组较LPS+橙皮苷组MCP-1和HMGB1mRNA及蛋白的表达增加更加显著,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论本实验结果表明,在LPS诱导的炎症状态下,橙皮苷可能可以通过抑制HMGB1的表达下调RAW264.7巨噬细胞MCP-1的合成和释放。

瑞舒伐他汀通过激活SGK1上调ALI小鼠ENaC表达的实验研究

目的探讨在急性肺损伤(ALI)状态下瑞舒伐他汀对肺组织钠离子通道(ENaC)的调节作用和相关机制。方法将30只雄性C57BL/6小鼠随机分为3组,即空白对照组(Control组)、干预组(LPS+ROS组)和模型组(LPS组),每组10只。在给予大肠埃稀杆菌内毒素(LPS)干预72小时后,采用HE染色对小鼠肺组织病理改变进行观察和肺组织损伤评分;使用湿干比(W/D比值)对肺水肿严重程度进行分析;使用RT-PCR和western blot对肺组织ENaC的α亚基(α-ENaC)mRNA和蛋白的表达进行分析;同时使用western blot对SGK1的活化水平(phospho-SGK1/total SGK1)进行观察。结果在给予雄性C57BL/6小鼠LPS干预72小时后,肺组织出现显著的病理学改变,肺损伤评分明显增加,肺水肿指标W/D比值显著升高,α-ENaC mRNA和蛋白的表达水平明显降低,SGK1的活化水平亦明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。同时LPS+ROS组小鼠肺组织病理改变、肺损伤评分和W/D比值较LPS组小鼠明显减轻,而α-ENaC mRNA和蛋白的表达及SGK1的活化水平较LPS组小鼠明显增加,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论实验表明,在LPS诱导的小鼠ALI状态下,瑞舒伐他汀可以通过增加肺组织ENaC的表达有效地减轻肺水肿严重程度,并发现该机制与促进SGK1的活化密切相关。这为他汀类药物应用于急性呼吸窘迫综合症(ARDS)的临床治疗奠定了基础。

二肽酰肽酶-4抑制剂通过PKA/NF-κB信号通路调节LPS诱导的RAW264.7细胞炎症反应的实验研究

目的探讨二肽酰肽酶-4(DPP-4)竞争性抑制剂沙格列汀对LPS诱导的小鼠巨噬细胞(RAW264.7细胞)炎症反应的调节作用及相关的分子机制。方法将RAW264.7细胞分为4组,分别为对照组(Control组)、LPS组、LPS+沙格列汀(LPS+SAX组)和LPS+沙格列汀+PKA抑制剂H-89组(LPS+SAX+H-89组)。在干预6小时后使用qPCR法和western blot法对细胞ICAM-1mRNA和蛋白的表达水平进行检测;并采用western blot法对细胞PKA和NF-κB p65活化水平进行分析。结果与Control组相比较,在LPS干预6小时后RAW264.7细胞ICAM-1mRNA和蛋白的表达水平及NF-κB p65活化水平均明显上升,而PKA活化水平明显降低,差异均有统计学意义(P均<0.05);但LPS组较LPS+SAX组ICAM-1表达和NF-κB p65活化水平的增加更明显,而PKA活化下降更加明显,差异均有统计学意义(P均<0.05)。同时发现在LPS诱导状态下沙格列汀对于ICAM-1表达和NF-κB p65活化水平的抑制作用和PKA活化水平的促进作用可被PKA抑制剂H-89显著拮抗,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论本研究显示DPP-4抑制剂可以通过调控PKA/NF-κB信号通路下调LPS诱导的小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞的炎症反应,为DPP-4抑制剂应用于炎症性疾病的治疗奠定了初步的理论基础。

生长激素释放肽Ghrelin的研究进展及其抗炎意义

Ghrelin是一个由28个氨基酸组成的能够促进生长激素释放的活性多肽,近年来的研究发现其不仅与调节能量代谢和促肥胖密切相关,还具有抑制炎症反应的作用。本文通过查阅大量文献,对Ghrelin的研究进展及其抗炎意义进行综述。

Nrf2-Keap1抗氧化系统与慢性阻塞性肺疾病

Nrf2是细胞调节抗氧化应激反应的重要转录因子。Keap1是Nrf2的胞浆蛋白伴侣分子。Nrf2-Keap1组成的抗氧化系统在细胞抗氧化应激反应中发挥重要的作用。氧化/抗氧化失衡是慢性阻塞性肺疾病(COPD)的主要发病机制之一。研究Nrf2-Keap1抗氧化系统在COPD中的作用日益受到重视。本文对Nrf2-Keap1抗氧化系统的组成与信号调控,及其在COPD中的作用进行了综述,提示其在治疗和预防COPD中可能发挥作用。

丹龙口服液治疗轻中度慢性阻塞性肺疾病急性加重期的多中心及前瞻性研究

目的分析丹龙口服液(Danlong oral liquid,DOL)联合西药常规疗法对轻中度慢性阻塞性肺疾病急性加重(acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease,AECOPD)的疗效和安全性。方法选择2019年8月至2020年12月招募的中国16家医院AECOPD患者395例,随访7 d。治疗期间使用丹龙口服液联合常规西医疗法患者297例为观察组,只接受常规西医疗法患者98例为对照组。比较两组患者的AECOPD相关症状评分、中医症候评分和血清中的炎症因子水平,探讨药物疗效及安全性。结果观察组慢性阻塞性肺疾病评估量表(CAT)评分降低值大于对照组(3.24±2.90 vs.2.47±2.62),P<0.05。观察组治疗前后的中医证候评分下降分数大于对照组(4.62±3.73 vs.3.62±3.22),P<0.05。治疗期间使用全身性糖皮质激素观察组4例(1.35%)和对照组3例(3.62%)(P>0.05)。观察组不良事件发生率为8.75%,对照组为4.1%(P>0.05)。结论丹龙口服液联合西医常规疗法能有效安全缓解轻中度AECOPD临床症状,提高患者生活质量。

甘草酸二铵抑制慢性哮喘模型小鼠气道平滑肌增生

目的评价甘草酸二铵(DG)对气道重构的影响及可能的作用途径。方法 30只雄性BALB/C小鼠随机平均分为3组,既空白组、卵清蛋白+甘草酸二铵组(OVA+DG组)和卵清蛋白组(OVA组)。在干预75 d后处死小鼠获得肺组织标本,并进行HE染色和Masson染色及气道上皮基底膜下胶原沉积测量。使用RT-PCR和Western blotting对α-SMA和PPARγ的mRNA和蛋白表达进行测定。结果 HE染色发现OVA致敏和激发75 d后小鼠肺组织出现明显的病理改变,且OVA组较OVA+DG组更加明显。Masson染色和基底膜下胶原沉积分析发现OVA干预后小鼠基底膜下胶原沉积明显增加,且OVA组较OVA+DG组增加更显著。RT-PCR和Western blotting分析发现OVA干预后小鼠肺组织α-SMA表达明显增加,而PPARγ表达则明显下降,但与OVA+DG组相比较OVA组α-SMA表达增加和PPARγ表达下降更明显。结论 DG可能通过上调PPARγ的表达减轻OVA诱导的慢性哮喘导致的气道肌成纤维细胞的增殖和基底膜下的胶原沉积。

炎琥宁雾化吸入对支气管哮喘急性发作期患者临床症状和炎症反应的影响

目的观察炎琥宁雾化吸入对支气管哮喘急性发作期患者临床症状和炎症反应的影响。方法将100例支气管哮喘急性发作期患者随机平均分为常规治疗组(对照组)和炎琥宁雾化吸入+常规治疗组(观察组)。分别在治疗前和治疗3天后对患者第1s用力呼气容积(FEV1)占预计值%(FEV1%)、FEV1/FVC%和最大呼气流量(PEF)个人最佳值%(PEF%)进行检测,并对患者血中IL-4、IL-5和IL-13水平进行测定。结果两组患者在治疗3天后肺功能指标(FEV1%、FEV1/FVC%及PEF%)及血中IL-4、IL-5和IL-13水平均有显著改善,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比较,观察组患者肺功能指标(FEV1%、FEV1/FVC%及PEF%)及血中TNF-α、IL-4、和IL-13水平改善更加显著,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论炎琥宁雾化吸入可以有效的改善支气管哮喘急性发作期患者的肺功能状态,同时炎琥宁对支气管哮喘相关的炎症反应亦有显著的抑制作用。为进一步推广炎琥宁雾化吸入治疗支气管哮喘奠定了临床基础。

瑞舒伐他汀对支气管哮喘患者Th2免疫异常的调控作用

目的探讨瑞舒伐他汀辅助治疗对于中到重度成年支气管哮喘患者Th1/Th2免疫应答失衡、炎症水平和肺功能的影响。方法 100例中到重度成年支气管哮喘患者随机平均分为干预组[吸入糖皮质激素激素/长效β2受体激动剂(ICS/LABA)+瑞舒伐他汀]和对照组(ICS/LABA),每组各50例。在治疗前和治疗13周后使用肺功能仪记录患者第1s用力呼气容积(FEV1)占预计值%和最大呼气流量(PEF)个人最佳值%;用ELISA分析血中IL-4、IL-5和IL-13水平;用qPCR测定血细胞GATA-3mRNA表达水平;用Western blot法分析血细胞GATA-3的蛋白水平。结果治疗13周干预后,2组患者血中IL-4、IL-5和IL-13水平、FEV1占预计值%和PEF个人最佳值%均较治疗前明显改善,差异均有统计学意义(P均<0.05)。同时发现血细胞中GATA-3mRNA和蛋白的表达较治疗前显著降低,差异均有显著统计学意义(P均<0.05)。同时,干预组各指标较对照组改善更加明显,差异有显著统计学意义(P均<0.05)。结论瑞舒伐他汀可能可以通过纠正Th1/Th2免疫失衡改善支气管哮喘的炎症水平和肺功能。该实验为瑞舒伐他汀辅应用于支气管哮喘的临床治疗,但需进一步多中心大样本量临床研究明确其价值和意义。

血必净辅助治疗对于重度AECOPD患者血中TNF-α水平的影响和对HIF-1α活化的调节作用

目的探讨血必净辅助对于重度AECOPD患者血中TNF-α水平的影响和对HIF-1α活化的调节作用。方法 80例D级AECOPD患者随机平均分为血必净+常规治疗组(干预组)和常规治疗组(对照组),分别于0天和10天时检查患者动脉血气指标(pH、PO2和PCO2),FEV1占预计值%,血中TNF-α水平,并用western blot法对血细胞中HIF-1α水平进行分析。结果经10天治疗后两组患者动脉血气指标(pH、PO2和PCO2),FEV1占预计值%,血中TNF-α水平均明显改善,HIF-1α活化水平均明显降低,同时干预组较对照组动脉血气指标(PH、PO2和PCO2)、FEV1占预计值%、血中TNF-α水平和HIF-1α活化水平改善更明显(均P<0.05)。而实验过程中干预组患者未出现与血必净相关的严重不良反应。结论血必净对改善重度AECOPD患者全身炎症反应和临床症状有辅助作用,并可能与抑制HIF-1α活化密切相关,但仍需进行大规模多中心的临床观察,以进一步证实血必净在AECOPD治疗中的价值。

SELDI蛋白质芯片技术及其应用

随着人类基因组测序计划的完成 ,鉴定细胞内蛋白质表达、结构、功能及相互作用方式等成为后基因组时代的主要目标之一。为此 ,需要高通量的蛋白质组学研究的技术和方法。近年来出现的表面增强激光解吸 /电离(surface enhancedlaserdesorption /ionization ,SELDI)蛋白质芯片技术是一种操作简单 ,方便快捷 ,样本需要量少 ,敏感性高 ,特异性强的高通量的研究蛋白组学的方法 ,在蛋白质功能分析、肿瘤标志物筛选、药物研发等方面具有广泛的应用前景。

牛蒡子苷元抗哮喘小鼠气道炎症作用及机理研究

目的:观察牛蒡子苷元对哮喘小鼠气道炎症的影响并探究相关作用机制。方法:将30只雌性BALB/c小鼠随机分为正常对照组、模型组和牛蒡子苷元组。采用卵清白蛋白与氢氧化铝致敏,并雾化吸入卵清蛋白激发制备小鼠支气管哮喘模型,81天后检测小鼠支气管肺泡灌洗液中细胞总数和炎症细胞数;采用HE染色在光镜下观察各组小鼠肺组织病理学变化;采用RT-PCR和Western blot分别对肺组织E选择素的mRNA和蛋白表达进行测定;采用Western blot对肺组织中NF-κB p65活化水平(p-NF-κB p65/total NF-κB p65)进行检测。结果:与模型组相比,牛蒡子苷元组小鼠BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞数、中性粒细胞和巨噬细胞数明显降低;小鼠肺组织病理变化明显减轻;此外,与模型组相比,牛蒡子苷元组哮喘小鼠肺组织E选择素mRNA和蛋白的表达降低,哮喘小鼠的NF-κB p65活化水平显著下降。结论:牛蒡子苷元10 mg/kg可能通过抑制NF-κB的活化从而降低OVA诱导的哮喘小鼠气道炎症水平,为牛蒡子苷元进一步应用于哮喘的治疗奠定了一定的实验基础。

甘草酸二胺通过上调水通道蛋白5减轻小鼠急性肺损伤肺水肿的实验研究

目的探讨甘草酸二胺对于急性肺损伤状态下水通道蛋白5(AQP-5)的调节作用及相关机制。方法30只SPF级雄性BALB/c小鼠被随机分为3组,即Control组(对照组)、LPS组(模型组)和LPS+DG组(治疗组),每组10只。通过HE染色观察肺组织病理学改变,并进行肺损伤评分;使用湿/干比(W/D)分析肺水肿程度;RT-PCR和Western blot对AQP-5的表达进行测量;Western blot测定总核因子-κB p65(total NF-κB p65)和磷酸化-NF-κB p65(p-NF-κB p65)蛋白表达。结果小鼠气道内注射LPS 72h后,肺损伤评分和肺组织W/D比值增加,AQP-5表达水平下降,p-NF-κB p65水平增加,差异有统计学意义(P均<0.05)。同时发现,LPS+DG组小鼠肺损伤评分、W/D比值和p-NF-κB p65水平较LPS组降低,LPS+DG组AQP-5表达量较LPS组升高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论甘草酸二胺可以有效的减轻LPS诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)导致的肺水肿,其机制可能与甘草酸二胺抑制NF-κB p65的活化,上调AQP-5的表达有关。