紫杉醇联合顺铂治疗78例晚期乳腺癌的近期疗效

目的 :评价紫杉醇联合顺铂对晚期乳腺癌的治疗作用。方法 :采用紫杉醇联合顺铂的联合方案 ,治疗晚期乳腺癌 78例 ,均为初治患者 ,均经细胞学或病理证实。结果 :本组完全缓解CR10 3% 8例 ,部分缓解PR5 3 8% 4 2例 ,(CR +PR)有效率 6 4 %。主要毒性为骨髓抑制及消化道反应。结论

GP与MPV方案治疗晚期非小细胞肺癌的疗效比较

目的 比较 GP与 MPV方案治疗晚期非小细胞肺癌 (NSCL C)的疗效。方法 6 4例晚期 NSCL C患者随机分组 ,采用 GP治疗 32例 ,MPV治疗 32例。 Kaplan- Meier方法分析患者中位生存期 ,比较患者近期有效率及化疗毒副作用。结果 GP组有效率 5 0 % (16例 ) ,MPV组有效率 2 8% (8例 ) ,两组有效率比较差异具有显著性 (P<0 .0 0 5 )。MPV组中位生存期为 32周 ,GP组中位生存期 5 1周 ,两组生存期差异有显著性 (P<0 .0 0 5 )。化疗的毒副反应主要是胃肠道反应和骨髓抑制。结论 GP比 MPV更能延长患者中位生存期增加有效率 。

TC与MPV方案治疗晚期非小细胞肺癌的疗效观察

目的 :比较TC与MPV方案治疗晚期非小细胞肺癌 (NSCLC)的疗效。方法 :80例晚期NSCLC患者采用TC4 0例 ,采用MPV4 0例 ,用Kaplan -Meier方法分析患者生存期。采用Cox比例风险模型分析影响预后的因素。结果 :MPV组中位生存期为 9个月 ,TC组中位生存期 14个月。两组生存期差异有显著性 (P <0 0 0 5 ,0 0 0 1) ,化疗的毒副反应主要是胃肠道反应和骨髓抑制。结论 :TC比MPV能延长患者生存期 。

去甲去氢长春花碱治疗42例晚期乳腺癌的近期疗效

目的 :评价去甲去氢长春碱 (诺维本NVB)对晚期乳腺癌的治疗作用。方法 :采用诺维本为主药的联合方案 ,治疗晚期乳腺癌 4 2例 ,均为初治患者 ,均经细胞学或病理证实。结果 :本组完全缓解CR4例 ,部分缓解PR2 4例 ,有效率 6 6 7%。主要毒性为骨髓抑制 ,及消化道反应。结论 :NPC方案是治疗晚期乳腺癌较为理想的方案。

NPC与MPV方案治疗晚期非小细胞肺癌的疗效比较

目的 :比较NPC与MPV方案治疗晚期非小细胞肺癌 (NSCLC)的疗效。方法 :6 4例晚期NSCLC患者采用NPC32例 ,采用Kaplan -Meier方法分析患者生存期。采用Cox比例风险模型分析影响预后的因素。结果 :MPV组中位生存期为 8个月 ,NPC组中位生存期 12个月。两组生存期差异有显著性 (P <0 0 0 5、 0 0 0 1)化疗的毒副反应主要是胃肠道反应和骨髓抑制。结论 :NPC比MPV能延长患者生存期 。

IL-18-PE38重组免疫毒素的原核表达及其鉴定

目的 构建绿脓杆菌外毒素 PE38融合鼠 IL - 18基因的原核表达载体并鉴定其表达。方法 首先采用 RT- PCR获得小鼠 IL - 18基因 ,再通过适当的酶切及连接反应 ,构建小鼠 IL - 18与 PE38融合基因的原核表达载体 PRKL - IL 18- PE38,重组载体经限制性内切酶、PCR及 DNA序列测定等证实连接片段的正确性后 ,再转染感受态大肠杆菌 BL 2 1,经 IPTG诱导表达 ,表达产物用 SDS- PAGE和蛋白免疫印迹法分别测定其相对分子质量及特异性。结果 酶切分析、PCR鉴定和 DNA测序等证实 ,IL - 18- PE38免疫毒素的原核表达载体被成功构建 ,重组载体在大肠杆菌中获得了稳定的表达 ,表达产物的相对分子质量与预期值一致 ,且所表达蛋白可被抗 IL - 18的特异性抗体所识别。结论 IL - 18- PE38融合基因原核表达载体的获得 ,为进一步研究其对 Th1细胞的靶向细胞毒性及临床应用奠定了基础。

鼠表皮生长因子受体胞外段原核表达、纯化与复性

用多聚酶链反应 (PCR)方法从既往构建质粒扩增鼠表皮生长因子受体 (EGFR)胞外段基因及适宜酶切位点 ,进而构建原核表达载体。克服质粒丢失的不足 ,在大肠杆菌中表达目的蛋白 ,并在变性条件下通过 Ni2 +柱亲和层析纯化表达蛋白 ,聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS- PAGE)示纯度在 95 %以上。去除组氨酸标记的纯化蛋白在梯度尿素中透析复性。复性蛋白在表皮生长因子的作用下可以同源二聚化而在非还原 SDS- PAGE及蛋白印迹分析中呈二聚体状态 ,其所产生抗体可以识别复性蛋白及表达于肺癌细胞上的 EGFR,提示复性后大肠杆菌表达鼠EGFR胞外段重组蛋白已获得一定空间结构 ,并具有免疫原性 ,可以进一步用于

EB病毒GST-Rta融合蛋白的表达、纯化及其多克隆抗体的制备

目的表达和纯化EB病毒的重组融合蛋白谷胱氨肽S转移酶(GST)-Rta185和GST-Rta150,并制备特异性多克隆抗体。方法质粒表达载体pGEX-R185I、pGEX-R150I和pGEX-5X-3分别转入大肠杆菌BL21(DE3)中,异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达,用GlutathioneSepharose4B亲和层析柱纯化目的蛋白。将纯化后的GST-R185、GST-R150和GST蛋白免疫新西兰大白兔制备抗血清。结果在细菌裂解液中检测到高表达量的融合蛋白,经GlutathioneSepharose4B亲和层析柱纯化获得较高纯度的GST-Rta融合蛋白。应用Westernblot和ELISA方法检测证实,用纯化的GST-Rta蛋白免疫家兔得到了特异性的多克隆抗体。结论通过上述方法制备出来的融合蛋白纯度较高,免疫家兔获得的多克隆抗体具有良好的特异性,为研究EB病毒Rta蛋白及与EB病毒相关疾病的诊断和治疗提供了重要的条件。

格拉司琼与恩丹西酮预防晚期非小细胞肺癌化疗中恶心呕吐的疗效观察

目的 观察格拉司琼与恩丹西酮预防紫杉醇与顺铂联合化疗晚期非小细胞肺癌引起恶心呕吐的作用及毒副反应。方法 将 92例接受紫杉醇与顺铂联合化疗晚期非小细胞肺癌患者随机分为格拉司琼组 (n=4 6 )和恩丹西酮组 (n=4 6 ) ,均接受相同方案的化疗。格拉司琼组于每日化疗前后 10 m in静脉注入格拉司琼 3m g,恩丹西酮组于每日化疗前后 10 m in静脉注入恩丹西酮 8mg。观察化疗后第 1d(急性 )至第 7d(延迟性 )恶心呕吐发生的情况。结果 在化疗后第 1d、第 3d、第 7d格拉司琼对恶心呕吐的有效率 (5 9% ,5 2 % ,35 % ) ,优于恩丹西酮(4 8% ,33% ,2 2 % ,P<0 .0 5 )。结论 格拉司琼能较好控制用紫杉醇与顺铂联合化疗晚期非小细胞肺癌所致的恶心呕吐 。

异种黑色素细胞疫苗诱导小鼠抗恶性黑色素瘤免疫反应的机理研究

目的 研究异种黑色素细胞疫苗诱导小鼠抗恶性黑色素瘤免疫反应的机理。方法 制备异种黑色素细胞疫苗 ,免疫小鼠。采用间接 EL ISA法检测小鼠抗肿瘤抗体滴度及抗体亚型 ,纯化免疫球蛋白及进行体外抗肿瘤增殖 ,采用 Western blot法分析交叉抗原蛋白质。接种恶性黑色素瘤 ,观察肿瘤生长 ,采用免疫细胞去除法分析NK细胞及 T细胞亚群对疫苗抑瘤效应的影响。结果 异种疫苗免疫后 2周小鼠体内出现抗自身肿瘤抗体 ,产生的抗体以 Ig G为主 ,抗体认别的猪眼黑色素细胞及恶性黑色素瘤细胞交叉抗原为相对分子质量达 180× 10 3的蛋白质 ,纯化的免疫球蛋白在体外能抑制恶性黑色素瘤细胞增殖。异种疫苗诱导特异性保护性免疫反应使 90 %小鼠恶性黑色素瘤生长受到抑制 ,去除 NK细胞不影响疫苗抑瘤效应 ,去除 CD4 + T细胞使疫苗抑瘤效应消失 ,去除CD8+ T细胞 70 %小鼠恶性黑色素瘤生长仍受到抑制。结论 异种黑色素细胞疫苗诱导特异性体液免疫及细胞免疫反应 ,抑制恶性黑色素瘤的生长 ,CD4 + T细胞在这一过程中发挥了关键性作用。

人EGFR胞外段原核表达及免疫原性研究

目的 :研究人EGFR胞外段在原核本系的表达、纯化条件以及对小鼠的免疫原性。方法 :以既往构建包含人EGFR胞外段基因的表达质粒为基础 ,采用基因工程方法构建pET原核表达载体。在大肠杆菌中表达目的蛋白 ,表达蛋白在变性条件下 ,通过Ni2 + 柱亲和层析纯化以包涵体形式存在的His -Tag融合蛋白 ,SDS -PAGE检测其纯度。去余His-Tag的纯化蛋白在梯度尿素中透析复性。以复性蛋白免疫小鼠获得抗血清 ,westernblotting及流式细胞仪检测特异抗体的存在。结论 :通过限制酶切分析及测序鉴定表明获得了人EGFR胞外段基因的pET原核表达载体 ,SDS -PAGE分析表明在IPTG诱导下可以表达 90Kd目的蛋白其纯度大于 95 % ,所产生抗体可以识别复性蛋白及表达于A5 4 9细胞上的EGFR。提示在大肠杆菌中表达的人EGFR胞外段重组蛋白具有免疫原性 。

重组人内皮抑素腺病毒抗肿瘤实验研究

目的肿瘤生长具有血管依赖性。内皮抑素为胶原X羧基末端裂解片段,是重要的内源性血管抑制因子。实验中利用重组人内皮抑素腺病毒(recombinanthumanendostatinadenorirus,Ad-hEndo)在肿瘤局部给药以探索其抗血管基因治疗的可行性。方法以Ad-hEndo感染体外培养肿瘤细胞,观察重组蛋白表达及其对培养的血管内皮细胞的抑制效应;在裸鼠A549肺癌模型中瘤内注射重组病毒,观察肿瘤抑制效应、剂量依从效应和毒副反应。结果不同感染复数的Ad-hEndo感染肿瘤细胞均表达重组内皮抑素蛋白,并能抑制血管内皮细胞的生长。动物实验中Ad-hEndo治疗组肿瘤体积及肺转移结节数明显低于对照组,且转移数与治疗剂量负相关。结论以腺病毒为载体的肿瘤局部血管基因治疗能抑制肿瘤新生血管形成进而有效抑制肿瘤生长和转移,其效应具有剂量依从性。

CpG ODN加强树突状细胞疫苗抗Lewis肺癌的研究

目的 探讨CpGODN对树突状细胞 (DC)疫苗抗肿瘤作用的影响。方法 应用ODN182 6作为DC的成熟刺激信号 ,体外控制DC充分成熟 ,以混合或融合的方式将肿瘤抗原负载于DC制备DC疫苗。以特异性杀伤细胞活性和淋巴细胞增殖反应测定疫苗的体外免疫活性 ,并将疫苗经小鼠腹腔注射 ,观察治疗和预防实验肿瘤的生长情况。结果 经ODN 182 6刺激后的DC细胞形态呈成熟状态 ,流式细胞仪分析检测刺激前后DC细胞表面分子CD4 0的表达分别为 11和 2 4 (MFI) ,CD86的表达分别为 33和 75 (MFI) ,刺激后的DC培养上清中IL 12的分泌水平为刺激前的 10倍。刺激后DC融合疫苗组CTL活性、T淋巴细胞增殖活性及体内Lewis肺癌移植瘤的抑瘤率均明显高于未刺激的DC融合组 (P <0 .0 5 )。结论 CpGODN能通过诱导DC成熟 ,增强DC疫苗的抗肿瘤作用 ,有效诱导机体产生特异的抗肿瘤反应。未成熟的DC可通过与肿瘤细胞混合的方式 ,获得较好的抗原捕获效果 ,产生一定的抗肿瘤效应 ,而对于刺激成熟的DC则需通过融合手段负载抗原 ,达到有效的抗肿瘤活性。