小鼠肺癌B_7疫苗细胞FLB_(2C)诱导的抗肿瘤免疫应答

目的 研究小鼠肺癌细胞与活化B淋巴细胞融合的疫苗细胞FLB2C 诱导细胞免疫反应情况。方法 用母本细胞LA795作对照 ,采用体外混合淋巴细胞培养 ,观察FLB2C 细胞刺激T细胞增殖情况 ;通过CTLL细胞MTT法测定FLB2C刺激T细胞产生分泌IL 2的作用 ;用FLB2C免疫小鼠 ,观察疫苗体内诱导小鼠CTL活性的能力。结果 FLB2C细胞在体外刺激T细胞增殖的作用明显比LA795强 ;FLB2C能刺激T细胞分泌IL 2 ,而LA795则不能 ;FLB2C细胞在体内能诱导CTL活性 ,其诱导的CTL在体外对FLB2C 细胞和LA795的杀伤率分别为 3 4%和 2 5 .3 % ,而LA795诱导的CTL对FLB2C和LA795杀伤率分别为 10 .5 %和 12 .2 5 % ,两者的杀伤率有显著性差异。结论 FLB2C细胞在体内外均能刺激T细胞免疫应答 ,其能力明显强于未融合的LA795小鼠肺癌细胞。将其作为疫苗细胞将有可能通过提高机体免疫应答而达到治疗肺癌的效果。

丹参酮ⅡA诱导人鼻咽癌细胞凋亡及其作用机制的体外实验研究

目的 探讨丹参酮 A诱导人鼻咽癌细胞 (CNE- 1)凋亡的作用及其机制。方法 在体外细胞培养的基础上用 0 .5 μg/m l丹参酮 A处理 CNE- 1细胞 4天 ,而后应用光镜、电镜、集落形成试验、DNA凝胶电泳及流式细胞仪分析 CNE- 1细胞增殖及凋亡的改变。结果 经丹参酮 A处理后 ,CNE- 1细胞增殖明显被抑制 ,镜下可见典型的凋亡细胞的特征性改变 ,细胞 DNA呈现“梯状”断裂现象 ,流式细胞仪分析细胞凋亡指数为 16 .9% ,而对照组为 6 .4% ,细胞凋亡相关基因 fas、bax、p5 3及细胞周期负调基因 p2 1表达明显增加 ,bcl- 2表达明显降低。结论 丹参酮 A具有诱导鼻咽癌细胞凋亡的作用 。

Lewis肺癌耐药细胞的诱导及其耐药性的初步研究

目的 建立肺癌耐药动物模型 ,诱导耐ADM的Lewis肺癌细胞株 ,并鉴定其生长特性、细胞内药物的释放特性及耐药谱。方法 用渐进式给药法诱导建立耐ADM的Lewis肺癌细胞株 ,绘制生长曲线 ,计算倍增时间 ;用IPP图象分析系统观察比较耐药细胞及其亲本细胞内ADM和Rh B的荧光光密度 ;荧光分光光度计法测定细胞内ADM含量并绘制ADM释放曲线 ;MTT法测定细胞的IC5 0 ,计算耐药指数。结果 经 14个月的诱导培养获得了能在 0 .4μg mlADM中稳定生长的Lewis肺癌细胞株———L3 8/ADM ,其在动物体内的成瘤率为 10 /10 ;在 0 .15mg/lADM和普通 164 0培养基中的倍增时间分别为 2 2 .0h和 2 1.8h ;在 4mg/lADM和Rh B中培养后 ,耐药细胞及其亲本细胞内的荧光光密度比分别为 2 .82∶1和 2 .65∶1,耐药细胞内的ADM含量仅为其亲本细胞的 64 .7% ,但其药物释放速度无明显差异。L3 8/ADM细胞除对ADM耐药外 ,对DNR、VCR、MIT和CDDP也有不同程度的耐药性。结论 L3 8/ADM是一株典型的MDR细胞株 ,其耐药作用可能是由于胞膜的药物渗透受阻所至。

丹参酮诱导人肺癌细胞凋亡及其分子机理

目的 了解丹参酮对人肺癌细胞 (SPC A 1)的凋亡诱导作用 ,并探讨其可能的分子机理。方法 体外培养的SPC A 1细胞经无毒剂量的丹参酮ⅡA(0 .5mg/L)处理 5天 ,光镜、电镜观察细胞凋亡情况 ,流式细胞仪检测凋亡指数及凋亡相关基因的蛋白表达 ,并以全反式维甲酸及顺铂作为对照。结果 SPC A 1细胞经丹参酮ⅡA处理后 ,电镜观察可见多量凋亡细胞。流式细胞仪检测 :丹参酮组凋亡指数显著高于顺铂组及对照组 ,而与维甲酸组比较无显著差异。丹参酮组促凋亡基因 p5 3、Fas、Bax表达水平明显升高 ,而凋亡抑制基因Bcl 2的表达水平则显著降低。结论 丹参酮ⅡA具有诱导肺癌SPC A 1细胞凋亡的作用 ,其分子机理可能是上调p5 3、Bax、Fas及下调Bcl 2的表达。

丹参酮对人肺癌细胞株的增殖抑制作用及其分子机理

目的 观察丹参酮ⅡA对人肺腺癌细胞 (SPC A 1)的增殖抑制作用及其分子机理。方法 体外培养的SPC A 1细胞经无毒剂量 ( 0 .5 μg/ml)的丹参酮ⅡA处理 5天后 ,观察细胞形态学、增殖动力学、细胞周期分布及肿瘤相关基因表达改变 ,并以全反式维甲酸及顺铂作为对照。结果 SPC A 1细胞经丹参酮ⅡA处理后 ,细胞生长明显减慢 ,集落形成率显著降低。FCM细胞周期分析 :S期细胞显著减少 ,G0 /G1 期细胞则明显增加。丹参酮ⅡA可使细胞p5 3、p2 1表达显著升高而CDKN2 明显降低。结论 丹参酮ⅡA对SPC A 1细胞增殖具有显著抑制作用 ,其分子机理可能是丹参酮ⅡA能显著上调p5 3、p2 1表达和下调CDKN2 的表达而抑制DNA的合成。

植入靶向持续组织间化疗概念的可行性动物实验报告

目的 :通过动物实验 ,研究提出植入靶向持续组织间化疗的概念的可行性 ,并与其他疗法比较此种疗法有何优越性。方法 :用生物相容性和可生物降解的聚乳酸作为缓释药物载体 ,制备可在体内缓释氟脲嘧啶 (Fluo rouracil,Fu)微球。采用植入被动靶向的方式 ,将氟脲嘧啶缓释微球直接植入实验动物的移植肿瘤内或肿瘤旁 ,形成局部持续的抗癌药物的高浓度 ,使Fu分子不断渗入瘤细胞内 ,以杀死肿瘤细胞。用随机分组的方式 ,对比Fu缓释微球和Fu注射剂不同的给药方式 ,测定肿瘤消退和毒副作用 ,并依据病理切片结果作定量分析 ,评价Fu聚乳酸微球的抗癌疗效。结果 :Fu聚乳酸微球有平稳持续缓释药物的理想曲线 ,没有突释效应。用被动靶向直接植入方式 ,将Fu聚乳微球直接植入实验动物的移植肿瘤病灶区域或肿瘤旁 ,比注射剂Fu全身给药 ,有更佳的杀伤肿瘤细胞的作用和很低的毒副作用。数据采用方差齐性检验 ,Fu注射剂瘤体注射组、Fu聚乳酸微球瘤体内注射低剂量组、Fu聚乳酸微球瘤体内注射高剂量组与无药聚乳酸微球组比较 ,瘤重消减 (P <0 0 0 5 )有显著性差异 ,且微球内FU浓度越高 ,疗效越好。而Fu注射剂腹腔注射组与此组比较 (P >0 0 5 ) ,无统计学意义。结论

毫米波辐射对人急性早幼粒白血病细胞诱导凋亡的作用

目的 探讨毫米波对人急性早幼粒白血病细胞增殖和凋亡的影响。方法 以波长7.1mm ,频率 42 .2GHz的毫米波辐射体外培养的NB4 细胞 ,光镜及电镜观察细胞形态改变 ,生长曲线测定细胞生长及增殖情况 ,流式细胞仪 (FCM)检测细胞周期分布、细胞凋亡指数及凋亡相关基因表达的改变。结果 1mW /cm2 的毫米波辐射 ,每日 1次 ,30min ,可明显抑制NB4 细胞的生长 ,辐射第 3天细胞生长抑制率为 44 .1% ;光镜及电镜下可见凋亡细胞形态 ,FCM示G0 /G1期细胞及凋亡百分比增加 ;p2 1、p5 3、Bax和Fas表达增加 ,c-Myc、Bcl- 2表达下降。 5mW /cm2 的毫米波对细胞增殖及凋亡的影响却不明显 ,虽然 p5 3、Bax和Fas表达增加 ,Bcl- 2表达下降 ,但c-Myc和p2 1的表达却无改变。结论 1mW /cm2 毫米波辐射适当时间后能显著抑制NB4 细胞增殖、诱导细胞凋亡 ;其凋亡诱导机制可能与调控细胞凋亡相关基因的表达有关 ,其中对c -Myc蛋白表达的下调可能具有关键作用。

检测肺癌患者外周血和骨髓微转移的临床意义

目的探讨检测肺癌患者外周血和骨髓微转移的特异性、敏感性及临床意义。方法应用巢式RT-PCR技术,检测59例肺癌患者、11例肺部良性病变患者和20例健康人外周血、骨髓中CK19 mRNA表达。结果巢式RT-PCR检测技术的敏感性达到10-6。59例肺癌患者中,20例检测出外周血微转移,13例检测出骨髓微转移,其阳性检出率分别为33.9％(20/59)和22.0％(13/59),二者有显著正相关(P<0.05)。肺癌患者外周血和骨髓微转移与肺癌组织学类型、细胞分化程度及P-TNM分期均存在密切关系(P<0.05或P<0.01)。肺良性病变患者、健康人外周血和骨髓中均未检测出CK19 mRNA表达。结论肺癌患者外周血和骨髓中均存在用常规方法检测不出的微转移;应用巢式RT-PCR技术检测肺癌患者外周血和骨髓中CK19 mRNA表达,对肺癌微转移的分子诊断具有重要的理论意义和临床应用前景。