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用脂质体包裹重组survivin腺病毒治疗肿瘤的实验研究 被引量:2
1
作者 杨亚利 丁振宇 +4 位作者 李秋 周行 邓洪新 田聆 魏于全 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期704-707,共4页
目的本实验拟用脂质体包裹重组survivin腺病毒治疗肿瘤,观察其抗肿瘤效应。方法在BALB/c小鼠建立CT26结肠癌模型,将小鼠随机分成用脂质体包裹重组survivin腺病毒组、重组survivin腺病毒组、用脂质体包裹空病毒组、脂质体组、PBS对照组5... 目的本实验拟用脂质体包裹重组survivin腺病毒治疗肿瘤,观察其抗肿瘤效应。方法在BALB/c小鼠建立CT26结肠癌模型,将小鼠随机分成用脂质体包裹重组survivin腺病毒组、重组survivin腺病毒组、用脂质体包裹空病毒组、脂质体组、PBS对照组5组,观察肿瘤的生长以及小鼠的存活情况和不良反应,并做细胞毒T淋巴细胞(CTL)分析。HE染色观察肿瘤组织及肿大淋巴结的病理改变。结果1用脂质体包裹重组survivin腺病毒对小鼠有免疫保护和治疗作用,小鼠肿瘤生长受到明显抑制,肿瘤大小和存活率与其它组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。2肿瘤病理切片显示用脂质体包裹重组survivin腺病毒组肿瘤组织内有较多的淋巴细胞浸润,有大量的坏死灶。3CTL分析显示用脂质体包裹重组survivin腺病毒组免疫小鼠的T细胞具有较高的CT26细胞杀伤活性,并具有特异性及不依赖NK细胞活性。结论用脂质体包裹重组survivin腺病毒对CT26移植瘤有治疗作用。 展开更多
关键词 SURVIVIN 脂质体 腺病毒 结肠癌
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阳离子脂质体-重组人内皮抑素腺病毒复合物靶向抗肿瘤治疗研究 被引量:1
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作者 王莉 杨莉 +4 位作者 武永康 赵霞 魏于全 李文 田青 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期190-194,共5页
目的探讨阳离子脂质体-重组人内皮抑素腺病毒(lipo+Ad-hEndo)复合物的抗肿瘤效果。方法制备阳离子脂质体(lipo)、重组人内皮抑素腺病毒(Ad-hEndo)及两者复合物,建立BALB/c裸鼠卵巢癌动物肿瘤模型,并将荷瘤裸鼠随机分为6组:生理盐水组l、... 目的探讨阳离子脂质体-重组人内皮抑素腺病毒(lipo+Ad-hEndo)复合物的抗肿瘤效果。方法制备阳离子脂质体(lipo)、重组人内皮抑素腺病毒(Ad-hEndo)及两者复合物,建立BALB/c裸鼠卵巢癌动物肿瘤模型,并将荷瘤裸鼠随机分为6组:生理盐水组l、ipo组l、ipo+腺病毒空载体(Ad-null)组、Ad-hEndol、ip+Ad-hEndo高剂量治疗组和低剂量治疗组。每7 d测量各组荷瘤裸鼠肿瘤体积,49 d后处死各组裸鼠剥取肿瘤称重,并将肿瘤组织进行调亡细胞计数及微血管密度检测。体外试验观察腺病毒中和抗体对阳离子脂质体-腺病毒复合物的作用。结果lip+Ad-hEndo高、低剂量治疗组的瘤重抑制率分别为54.74%,70.65%,与其它各组比较差异有统计学意义(P<0.05);免疫组织化学及TUNEL观察到:两治疗组裸鼠肿瘤组织中,凋亡细胞增多,微血管数减少,与其它组比较差异有统计学意义(P<0.05)。体外中和抗体荧光结果显示:加腺病毒中和抗体的腺病毒感染细胞与未加中和抗体的腺病毒感染细胞比较,前者荧光表达数仅为后者的18.13%;而加腺病毒中和抗体的脂质体-腺病毒组感染细胞与未加中和抗体的脂质体-腺病毒感染细胞比较,前者荧光表达数达后者的70.09%。结论在人卵巢癌动物模型中,lip+Ad-hEndo能有效抑制肿瘤的生长,且低剂量组的抑瘤效果好,阳离子脂质体可以有效地保护腺病毒不被中和抗体作用,仍然维持其感染活性,为重复注射腺病毒制剂而避免被抗体中和降低药效提供理论基础。 展开更多
关键词 重组腺病毒 阳离子脂质体 内皮抑素 卵巢肿瘤
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组蛋白去乙酰化酶抑制剂对HL-60细胞和K562细胞的抗肿瘤作用 被引量:9
3
作者 刘衡 符仁义 +5 位作者 李丰益 朱易萍 王晓阳 毛咏秋 乌学真 周晨艳 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第6期964-968,共5页
为了观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸(VPA)、曲古抑菌素(TSA)对K562细胞和HL60细胞的抗肿瘤作用以及它们同全反式维甲酸(ATRA)之间的协同效应,采用绘制细胞生长曲线,计算半数抑制浓度(IC50)以及集落抑制试验等方法观察VPA,TSA以及全... 为了观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸(VPA)、曲古抑菌素(TSA)对K562细胞和HL60细胞的抗肿瘤作用以及它们同全反式维甲酸(ATRA)之间的协同效应,采用绘制细胞生长曲线,计算半数抑制浓度(IC50)以及集落抑制试验等方法观察VPA,TSA以及全反式维甲酸(ATRA)在不同浓度或不同组合条件下对HL60细胞和K562细胞的增殖抑制作用。采用细胞化学染色、分化抗原检测、细胞周期测定、联合NBT与MTT还原试验计算A(NBT)/A(MTT)值等方法分析细胞的分化或凋亡特点。结果显示,在体外培养体系中,VPA对HL60细胞的IC50值低于对K562细胞的IC50值。ATRA能明显增强VPA、TSA对HL60细胞以及VPA对K562细胞集落形成的抑制。HL60经VPA处理后出现粒系表型,NBT还原率增加,CD11b表达增强,而K562细胞未显示分化迹象。结论:VPA和TSA抑制HL60细胞增殖,VPA诱导HL60细胞向粒系分化,这些作用均能被ATRA增强;VPA和TSA对K562细胞增殖抑制作用较弱,不能诱导K562细胞分化。 展开更多
关键词 组蛋白去乙酰化酶抑制剂 丙戊酸 曲古抑菌素 HL-60细胞 K562细胞
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利用里氏木霉生物转化制备黄姜薯蓣皂甙元的清洁新工艺 被引量:9
4
作者 朱余玲 黄文 +1 位作者 刘葳 倪晋仁 《北京大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第4期661-666,共6页
基于清洁生产和资源综合利用的理念,提出一种从盾叶薯蓣根茎中提取薯蓣皂甙元的新工艺。该工艺由两部分组成,第一部分利用淀粉酶和糖化酶分离黄姜根茎中的淀粉,第二部分利用里氏木霉转化糖渣中的皂苷制备薯蓣皂甙元。研究表明,与直接酸... 基于清洁生产和资源综合利用的理念,提出一种从盾叶薯蓣根茎中提取薯蓣皂甙元的新工艺。该工艺由两部分组成,第一部分利用淀粉酶和糖化酶分离黄姜根茎中的淀粉,第二部分利用里氏木霉转化糖渣中的皂苷制备薯蓣皂甙元。研究表明,与直接酸水解相比,新工艺可以提取约98.7%薯蓣皂甙元,并以还原糖的形式回收98.0%淀粉,降低生产废水中99.4%COD,100%SO24-和100%酸。在酸水解废水中检测到24种有机物,其中邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸-2-乙基己酯属于美国环保局优先控制污染物。而新工艺废水中仅检测到两种有机物(17β-羟基雄甾-5-烯-3-酮和邻苯二甲酸二异丁酯)。本研究为皂素清洁生产提供了一种新方法。 展开更多
关键词 薯蓣皂甙元 皂苷 里氏木霉 黄姜
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小鼠凋亡相关新基因PNAS-4真核表达载体的构建、表达及体外抗肿瘤作用 被引量:3
5
作者 袁铸 严飞 +2 位作者 赵新宇 邓洪新 李炯 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1140-1143,共4页
目的:对小鼠凋亡相关新基因PNAS-4(mPNAS-4)进行克隆,构建其真核表达载体,并在小鼠Lewis肺癌细胞系LL2中转染表达;探讨mPNAS-4基因转染LL2细胞过表达所诱导的体外肿瘤细胞凋亡情况。方法:用RT-PCR从小鼠肝脏组织中克隆mPNAS-4编码区cDNA... 目的:对小鼠凋亡相关新基因PNAS-4(mPNAS-4)进行克隆,构建其真核表达载体,并在小鼠Lewis肺癌细胞系LL2中转染表达;探讨mPNAS-4基因转染LL2细胞过表达所诱导的体外肿瘤细胞凋亡情况。方法:用RT-PCR从小鼠肝脏组织中克隆mPNAS-4编码区cDNA,构建重组真核表达载体pcDNA3.1(+)-mPNAS-4;用脂质体将pcDNA3.1(+)-mPNAS-4转染小鼠Lewis肺癌LL2细胞;用RT-PCR检测转染细胞中mPNAS-4的过表达情况;通过MTT、流式细胞术(FCM)及DNALadder分别检测转染细胞的增殖与凋亡情况。结果:从小鼠肝脏组织中克隆到mPNAS-4全长cDNA并成功构建其真核表达载体pcDNA3.1(+)-mPNAS-4,转染小鼠Lewis肺癌LL2细胞可使其mRNA表达明显上调。mPNAS-4过表达能抑制LL2细胞增殖并诱导其凋亡。结论:mPNAS-4过表达对小鼠Lewis肺癌LL2细胞的生长有明显的抑制和诱导凋亡作用。 展开更多
关键词 PNAS-4 基因转染 真核表达 凋亡
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一种可生物降解温度敏感型聚乙二醇-聚己内酯-聚乙二醇水凝胶的合成和表征 被引量:3
6
作者 巩长旸 顾迎春 +6 位作者 谢震 谢希惠 刘彩兵 阚兵 涂铭旌 魏于全 钱志勇 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第5期1121-1125,共5页
合成了一系列分子量较低的聚乙二醇-聚己内酯-聚乙二醇(Poly(ethylene glycol)-Polycaprolactone-Poly(ethylene glycol),PEG-PCL-PEG)三嵌段共聚物。分别采用FTIR和1H-NMR对其结构进行了表征。所合成的PEG-PCL-PEG共聚物具有良好的水溶... 合成了一系列分子量较低的聚乙二醇-聚己内酯-聚乙二醇(Poly(ethylene glycol)-Polycaprolactone-Poly(ethylene glycol),PEG-PCL-PEG)三嵌段共聚物。分别采用FTIR和1H-NMR对其结构进行了表征。所合成的PEG-PCL-PEG共聚物具有良好的水溶性,当水溶液浓度高于临界凝胶浓度(Critical gel concentration,CGC)时,随着温度的变化聚合物水溶液会呈现特有的凝胶-溶胶转变。研究了共聚物亲水疏水链段的比例和长度,以及热历史等对凝胶-溶胶转变行为的影响。通过调节上述条件,可以在一定程度上拓宽凝胶-溶胶转变温度范围,有助于PEG-PCL-PEG水凝胶在可注射药物控制释放系统等方面的应用。 展开更多
关键词 聚己内酯-聚乙二醇共聚物 可生物降解 温度敏感 水凝胶
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复合微生物发酵法从黄姜中提取皂素研究 被引量:6
7
作者 朱余玲 黄文 +1 位作者 刘葳 倪晋仁 《南水北调与水利科技》 CAS CSCD 2009年第6期442-446,共5页
通过菌种复配研究了从黄姜中提取皂素的一种环境友好的生物方法。首先从生长黄姜的土壤和常见霉菌中筛选并驯化出三株菌,一株产纤维素酶活力较高的T.reesei,一株产β-糖苷酶活力较高的A.niger和一株产木聚糖酶活力较高的A.oryzae。其次... 通过菌种复配研究了从黄姜中提取皂素的一种环境友好的生物方法。首先从生长黄姜的土壤和常见霉菌中筛选并驯化出三株菌,一株产纤维素酶活力较高的T.reesei,一株产β-糖苷酶活力较高的A.niger和一株产木聚糖酶活力较高的A.oryzae。其次研究了这三株菌四种复配模式发酵体系中酶活力和皂素得率的变化。与纯种发酵相比,A.niger与T.reesei复合发酵对提高体系中酶活和皂素得率有协同促进作用。最后在此基础上,进一步优化了这两株菌的发酵顺序。当T.reesei发酵第3d时投加A.niger继续发酵6d,皂素得率最高,可达到78.25%。 展开更多
关键词 黄姜 复合 皂素 A.niger A.oryzae T.reesei
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AS-mCLB1重组质粒体外抗肿瘤及化疗增敏作用 被引量:3
8
作者 张伶 魏于全 +4 位作者 宋英 蒋磊 陈平 陈县城 李继承 《细胞生物学杂志》 CSCD 2007年第4期539-544,共6页
研究反义全长小鼠细胞周期蛋白B1重组质粒(pAS-mCLB1)体外抗肿瘤及化疗增敏作用。扩增后少量抽提并纯化pAS-mCLB1,通过脂质体将其转染入小鼠露易丝肺癌(LL/2)细胞,RT-PCR和Western印迹测定细胞内细胞周期蛋白B1的表达,观察转染后细胞形... 研究反义全长小鼠细胞周期蛋白B1重组质粒(pAS-mCLB1)体外抗肿瘤及化疗增敏作用。扩增后少量抽提并纯化pAS-mCLB1,通过脂质体将其转染入小鼠露易丝肺癌(LL/2)细胞,RT-PCR和Western印迹测定细胞内细胞周期蛋白B1的表达,观察转染后细胞形态变化,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡。细胞转染48h后,用化疗药物健择(gemcitabine;0.2μmol/L)处理24h,MTT法测定健择对细胞的杀伤作用。研究提示pAS-mCLB1转染后LL/2细胞形态明显异常,细胞内细胞周期蛋白B1表达显著下调,细胞周期阻滞于G1期,增殖受抑,凋亡增加;健择对pAS-mCLB1转染后LL/2细胞的杀伤作用显著增强。重组质粒pAS-mCLB1体外具有明显的抗肿瘤作用,并能增强肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,估计上述作用与其下调肿瘤细胞内细胞周期蛋白B1表达,从而诱导细胞周期阻滞及凋亡等作用相关。 展开更多
关键词 反义全长cDNA 细胞周期蛋白B1 细胞周期阻滞 凋亡 化疗敏感性
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TACE联合PELI治疗不可切除肝癌疗效及安全性分析 被引量:2
9
作者 邹庆 官泳松 +2 位作者 贺庆 王明全 刘源 《西部医学》 2010年第4期667-670,共4页
目的探讨联合使用经导管内肝动脉化疗栓塞(Trans-catheter hepatic arterial chemoembolization,TACE)与经皮乙醇碘化油注射(Percutaneous Ethanol-Lipiodol Injection,PELI)治疗不可切除肝细胞癌的临床疗效和安全性。方法122例(男109例... 目的探讨联合使用经导管内肝动脉化疗栓塞(Trans-catheter hepatic arterial chemoembolization,TACE)与经皮乙醇碘化油注射(Percutaneous Ethanol-Lipiodol Injection,PELI)治疗不可切除肝细胞癌的临床疗效和安全性。方法122例(男109例,女13例,平均年龄52岁)不可切除肝细胞癌患者纳入此项非随机对照研究。54例接受TACE联合PELI(实验组)治疗,余下的68例接受单纯TACE(对照组)治疗,并随访12个月。分析两组的临床治疗反应、生存率、无进展生存期及毒副作用的差异性。结果实验组Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ期治疗的临床反应明显高于对照组(84.6%、78.6%、59.3%与66.7%、45.8%、31.0%),患者累计生存率和无进展生存期均较对照组延长(P<0.05)。亚组分析中,II期患者在联合治疗中明显获益,其累计生存率和无进展生存期较对照组明显延长(P=0.025或P=0.001)。结论TACE联合PELI可以提高不可切除肝癌患者的临床治疗反应和远期疗效,是一种安全有效的治疗方法。 展开更多
关键词 经导管内肝动脉化疗栓塞 经皮的无水乙醇碘化油注射 不可切除肝癌
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小鼠肿瘤/睾丸抗原Biot2的原核表达载体的构建及表达 被引量:1
10
作者 王春婷 张鹏 +1 位作者 彭枫 杨寒朔 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期406-408,共3页
目的构建小鼠睾丸特异表达基因Biot2的原核表达载体,表达pQE30-Biot2融合蛋白。方法提取小鼠睾丸组织总RNA,经RT-PCR扩增Biot2基因片段,并将其克隆入原核表达载体pQE30中,构建重组质粒pQE30-Biot2。经限制性内切酶BamHI、HindIII双酶切... 目的构建小鼠睾丸特异表达基因Biot2的原核表达载体,表达pQE30-Biot2融合蛋白。方法提取小鼠睾丸组织总RNA,经RT-PCR扩增Biot2基因片段,并将其克隆入原核表达载体pQE30中,构建重组质粒pQE30-Biot2。经限制性内切酶BamHI、HindIII双酶切鉴定及序列测定后,转化E.coliXL-Blue,经IPTG诱导表达组氨酸融合蛋白,对表达产物进行SDS-PAGE电泳分析和Western blot检测。结果构建pQE30-Biot2重组原核表达质粒,表达的融合蛋白经SDS-PAGE分析,在相对分子质量(Mr)约17700处出现了1条蛋白条带,该表达蛋白具有与His-tag单克隆抗体(mAb)特异性的结合能力。结论成功地构建了Biot2基因的原核表达载体,并表达出pQE30-Biot2重组蛋白,为下一步制备多克隆抗体和蛋白功能的深入研究奠定了实验基础。 展开更多
关键词 睾丸 组织特异表达 重组融合蛋白/表达
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小鼠肿瘤/睾丸抗原Biot2对NIH3T3细胞增殖的影响
11
作者 王春婷 张鹏 +2 位作者 彭枫 阮绪芝 杨寒朔 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期704-706,共3页
目的:研究新发现的小鼠肿瘤/睾丸抗原Biot2对小鼠NIH3T3细胞生物学行为的影响,探讨基因的生物学功能。方法:构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-Biot2,由脂质体包裹稳定转染NIH3T3细胞,用Realtime RT-PCR、Western blot等方法筛选和鉴定Biot2... 目的:研究新发现的小鼠肿瘤/睾丸抗原Biot2对小鼠NIH3T3细胞生物学行为的影响,探讨基因的生物学功能。方法:构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-Biot2,由脂质体包裹稳定转染NIH3T3细胞,用Realtime RT-PCR、Western blot等方法筛选和鉴定Biot2表达阳性细胞克隆,研究其与细胞增殖相关的生物学特征的变化。结果:成功构建真核表达重组质粒pcDNA3.1(+)-Biot2,并稳定转染于NIH3T3细胞。与对照组相比,转染了Biot2cDNA的NIH3T3细胞生长速率明显增快。结论:成功地建立稳定转染小鼠新基因Biot2的NIH3T3细胞克隆;Biot2基因能影响细胞增殖的调节,促进NIH3T3细胞的增殖,为进一步研究基因生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 睾丸 组织特异表达 增殖 Biot2
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OX-M-AdmCLB1重组腺病毒制备及其诱导的体内抗肿瘤效应
12
作者 张伶 魏于全 +1 位作者 蒋磊 李继承 《细胞生物学杂志》 CSCD 2006年第6期855-860,共6页
构建小鼠细胞周期蛋白B1(mcyclinB1)重组腺病毒(AdmCLB1),将氧化型甘露聚糖(OX-M)与AdmCLB1偶联,制备OX-M-AdmCLB1,研究OX-M-AdmCLB1诱导的抗肿瘤效应。利用AdEasy系统构建携带靶基因小鼠细胞周期蛋白B1的复制缺陷型重组腺病毒AdmCLB1,... 构建小鼠细胞周期蛋白B1(mcyclinB1)重组腺病毒(AdmCLB1),将氧化型甘露聚糖(OX-M)与AdmCLB1偶联,制备OX-M-AdmCLB1,研究OX-M-AdmCLB1诱导的抗肿瘤效应。利用AdEasy系统构建携带靶基因小鼠细胞周期蛋白B1的复制缺陷型重组腺病毒AdmCLB1,抽提AdmCLB1基因组DNA,进行PCR扩增。重组病毒经扩增、纯化后与OX-M混合,制备OX-M-AdmCLB1;OX-M-AdmCLB1体外感染小鼠树突状细胞(DC),RT-PCR扩增分析靶基因表达;OX-M-AdmCLB1处理BALB/C小鼠,处理后再荷瘤,观察小鼠肿瘤生长及生存情况。重组病毒AdmCLB1终滴度为2.1×1011pfu/ml;DC内靶基因的表达量在OX-M-AdmCLB1组较AdmCLB1组高;体内研究提示OX-M-AdmCLB1可明显抑制CT26肿瘤增殖(抑瘤率44%)、延长动物生存期(P<0.01)。实验制备的新型重组腺病毒OX-M-AdmCLB1体内能够诱导明显的抗肿瘤效应,估计此效应的产生与DC特异识别OX-M-AdmCLB1,进而激活机体抗肿瘤免疫有关。 展开更多
关键词 细胞周期蛋白B1 氧化型甘露聚糖 重组腺病毒 肿瘤 树突状细胞
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弥漫大B细胞淋巴瘤患者血清β_2-MG、VEGF、bFGF、IL-6水平与国际预后指数的关系 被引量:5
13
作者 季冬梅 洪小南 +3 位作者 曹军宁 陆洪芬 李秋 吴向华 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期402-405,共4页
目的:探讨弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)患者血清血管内皮生长因子(vascular endo-thelial growth factor,VEGF)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)... 目的:探讨弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)患者血清血管内皮生长因子(vascular endo-thelial growth factor,VEGF)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、β2微球蛋白(β2-microglobin,β2-MG)水平与国际预后指数(international prognostic index,IPI)之间的关系。方法:33例初治DLBCL患者按IPI评分分成低危组(IPI<2)和中高危组(IPI≥2),采用ELISA方法检测患者外周血血清中的VEGF、IL-6、bFGF水平,应用放射免疫分析法检测血清β2-MG水平。结果:高危组血清β2-MG、VEGF、bFGF、IL-6水平均较低危组明显升高。结论:血清β2-MG、VEGF、bFGF、IL-6水平可以和IPI一起用于DLBCL患者预后判断,为患者的个体化治疗以及设计新的临床试验提供依据。 展开更多
关键词 淋巴瘤 非霍奇金 细胞因子类 国际预后指数
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和厚朴酚对人宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量:6
14
作者 杨光丽 侯文礼 +3 位作者 付阿富 钟振华 尹秀华 陈俐娟 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期558-562,共5页
目的探讨和厚朴酚抑制人宫颈癌Hela细胞增殖及诱导其凋亡的作用。方法利用MTT检测和厚朴酚在不同浓度和时间下对Hela细胞增殖的影响;用流式细胞术、Hoechst 33258荧光染色和DNA ladder检测和厚朴酚作用下Hela细胞的凋亡。结果MTT结果显... 目的探讨和厚朴酚抑制人宫颈癌Hela细胞增殖及诱导其凋亡的作用。方法利用MTT检测和厚朴酚在不同浓度和时间下对Hela细胞增殖的影响;用流式细胞术、Hoechst 33258荧光染色和DNA ladder检测和厚朴酚作用下Hela细胞的凋亡。结果MTT结果显示和厚朴酚可明显抑制Hela细胞的增殖,且抑制率存在剂量和时间依赖性;流式结果表明10μg/mL和20μg/mL和厚朴酚作用细胞24h后,凋亡细胞的比例分别为22.5%和62.2%,而对照组为8.7%;和厚朴酚处理过的Hela细胞,经Hoechst33258染色后细胞、细胞核出现明显的凋亡形态学变化,在DNA琼脂糖凝胶上可见特征性的梯状条带。结论和厚朴酚具有抑制Hela细胞增殖和诱导凋亡的作用。 展开更多
关键词 和厚朴酚 HELA细胞 凋亡
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反义Cyclin B1提高Lewis肺癌细胞对健择化学敏感性的体内外研究 被引量:2
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作者 张伶 田聆 +5 位作者 陈平 张汝 李刚 侯建梅 姚兵 魏于全 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期464-467,474,共5页
目的研究CyclinB1反义全长cDNA(AS-CLB1)对小鼠Lewis肺癌细胞(LL/2)化疗敏感性的影响,为将该方法联合健择化疗用于非小细胞肺癌的治疗提供实验依据。方法通过流式细胞术检测LL/2亲本(LP),LL/2空载体(LV)及LL/2/AS-CLB1(LA)细胞的凋亡及... 目的研究CyclinB1反义全长cDNA(AS-CLB1)对小鼠Lewis肺癌细胞(LL/2)化疗敏感性的影响,为将该方法联合健择化疗用于非小细胞肺癌的治疗提供实验依据。方法通过流式细胞术检测LL/2亲本(LP),LL/2空载体(LV)及LL/2/AS-CLB1(LA)细胞的凋亡及细胞周期分布。用健择(20nmol/L~20μmol/L)处理上述三种细胞,分别于1h及24h后用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法评估健择对各组细胞的体外杀伤作用。将上述三种细胞分别接种C57BL/6小鼠,成瘤后用健择〔25~125mg/(kg·d)〕处理各组动物,3d1次,一共4次,观察细胞在体内的成瘤性及动物的生存时间,并用流式细胞仪检测各组动物肿瘤组织的细胞凋亡。结果LA细胞较对照(LP和LV细胞)出现了明显的G1期阻滞及凋亡;健择对LA细胞的体外杀伤作用显著增强;在LA细胞组,细胞的成瘤性明显下降,该组动物肿瘤组织的细胞凋亡明显增加,动物的生存时间也显著延长。结论AS-CLB1可以明显增强LL/2细胞体内外对健择的化学敏感性,其作用可能与AS-CLB1诱导细胞发生G1期阻滞及凋亡,从而增强了健择的抗肿瘤作用有关。 展开更多
关键词 化学敏感性 反义CDNA 细胞周期蛋白B1 健择 LEWIS肺癌细胞
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人急性胰腺炎早期外周血单核细胞Toll样受体4表达变化 被引量:5
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作者 李红光 周总光 +5 位作者 雷松 朱林 郑雪莲 张鸿彦 王永 张建成 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2006年第2期197-200,共4页
目的探讨人急性胰腺炎早期外周血单核细胞(peripheral blood monocytes,PBMCs)表面Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)表达变化。方法发病24 h内入院的早期急性胰腺炎患者30例,采集入院当天及第3、7 d外周血及20名正常志愿者外周血... 目的探讨人急性胰腺炎早期外周血单核细胞(peripheral blood monocytes,PBMCs)表面Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)表达变化。方法发病24 h内入院的早期急性胰腺炎患者30例,采集入院当天及第3、7 d外周血及20名正常志愿者外周血,分离单核细胞。用流式细胞仪检测单核细胞表面TLR4、CD14表达变化情况。同时检测血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)等指标,研究它们之间的相关性。结果急性胰腺炎患者PBMCs表面TLR4发病后表达上调,1周左右恢复正常。TNF-α的变化与TLR4变化一致。结论人急性胰腺炎早期可能通过先天性免疫门户蛋白TLR4激活单核巨噬细胞系统导致TNF-α等促炎细胞因子的产生和释放。 展开更多
关键词 急性胰腺炎 硫酸乙酰肝素Toll样受体4 先天免疫
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小鼠编码锌指蛋白基因zfp637的初步研究 被引量:1
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作者 任婧婧 张洁 +7 位作者 刘凯 王修杰 杨洪亮 王琪 熊竹娟 吴亚英 高艳萍 林苹 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期547-550,共4页
目的观察zfp637基因对肿瘤细胞生长增殖的影响。方法半定量RT-PCR检测zfp637基因在小鼠正常组织与肿瘤细胞株中的表达。设计并合成4对小分子双链RNA,半定量RT-PCR筛选最佳干扰效应位点。将siRNA转染EMT6细胞,转染后144d进行细胞增殖... 目的观察zfp637基因对肿瘤细胞生长增殖的影响。方法半定量RT-PCR检测zfp637基因在小鼠正常组织与肿瘤细胞株中的表达。设计并合成4对小分子双链RNA,半定量RT-PCR筛选最佳干扰效应位点。将siRNA转染EMT6细胞,转染后144d进行细胞增殖实验。结果zfp637在多数正常组织呈低到中度表达,外周血单个核细胞未见表达。在小鼠肝癌H22,小鼠肝癌细胞Hepal-6,Lewis肺癌LL/2,黑色素瘤细胞B16,淋巴瘤细胞Yac-1和乳腺癌细胞EMT6中均呈现高表达。筛选后表明siRNA-881为最佳干扰效应位点。细胞增殖实验(MTT)显示:转染siRNA后第4d,实验组EMT6细胞增殖明显低于阴性对照组,143d实验组细胞增殖与阴性组相差不明显。结论zfp637基因在不同正常组织和肿瘤细胞株中表达水平不同。zfP637很可能是促进细胞增殖的正调控因素。下调该基因表达能抑制EMT6肿瘤细胞增殖。 展开更多
关键词 锌指蛋白637 肿瘤细胞 化学合成小分子干扰 细胞增殖
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丙戊酸诱导耐药白血病细胞凋亡及其机理的研究 被引量:1
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作者 刘衡 符仁义 +4 位作者 廖清奎 李丰益 朱易萍 高举 毛咏秋 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期133-137,共5页
目的观察丙戊酸(VPA)对白血病细胞尤其是耐药白血病细胞的体外抗肿瘤作用,探讨细胞内谷胱甘肽(GSH)水平及抗氧化酶系活性与VPA诱导细胞凋亡之间的关系。方法采用体外细胞培养,通过MTT细胞活力测定、Caspase-3,8,9活性检测、细胞形态学... 目的观察丙戊酸(VPA)对白血病细胞尤其是耐药白血病细胞的体外抗肿瘤作用,探讨细胞内谷胱甘肽(GSH)水平及抗氧化酶系活性与VPA诱导细胞凋亡之间的关系。方法采用体外细胞培养,通过MTT细胞活力测定、Caspase-3,8,9活性检测、细胞形态学观察、细胞周期分析及Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡,观察VPA对白血病细胞的抗肿瘤作用;通过检测VPA作用前后细胞内总谷胱甘肽(tGSH)与GSH水平、谷胱甘肽还原酶(GSH-Rd)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性改变,以及GSH合成酶抑制剂丁胱亚磺酰亚胺(BSO)、GSH前体N-乙酰-半胱氨酸(NAC)和过氧化氢酶(CAT)对VPA诱导凋亡的影响,分析谷胱甘肽-氧化还原(GSH-redox)系统在VPA诱导细胞凋亡中的作用。结果VPA对所有受试细胞株均有增殖抑制作用,其IC50接近VPA抗癫痫有效血药浓度,VPA作用后细胞内Caspase-3,8,9活性增强,细胞出现凋亡形态学改变。VPA可使阿霉素耐药株K562/AO2及糖皮质激素(GC)耐药株Jurkat细胞周期阻滞于G0/G1期,在VPA作用下,Jurkat和K562/AO2细胞内tGSH和GSH均降低,以GSH降低为主,GSH-Rd和GSH-Px的活性亦显著降低。NAC和CAT减弱VPA诱导的凋亡,而BSO增强VPA诱导的凋亡。结论VPA抑制耐药白血病细胞增殖、诱导细胞周期阻滞与凋亡,这些作用与细胞内GSH-Rd、GSH-Px活性降低、GSH水平下调所导致的细胞内氧化应激反应激活有关。 展开更多
关键词 丙戊酸 耐药 谷胱甘肽 谷胱甘肽还原酶 谷胱甘肽过氧化物酶
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杜仲叶中绿原酸的提取条件优化及其提取物的降血脂作用 被引量:18
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作者 左航 黄文 +2 位作者 李天宏 龚国华 魏蒙 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第1期158-160,共3页
A protocol for extracting chlorogenic acid from Eucommia ulmoides leaf was optimized by orthogonal test on the base of noticeable factors test.The preventing effect of extract of Eucommia ulmoides leaf on mice suffere... A protocol for extracting chlorogenic acid from Eucommia ulmoides leaf was optimized by orthogonal test on the base of noticeable factors test.The preventing effect of extract of Eucommia ulmoides leaf on mice suffered from high lipid serum was evaluated.High lipid serum was induced by gavaging fat emulsion to mice everyday.The TC,TG,LDL-C and HDL-C level in the serum of different animal groups were monitored.The result showed that the optimum process was to extract the chlorogenicacid at 90 ℃ with 70% ethanol for 2 h,with solid-liquid ratio 1∶16,and the extract rate was able to reach to 4%.The extract was efficient in defending high lipid serum. 展开更多
关键词 杜仲叶 绿原酸 工艺优化 调节血脂
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阳离子脂质体包裹bFGF作为免疫佐剂的制备工艺研究
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作者 钟振华 毛双林 +4 位作者 杨莉 杨光丽 侯文礼 陈翔 陈俐娟 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期839-841,846,共4页
目的考察阳离子脂质体包裹碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的制备工艺以及在小鼠体内的免疫效应。方法通过优化如脂质配方、药脂比、挤压次数、冻融次数以及孵化温度等各个工艺参数在保持bFGF高活性的前提下来提高bFGF的包封率。分别用bFG... 目的考察阳离子脂质体包裹碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的制备工艺以及在小鼠体内的免疫效应。方法通过优化如脂质配方、药脂比、挤压次数、冻融次数以及孵化温度等各个工艺参数在保持bFGF高活性的前提下来提高bFGF的包封率。分别用bFGF阳离子脂质体、bFGF弗氏佐剂以及PBS分3组免疫4周龄Balb/c小鼠,连续免疫4次,ELISA测定各组小鼠血清的抗体滴度。结果优化得到脂质体配方为二油酰磷脂酰乙醇胺(DOPE)∶1,2-二油酰-3-三甲铵基丙烷(DOTAP)=2∶1;药脂比为7.5%;液氮速冻,4℃孵化60min,反复冻融6次;过膜挤压10次。通过工艺的改进,bFGF在脂质体中的包封率得到显著提高,达到50%。免疫实验中通过与弗氏佐剂免疫效果比较,阳离子脂质体作为佐剂产生的bFGF的抗体滴度为1∶3200,免疫效果比较令人满意。结论免疫实验中发现阳离子脂质体作为免疫佐剂,具有很好的佐剂效应。 展开更多
关键词 碱性成纤维细胞生长因子 免疫佐剂 阳离子脂质体 制备工艺
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