转基因骨髓间充质干细胞在异基因干细胞移植动物模型中的实验研究

目的 (1)建立有效而规范的H-2小鼠异基因骨髓移植动物模型;(2)观察转染腺病毒γ-干扰素(IFN-γ)基因的MSCs在动物模型中对小鼠移植物抗宿主病(GVHD)以及小鼠移植后生存率的影响。方法利用H-2db 小鼠和H-2dd

恶性淋巴瘤1126例临床特点分析

目的 分析恶性淋巴瘤患者住院的临床特点.方法 从该院病案数据库提取2005年1月至2009年12月住院恶性淋巴瘤患者的资料,剔除未能明确病理分型及重复入院的病例,从年龄、性别、病理类型、肿瘤起病部位及分期等方面进行分析、总结.结果 住院的恶性淋巴瘤患者1126例,男女比例为1.94：1.霍奇金淋巴瘤（HL）患者年龄集中在20～40岁,以混合细胞型（64.16%）、结节硬化型（29.48%）为主.非霍奇金淋巴瘤（NHL）患者年龄以50～70岁为多,发病率位于前10位的为弥漫大B细胞淋巴瘤（53.31%）、结外NK/T细胞淋巴瘤（7.35%）、套细胞淋巴瘤（6.40%）、B细胞慢性淋巴细胞白血病/小淋巴细胞淋巴瘤（4.30%）、间变性大细胞淋巴瘤（4.09%）、前T细胞淋巴母细胞白血病/淋巴瘤（3.88%）、外周T细胞淋巴瘤（非特指）（3.46%）、血管免疫母细胞型淋巴瘤（3.04%）、滤泡性淋巴瘤（2.94%）、伯基特淋巴瘤（2.52%）.两者起病部位均以颈部淋巴结常见.结论 HL和NHL发病存在性别、年龄、病理类型、起病部位等差异.

丹参酮ⅡA对白血病细胞株K562增殖抑制及机制研究

目的探讨丹参酮ⅡA（TAT）对人白血病细胞株K562的生长抑制作用及其可能机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测TAT（终浓度1、10、15、30、50μmol／L）对K562细胞的增殖抑制作用，光学显微镜观察TAT（30μmol／L）作用24h后K562细胞的形态变化，流式细胞术检测细胞凋亡率，Westernblot法检测凋亡蛋白BCL-2、BAX的表达和蛋白激酶AKT／mTOR信号通路的变化。结果终浓度为10～50μmol／L的TAT对K562细胞的生长具有抑制作用，与对照组比较差异具有统计学意义（P〈0．05），TAT作用K562细胞96h的半数抑制浓度（IC50）值为（7．75±2．47）μmol／L。30μmol／LTAT作用K562细胞24h后显微镜下显示细胞破坏明显，部分细胞裂解成碎片。流式细胞仪检测发现30μmol／L TAT作用组凋亡细胞明显增多（P〈0．05）。Western blot结果提示，30μmol／LTAT作用K562细胞后AKT、mTOR、p70S6K、4-EBP1等信号通路关键点蛋白磷酸化表达水平减低，凋亡抑制蛋白BCL-2下调，而促凋亡蛋白BAX上调。结论TAT通过抑制AKT／m—TOR信号通路，下调BCL-2和上调BAx的表达，促进细胞凋亡，抑制白血病细胞株K562的生长。

SCL／TAL-1基因沉默对EPO诱导的K562细胞红系分化的影响

目的通过RNA干扰技术降低SCL／TAL-1mRNA的表达，探讨SCL／TAL-1在K562细胞红系分化中的作用。方法以EPO诱导白血病细胞系K562细胞向红系分化为模型，将靶向SCL／TAL-1基因的特异性短发夹RNA（shRNA）慢病毒质粒pTRIP—dU3-RNAiTALh—EF1a—GFP转染K562细胞，RT—PCR检测其SCL／TAL—l和红系相关基因RhD、血型糖蛋白A（GPA，即CD253a）、CD47mRNA表达水平变化，流式细胞术分析红系分化抗原CD71、CD253a的表达，并以空载体质粒pTRIP—dU3-RNAi—luc—EF1-GFP转染的K652细胞为对照。结果①通过慢病毒转染系统将含SCL／TAL．1shRNA的质粒及空载体质粒转染K562细胞48h，绿色荧光蛋白（GFP）＋细胞占总细胞的95％以上，表明感染率达到95％以上。②RT—PCR结果显示转染特异性shRNA的K562细胞SCL／TAL-1mRNA表达水平比空载体对照明显下调（P〈0．05），红系抗原CIM7和RhDmRNA水平也比对照组明显下调（P〈0．05），GPA有所下降，但没有CIM7和RhD下降程度大。③流式细胞术检测到SCL／TAL-1低表达组红系分化抗原CD71、CD235a表达降低，表达率分别是10．4％、76．5％，而在对照组的表达率分别为94．3％、83．6％。结论研究结果提示转录因子SCL／TAL．1参与了红系定向分化。

多药耐药基因MDR1在Ph(+)急性淋巴细胞白血病伊马替尼耐药细胞株SUP-B15/RI耐药形成中的作用

目的研究多药耐药基因MDR1在Ph(+)急性淋巴细胞白血病〔Ph(+)ALL〕伊马替尼(IM)耐药细胞株SUP-B15/RI耐药机制中的作用。方法 RT-PCR技术检测敏感细胞株SUP-B15和IM耐药细胞株SUP-B15/RI MDR1mRNA表达,改良MTT法测定IM、柔红霉素(DNR)、长春新碱(VCR)、依托泊甙(VP-16)单药及联合维拉帕米作用于SUP-B15细胞和SUP-B15/RI细胞72h后增殖活性的改变,计算抑制率为50%时的药物浓度(IC50),DNR药物外排实验检测MDR1表达产物P-gp功能。结果 MDR1基因在SUP-B15/RI中的表达是敏感细胞SUP-B15的(2.02±0.04)倍(P<0.05)。IM、DNR、VCR、VP-16单药作用于SUP-B15/RI细胞的IC50值较SUP-B15细胞增高(P<0.05),相对耐药倍数(RF)分别为(20.52±2.34)、(10.33±1.88)、(9.78±1.27)、(3.84±0.69)倍。IM、DNR、VCR、VP-16与维拉帕米联合作用于SUP-B15/RI细胞后IC50值较单药时降低(P<0.05),耐药逆转倍数分别为(1.44±0.43)、(3.20±0.17)、(1.44±0.12)、(1.33±0.14)。P-gp蛋白功能在SUP-B15/RI细胞强于SUP-B15细胞,DNR泵出率分别为10.27%、3.43%。结论 MDR1基因在SUP-B15/RI细胞中表达增加,其表达产物P-gp功能增强,P-gp抑制剂维拉帕米可以部分逆转IM耐药。说明MDR1参与SUP-B15/RI细胞IM耐药机制的形成。

柔红霉素联合雷帕霉素对急性白血病原代细胞增殖作用的影响

雷帕霉素（Rapamycin，RPM）是一类从吸水性链霉菌中分离的大环内酯类抗生素，是哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）的特异性抑制剂，因其强效的免疫抑制和抗细胞增殖活性已广泛用于器官移植后急性排异反应的防治。