同种异体皮质骨板移植免疫学研究

目的: 探讨实验动物和患者接受不同方法处理的同种异体皮质骨板移植后宿主免疫学反应。方法: 48只山羊接受分别经过 -70℃深低温冷冻 4周、 -70℃深低温冷冻 4周 +48℃环氧乙烷灭菌、-70℃深低温冷冻 4周+25kGyγ射线辐照处理的同种异体皮质骨板移植,对照组移植异体山羊新鲜皮质骨板。7例髋关节置换术后股骨假体周围骨折患者, 接受深低温冷冻和环氧乙烷处理同种异体皮质骨板移植重建股骨骨折。检测实验动物外周血CD4+、CD8+以及患者外周血T淋巴细胞亚群、抗体、补体和循环免疫复合物。结果: 新鲜骨板移植组CD4+明显升高, 术后 6周达到顶峰。除深低温组术后 6周CD4+升高外, 深低温冷冻、深低温冷冻 +环氧乙烷及深低温冷冻 +γ射线辐照组T淋巴细胞亚群无明显改变。患者T淋巴细胞亚群、抗体和免疫复合物正常, 切口无感染。结论: 新鲜同种异体皮质骨板具有抗原性, 移植后诱发宿主免疫排斥反应; 深低温冷冻、深冻+环氧乙烷和深冻 +γ射线辐照处理同种异体皮质骨板移植受体无明显免疫排斥反应。

墨汁血管灌注和四环素荧光标记评价异体移植骨板活化状态

目的 探讨采用血管墨汁灌注和四环素荧光标记评价异体移植骨板活化状态的可行性。方法12只山羊右侧股骨移植深低温冷冻同种异体皮质骨板,分别在术后3、6、12、24周处死动物取材,通过血清骨钙素检测,大体观察、X线照片、移植骨板组织学检查、血管墨汁灌注和四环素荧光标记,对移植骨板再血管化以及成骨活性进行评价。结果术后3周血清骨钙素开始升高,12周达到最高水平,与术前比较,血清骨钙素差别有极显著性统计学意义(P<0.01)。术后3、6、12、24周移植骨板墨汁灌注血管面积比率和四环素荧光标记积分光密度值(IOD)升高,与术前比较,血管面积比率和四环素荧光标记积分光密度值差别有极显著性统计学意义(P<0.01),术后12周血管面积比率和四环素荧光标记累积光密度值达到顶峰,与术后3、6、24周比较(P<0.01)。结论深低温冷冻同种异体皮质骨板移植具有较强生物学活性,术后12周移植骨板完全再血管化,24周完成爬行替代和塑形改建。血管墨汁灌注和四环素荧光标记是判定移植骨板活化状态较好的方法之一。

环氧乙烷处理同种异体皮质骨板移植组织学研究

目的 研究环氧乙烷处理同种异体皮质骨板移植组织学表现。方法 分别移植经过零下70℃深低温冷冻4周、零下70℃深低温冷冻4周+48℃环氧乙烷灭菌处理的山羊同种异体皮质骨板,对移植骨板以及周围软组织进行组织学检查。结果 术后3～6周深低温冷冻组移植骨板周围软组织少量炎性细胞浸润,环氧乙烷+深低温冷冻组移植骨板周围软组织较多炎性细胞浸润,但炎细胞浸润评分差别无统计学意义(P>0.05);术后6～24周两组移植骨板周围软组织炎性细胞浸润进一步减轻。深低温冷冻组和环氧乙烷+深低温冷冻组术后3周部分移植骨板原哈佛式管扩大,其内有少量间充质组织和新生血管;6周间充质细胞分化为破骨细胞和成骨细胞,破骨细胞使移植骨板哈佛式管进一步扩大以及出现骨吸收隙窝,在哈佛式管和骨吸收隙窝边缘出现成骨细胞贴附和新骨形成;12周移植骨板骨吸收隙窝缩小,成骨细胞和新骨形成增多,部分新骨改建形成板层骨:24周移植骨板基本完成吸收替代和改建塑形。两组移植骨板内无炎细胞浸润,组织学表现相似。结论 环氧乙烷灭菌同种异体皮质骨板移植周围软组织出现炎细胞浸润,不影响移植骨板爬行替代和内部改建塑形。