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Pp2cm基因沉默对小鼠巨噬细胞通过TLR通路抵抗金黄色葡萄球菌感染的影响
1
作者
罗凯腾
谢茂迪
+2 位作者
杨为
李涛
姜春玲
《四川大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期941-946,共6页
目的探究蛋白磷酸酶2Cm(protein phosphatase 2Cm,PP2Cm)的基因Pp2cm沉默对感染金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)后巨噬细胞炎症因子表达的影响及作用机制。方法通过腺病毒(adenovirus,Ad)转染Raw264.7小鼠巨噬细胞系分...
目的探究蛋白磷酸酶2Cm(protein phosphatase 2Cm,PP2Cm)的基因Pp2cm沉默对感染金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)后巨噬细胞炎症因子表达的影响及作用机制。方法通过腺病毒(adenovirus,Ad)转染Raw264.7小鼠巨噬细胞系分析了Pp2cm基因敲低对巨噬细胞炎症因子、细胞增殖凋亡和Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)信号通路的影响。细胞处理分为4组,包括Ad-Ctrl组、Ad-Pp2cm组、Ad-Ctrl+S.aureus组和Ad-Pp2cm+S.aureus组。分别在细胞中加入对照腺病毒(Ad-Ctrl)或针对Pp2cm基因的腺病毒(Ad-Pp2cm),使用或不使用金黄色葡萄球菌进行炎症诱导。实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin 1 beta,IL-1β)、TLR2、TLR4、Toll样受体衔接蛋白(Tolllike receptor adaptor protein,Tirap)和髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,Myd88)基因表达,蛋白印迹法(Western blot)技术检测PP2Cm蛋白表达,Cell Counting Kit-8(CCK-8)法测定细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。结果Ad-Pp2cm组巨噬细胞Pp2cm mRNA和PP2Cm蛋白表达水平均低于Ad-Ctrl组,差异有统计学意义(P<0.05)。与AdCtrl+S.aureus组相比,Ad-Pp2cm+S.aureus组巨噬细胞中TNF-α与IL-1β基因表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.01)。与Ad-Ctrl组巨噬细胞相比,Ad-Pp2cm组巨噬细胞中TLR2、TLR4、Tirap和Myd88基因表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。Ad-Ctrl组与Ad-Pp2cm组巨噬细胞的细胞凋亡和细胞增殖差异无统计学意义。结论Pp2cm基因沉默促进巨噬细胞对金黄色葡萄球菌感染的炎症响应。TLR通路在巨噬细胞炎症激活过程中发挥重要作用。
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关键词
金黄色葡萄球菌
蛋白磷酸酶2Cm
TOLL样受体
原文传递
题名
Pp2cm基因沉默对小鼠巨噬细胞通过TLR通路抵抗金黄色葡萄球菌感染的影响
1
作者
罗凯腾
谢茂迪
杨为
李涛
姜春玲
机构
四川大学华西医院
麻醉
科
四川大学华西医院麻醉转化医学国家地方联合工程研究中心线粒体与代谢研究室
出处
《四川大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期941-946,共6页
基金
国家自然科学基金面上项目(No.81971806)资助。
文摘
目的探究蛋白磷酸酶2Cm(protein phosphatase 2Cm,PP2Cm)的基因Pp2cm沉默对感染金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)后巨噬细胞炎症因子表达的影响及作用机制。方法通过腺病毒(adenovirus,Ad)转染Raw264.7小鼠巨噬细胞系分析了Pp2cm基因敲低对巨噬细胞炎症因子、细胞增殖凋亡和Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)信号通路的影响。细胞处理分为4组,包括Ad-Ctrl组、Ad-Pp2cm组、Ad-Ctrl+S.aureus组和Ad-Pp2cm+S.aureus组。分别在细胞中加入对照腺病毒(Ad-Ctrl)或针对Pp2cm基因的腺病毒(Ad-Pp2cm),使用或不使用金黄色葡萄球菌进行炎症诱导。实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin 1 beta,IL-1β)、TLR2、TLR4、Toll样受体衔接蛋白(Tolllike receptor adaptor protein,Tirap)和髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,Myd88)基因表达,蛋白印迹法(Western blot)技术检测PP2Cm蛋白表达,Cell Counting Kit-8(CCK-8)法测定细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。结果Ad-Pp2cm组巨噬细胞Pp2cm mRNA和PP2Cm蛋白表达水平均低于Ad-Ctrl组,差异有统计学意义(P<0.05)。与AdCtrl+S.aureus组相比,Ad-Pp2cm+S.aureus组巨噬细胞中TNF-α与IL-1β基因表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.01)。与Ad-Ctrl组巨噬细胞相比,Ad-Pp2cm组巨噬细胞中TLR2、TLR4、Tirap和Myd88基因表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。Ad-Ctrl组与Ad-Pp2cm组巨噬细胞的细胞凋亡和细胞增殖差异无统计学意义。结论Pp2cm基因沉默促进巨噬细胞对金黄色葡萄球菌感染的炎症响应。TLR通路在巨噬细胞炎症激活过程中发挥重要作用。
关键词
金黄色葡萄球菌
蛋白磷酸酶2Cm
TOLL样受体
Keywords
Staphylococcus aureus
Protein phosphatase 2Cm
Toll-like receptor
分类号
R587.2 [医药卫生—内分泌]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Pp2cm基因沉默对小鼠巨噬细胞通过TLR通路抵抗金黄色葡萄球菌感染的影响
罗凯腾
谢茂迪
杨为
李涛
姜春玲
《四川大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2023
0
原文传递
已选择
0
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