流体剪应力对大鼠破骨细胞骨吸收活性的影响

探讨流体剪应力对大鼠破骨细胞骨吸收活性的影响。我们采用低温离心法获取6月龄健康雌性SD大鼠椎骨骨髓细胞,以1.6×106细胞密度种植于血盖片上,采用1,25-(OH)2维生素D3体外诱导获取破骨细胞。于破骨细胞诱导的第7d取出细胞爬片,置于流体剪应力装置中,分别加载5.97、11.36、16.08、20.54dyne/cm2大小的流体剪应力,持续30min,以未加载流体剪应力的破骨细胞为对照组。实验结束时,以2.5%戊二醛固定细胞爬片,置于0.25mol/L氢氧化铵液超声处理10min,清除细胞爬片上的破骨细胞,经1%硪酸固定,梯度酒精脱水,醋酸异戊酯置换酒精,CO2临界点干燥,喷金后扫描电镜观察骨吸收陷窝并计数,图像分析法测定骨吸收陷窝的面积;同时分别收集每次灌流液10ml,冻干,用1ml复溶后,紫外分光光度仪检测抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)活性的变化。结果显示:在本实验中所选用的流体剪应力可增强破骨细胞TRAP活性,而骨吸收陷窝的数量和面积也增加,尤其是剪应力在16.08dyne/cm2时,破骨细胞TRAP活性增强以及骨吸收陷窝的数量和面积增高最为明显。结果表明,一定范围内的流体剪应力可以增强破骨细胞的骨吸收活性。

气电纺制备新型纳米材料及骨细胞相容性研究

探索纳米羟基磷灰石(n-HA)与聚醚砜(PES)电纺的最佳比例,制备新型纳米材料,并探讨其骨细胞相容性。分别以n-HA/PES:20/80,15/85,10/90(质量分数,下同),PES22%为电纺的比例,用N,N-二甲基甲酰胺(DMF)作溶剂,通过气电纺的方法制备了纳米羟基磷灰石与聚醚砜的复合纳米材料,运用扫描电镜、X射线能谱分析等方法进行检测,并在制得的纳米材料上接种成骨细胞,发现当n-HA与PES比例为10/90时,纺丝效果较好,纤维分布均匀:接种成骨细胞后,与阴性对照组比较,细胞在增殖上具有优势。从而证明气电纺制备的n-HA/PES纳米材料具有良好的骨细胞相容性。