IL-2淋巴间隙给药对宫颈癌荷瘤机体特异性T细胞免疫功能的影响

目的 :通过宫颈癌小鼠爪垫注射IL - 2及 5 -Fu后检测T细胞功能 ,探讨淋巴间隙给药在肿瘤细胞因子生物治疗中的效应。方法 :传代培养的小鼠宫颈癌细胞 (U14 )接种于Balb/c小鼠的左腋部皮下 ,构建荷瘤小鼠动物模型。荷瘤小鼠随机分为IL - 2组、 5 -Fu、IL - 2 +5 -Fu组及生理盐水对照。治疗 10天后分离小鼠脾脏细胞检测CTL细胞杀伤活性、淋巴细胞转化及IL - 2产生情况。结果 :CTL活性分别为 :对照组 :17 6 3±3 75 % ;IL - 2组 :2 7 34± 6 15 % ;5 -Fu组 :19 6 2± 5 17% ;IL - 2 +5 -Fu组 :2 4 0 1± 6 2 3%。淋巴细胞转化指数分别为 :对照组 :0 94± 0 13;IL - 2组 :1 92± 0 2 1;5 -Fu组 :1 30± 0 18;IL - 2 +5Fu组 :1 78± 0 2 8;IL- 2活性分别为 :对照组 :8± 2 1;IL - 2组 :12± 2 2 ;5 -Fu组 :9± 2 5 ;5 -Fu +IL - 2组 :13± 3 2。结论 :宫颈荷瘤小鼠爪垫注射细胞因子能显著性提高荷瘤机体的特异性细胞免疫功能。

应用曲线拟合方法求解单克隆抗体亲和常数中OD_(100)

目的采用曲线拟合方案测定单克隆抗体亲和常数计算中的OD100。方法以测定抗苏丹红-1单克隆抗体亲和常数为例,非竞争ELISA法测定OD值,经曲线回归拟合结合反应的曲线模型及其方程,依据方程计算OD100值。结果根据幂曲线模型计算的抗苏丹红-1单抗亲和常数为K=8.19×108l/mol。结论应用统计学分析方法拟合的曲线模型,科学可靠地测定了OD100,为单克隆抗体亲和常数的计算提供了科学、合理的测量基础。

TAP和HLA-Ⅰ类抗原在人肝细胞癌中的表达

为探明肝细胞癌 (HCC)组织中抗原Ⅰ类递呈途径的存在状况 ,采用免疫组织化学技术对 3 0例HCC和2 8例癌旁组织中TAP与HLA -Ⅰ类抗原的表达进行了检测。结果显示 ,HCC和癌旁组织基本上都有较强的TAP和HLA -Ⅰ类抗原的表达 ,两者无明显差异 (x2 <0 0 2 ,P >0 0 5 ) ,这表明HCC中抗原Ⅰ类递呈途径可能基本正常 ,胞毒性T细胞 (CTL)能够杀伤HCC细胞 。

艾灸对实验性类风湿关节炎滑膜细胞原癌基因c-fos和c-myc mRNA表达的影响

目的 观察艾灸对实验性类风湿关节炎滑膜细胞原癌基因 c- fos、c- myc m RNA表达的影响 ,初步探讨艾灸对 RA滑膜细胞内分子信号传导的调控。方法 在日本大耳白兔右后足踝关节部皮内注射福氏完全佐剂造模 ,经过艾灸治疗 ,通过半定量 RT- PCR测定 c- fos和 c- myc m RNA的表达量。结果 治疗组 c- fos和 c- myc m RNA表达量显著低于造模组 (P<0 .0 1 )。结论 艾灸治疗能够降低 c- fos和 c- myc m RNA的表达 ,影响生长因子信号传导系统。

经腹膜外盆腔淋巴间隙给予IL-2对妇科肿瘤患者TIL亚群及NK细胞的影响

目的 探讨通过盆腔腹膜外淋巴间隙进行肿瘤生物治疗的可行性。方法 妇科恶性肿瘤患者 4 1例 ,随机分为 IL- 2组 (n=10 )、IL- 2 +5 - Fu组 (n=11)、5 - Fu组 (n=10 )及对照组 (n=10 ) ;通过经盆腔腹膜外淋巴间隙留置管 ,分别予以 IL- 2、IL- 2 +5 - Fu、5 - Fu治疗后 ,手术中摘取肿瘤组织 ,分离浸润淋巴细胞 ,用流式细胞仪检测 T细胞表面标记、CD2 5活化标记变化及 NK细胞数量。结果 治疗后各治疗组肿瘤浸润淋巴细胞 CD3+、CD4 +、CD8+ 、CD2 5 + 、NK细胞数量均明显高于对照组 (P值均 <0 .0 5 ) ;IL - 2 +5 - Fu组 CD3+ 、CD4 + 、CD8+ 、CD2 5 + T细胞含量及 NK细胞数量明显高于 5 - Fu组 ,IL - 2组 CD2 5 + T细胞含量及 NK细胞数量明显高于 5 - Fu组 (P<0 .0 5 )。结论 经盆腔腹膜外淋巴间隙进行生物治疗能有效激活机体 T细胞反应 ,促进 T细胞增殖、活化和浸润 ,增强患者免疫系统对肿瘤的有效防御反应。

曲尼司特对环孢素A慢性肾毒性大鼠肾脏TGF-β1、AngⅡ及ColⅢ的影响

目的:探讨曲尼司特(tranilast,TNL)对环孢素A(CsA)慢性肾毒性大鼠血清及肾脏血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及肾脏转化生长因子-β1(TGF-β1)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)的影响。方法:雄性SD大鼠24只,随机分成正常对照组、模型组、TNL治疗组、安博维治疗组。采用低盐饮食加CsA 20 mg/(kg.d)灌胃的方法建立CsA慢性肾毒性肾脏模型。观察TNL对大鼠肾脏病理及肾组织Ang Ⅱ、TGF-β1、ColⅢ的影响。结果:TNL能下调CsA慢性肾毒性大鼠血清及肾组织中AngⅡ的水平及肾组织TGF-β1、ColⅢ在肾脏的表达。结论:TNL可能通过抑制AngⅡ、TGFβ1及ColⅢ的表达而发挥其抗纤维化作用。

药食植物提取物影响肺癌细胞YTMLC-90生长的血清药理学研究

目的在营养领域内建立血清药理学方法,为评价药食植物的防癌效果提供一种新技术;同时观察药食植物提取物(HFE)对肺癌细胞生长和增殖的作用,为预防癌症提供有效可行的营养措施。方法用正交设计探讨建立血清药理学方法的适宜条件;用MTT、群体倍增时间和集落形成实验研究含HFE动物血清对肺癌细胞生长和增殖的作用。结果针对HFE,在对小鼠每天灌胃2次、共连续灌胃3天、体外实验含药血清浓度10%的实验条件下,为建立血清药理学方法的较好条件。各浓度(0.5、1.0和2.0g/ml)的HFE对肺癌细胞的生长和增殖均有一定的抑制作用;高浓度组(HFE2.0g/ml)灌胃3日和低浓度组(HFE0.5g/ml)灌胃10日的抑制作用尤为明显,且二者作用无显著差异。结论用血清药理学方法能更直接深入地观察受试物的抑癌作用。药食植物对防癌抗癌有较好的效果,在长期防癌过程中有较好的实用价值。

曲尼司特对CsA慢性肾毒性大鼠TGF-β/Smad通路的影响

目的探讨不同剂量曲尼司特(TNL)对环孢素A(CsA)慢性肾毒性大鼠肾脏TGF-β/Smad通路的的影响。方法雄性SD大鼠34只,随机分成正常对照组、模型组、TNL低剂量治疗组、TNL中剂量治疗组、TNL高剂量治疗组、安博维治疗组。采用低盐饮食加CsA20mg/(kg·d)灌胃的方法建立环孢素A慢性肾毒性大鼠模型。用RT-PCR和免疫组织化学检测不同剂量TNL对大鼠肾脏TGF-β1、Smad3、Smad7的影响。结果TNL能下调CsA慢性肾毒性大鼠肾组织中TGF-β1、Smad3的mRNA水平及在肾脏的表达,上调Smad7的mRNA水平及在肾脏的表达。结论在CsA慢性肾毒性大鼠模型中,TNL可能通过调节TGF-β/Smad通路而发挥抗纤维化的作用,从而减缓CsA慢性肾毒性的进展。

7个mt-SNP的微测序技术检测及群体遗传学研究

目的建立基于SNaPshot Kit的线粒体上7个单核苷酸多态性(SNP)位点快速、准确的检测方法,并利用该方法对四川地区85个汉族男性无关个体进行群体遗传学研究。方法对4216、7028、10398、10400、12308、12705、14766共7个mt-SNP位点进行复合扩增,采用SNaPshot Kit结合毛细管电泳技术对SNP进行检测。结果建立了7个mt-SNP位点的微测序快速检测系统,在四川地区人群中发现10400、12705和10398位点存在变异,共发现有4种单体型。结论复合扩增结合微测序技术能够同时对多个mt-SNP的多态性进行快速、准确的检测,在法医学实践中有一定应用价值。

阿魏酸哌嗪对环孢素A慢性肾毒性大鼠肾脏的保护作用

目的探讨不同剂量阿魏酸哌嗪（PF）对环孢素A（CsA）慢性。肾毒性大鼠肾脏TGF-β／Smads通路的影响。方法采用低盐饮食加CsA20mg·kg^-1·d^-1灌胃的方法建立环孢素A慢性肾毒性肾脏模型。雄性SD大鼠24只，随机分为正常对照组（N）、模型组（M）、PF低剂量治疗组（P1）、PF高剂量治疗组（P2）。第4周末肾组织行HE染色观察肾组织病理学变化；免疫组织化学和RT-PCR技术检测不同剂量PF对大鼠肾脏TGF-β1、Smad3、Smad7的影响。结果PF能下调CsA慢性肾毒性大鼠肾组织中TGF-β1、Smad3及其mRNA水平的表达，上调Smad7及其mRNA水平的表达。结论PF可能通过下调TGF-β1、Smad3，上调Smad7来发挥其防治CsA慢性肾毒性的作用。

细胞因子受体-嵌合抗体真核表达载体的构建

目的:构建细胞因子受体-抗人AFP嵌合抗体基因真核表达载体。方法:用RT-PCR方法从人胚肝组织中扩增EpoR胞外区基因及gp130跨膜区基因,并用限制性酶切连接方法拼接。用PCR方法从抗人AFP单链抗体表达载体中扩增VL、VH基因,分别与人kappa轻链和人gammal重链恒定区基因重组,获得人鼠嵌合轻链和重链,再将EpoR-gp130与嵌合重链连接,最后将嵌合轻链和H-EpoR-gp130分别连接到质粒pVITRO上,构建pVITRO-E-g-Ig载体。结果:获得EpoR胞外区基因750bp,gp130跨膜区基因900bp。重组真核表达载体经限制性酶切鉴定示EpoR、gp130基因、嵌合重链基因和嵌合轻链基因正确连接到载体pVITRO。结论:成功构建细胞因子受体-抗人AFP嵌合抗体基因表达载体。

常染色体显性高度近视一家系连锁定位分析

目的通过连锁定位分析，探讨一个中国原发性高度近视家系的致病基因与已报道高度近视相关连锁位点的关系。方法选择一个连续3代发病的常染色体显性高度近视家系，选取位于18p11．31，12q21-23，7q36，17q21-23，4q22-27，2q37．1，7p15．3，15q12-13，10q21.1这9个已报道的常染色体显性高度近视致病基因连锁位点的18个多态性微卫星标记物进行srR基因分型，采用两点法进行连锁分析。结果本家系受累者皆为高度近视，屈光度从-6．00D到-20．00D不等，符合常染色体显性遗传特征。分析显示此9个遗传标记位点与该家系致病基因均不连锁，比值比均〈-1。结论该家系存在一个新的致病基因连锁位点，需进一步实施全基因组多态性微卫星标记连锁分析以确定该家系致病基因的染色体定位。

曲尼司特对CsA慢性肾毒性大鼠AngⅡ和ET-1的影响

研究曲尼司特对环孢素A(CsA)慢性肾毒性大鼠的肾脏保护作用,发现曲尼司特能减低环孢素A慢性肾毒性大鼠血浆和肾组织中AngⅡ的含量,并下调肾组织中ET-1的表达.结果表明曲尼司特可能通过下调环孢素A慢性肾毒性大鼠血浆和肾组织中AngⅡ的的水平以及肾组织中ET-1的表达,减轻肾脏病理损害,发挥其肾脏保护作用.

抗细胞膜DNA抗体与其他自身抗体的检测及相关分析

目的分析抗细胞膜DNA(m DNA)抗体与其他自身抗体的相关性,评价其对系统性红斑狼疮(SLE)的诊断意义。方法收集2015年1月-8月就诊的254例自身免疫性疾病患者血清,包括SLE 106例,类风湿关节炎(RA)80例,混合性结缔组织病(MCTD)32例,干燥综合征(SS)29例,多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM)7例;另再收集20例正常对照者血清。分别用间接荧光免疫法检测抗m DNA抗体、抗双链DNA(ds DNA)抗体、抗核抗体(ANA)及抗角蛋白抗体(AKA),酶联免疫吸附测定法检测抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体,速率散射比浊法检测类风湿因子(RF),免疫印迹法检测抗Sm抗体。结果抗m DNA抗体在SLE中的阳性率为72.6%(77/106),显著高于RA[5.0%(4/80)]、MCTD[18.7%(6/32)]、SS[14.7%(4/29)]、PM/DM[0.0%(0/7)]以及健康对照组[0.0%(0/20)],差异有统计学意义(P<0.001);抗m DNA抗体对SLE诊断的灵敏度、特异度和诊断效率分别为72.6%、91.7%和84.3%;抗m DNA抗体与ANA、抗ds DNA抗体及抗Sm抗体显著相关(P<0.001),与抗CCP抗体、AKA及RF无相关性(P>0.05)。结论抗m DNA抗体与SLE相关自身抗体密切相关,对SLE诊断具有高度灵敏度和特异度。

细胞因子受体-抗人AFP嵌合抗体融合蛋白的构建及表达

用RT-PCR方法从人胎肝组织中扩增EpoR胞外区基因及gp130跨膜区基因,并用酶切连接方法将其与抗人AFP嵌合抗体拼接,连接到质粒pVITRO上,构建真核表达载体.将重组质粒转染CHO细胞,以RT-PCR、Western blot和ELISA方法检测融合蛋白的表达.结果显示稳定转染细胞株有约150kDa的融合蛋白表达.