一株水源分离军团菌的分子生物学鉴定和系统发育学及毒力分析

目的对我室2009年分离获得的一株疑似军团菌菌株(编号为CD-1)进行分子生物学鉴定、系统发育学及毒力分析。方法对CD-1株进行PCR扩增军团菌属特异性16SrRNA作为分子生物学鉴定,扩增其rpoB基因片段并测序进行系统发育学分析。对CD-1株进行PCR扩增以检测其毒力基因mip,并用CD-1株感染BABL/c小鼠以研究其毒力。结果 PCR扩增军团菌属特异性16SrRNA显示CD-1株在650bp处有特异条带,说明CD-1株为一株军团菌,系统发育学分析显示CD-1株与长滩军团菌(Legionella longbeachae)聚为一枝,其后验概率为1.00。对CD-1株进行军团菌毒力基因mip扩增,扩增产物在650bp处有特异条带,显示CD-1株携带有mip基因。动物实验结果显示当感染菌量浓度达到107 cfu/mL时,实验组小鼠全部死亡。结论 CD-1株为一株长滩军团菌,对BALB/c小鼠具有较强毒力,并且有可能对人体致病。这是四川地区分离获得的首株长滩军团菌,也是国内首次对水源分离军团菌毒力进行报道。

肠杆菌科细菌16S rRNA甲基化酶基因检测及其同源性研究

目的了解肠杆菌科细菌含16S rRNA甲基化酶基因的现状并初步探讨该基因的传播途径。方法临床分离阿米卡星高度耐药菌株,用PCR方法检测其16S rRNA甲基化酶基因,并进行序列比对;肠杆菌科基因间重复一致性序列-PCR(ERIC-PCR)进行菌株同源性分析,接合试验验证耐药基因水平传播途径。结果 374株临床分离菌中24株含有甲基化酶基因(6.41%),其中armA基因阳性10株,rmtB基因阳性10株,2种基因同时阳性4株;ERIC-PCR发现其中包含高度同源的大肠埃希菌;45.8%(11/24)16S rRNA阳性菌接合试验阳性。结论肠杆菌科细菌对氨基糖苷类药物高度耐药与16S rRNA甲基化酶有关。16S甲基化酶编码基因既可通过克隆传播,也可通过质粒水平传播。