microRNA的检测技术及其法医学应用前景

microRNA（miRNA）是一类由18～25个核苷酸构成的非编码小分子RNA，在转录后水平调控基因的表达。miRNA的表达具有高度保守性、时序性和组织特异性。随着其检测技术的逐渐成熟，miRNA被引入到法医学的研究中。新近研究表明，miRNA在法医学体液鉴定、种属鉴定和PMI推断等方面有一定的应用前景。本文简述miRNA检测技术的发展，并对其在法医学中的应用及前景进行综述，以期为相关研究及实践提供参考。

中国康巴地区藏族群体5个STR基因座的遗传多态性研究

目的 获取 D1S5 4 9,D3S175 4 ,D12 S391,D12 S375和 D18S86 5基因座在中国康巴藏族群体中基因型及等位基因频率数据 ,初步探讨其在遗传学研究及法医学应用中的意义。方法 抽取 10 0名地区藏族群体无血缘关系个体的静脉血滴于滤纸上 ,干燥后剪取少许血痕 ,chelex法提取 DNA。应用 PCR技术 ,扩增产物用非变性聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳分型。结果 中国康巴地区藏族群体 D1S5 4 9基因座发现 7个等位基因 ;D3S175 4基因座发现 6个等位基因 ;D12 S391基因座发现 10个等位基因 ;D12 S375基因座发现 6个等位基因 ;D18S86 5基因座发现 6个等位基因 ;5个基因座的基因型分布均符合 Hardy- Weinberg平衡 (P>0 .0 5 )。各基因座的杂合度分别为 0 .86 ,0 .77,0 .81,0 .6 9和 0 .80 ;个人识别率分别为 0 .92 9,0 .838,0 .934,0 .886和 0 .890 ;非父排除率分别为 0 .715 ,0 .5 4 5 ,0 .6 18,0 .4 13和 0 .5 99。结论 5个基因座在中国康巴藏族群体中具有较高的非父排除率与个人识别率 ,在法医学应用和群体遗传学研究中有较高的价值。

嗅鞘细胞移植对大鼠脊髓半横断损伤后轴突再生及后肢功能恢复的作用

为了对嗅鞘细胞移植治疗大鼠脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)后轴突再生及后肢功能恢复进行综合性的评价,本实验采用22只雌性成年SD大鼠,并随机分成A、B、C、D 4组。其中A、B、D组行左侧T11 ～T12节段脊髓半横断手术,然后A组移植嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)悬液;B组移植DMEM/F12培养液;D组移植核荧光试剂(Hoechst33342)标记的嗅鞘细胞,用于鉴定嗅鞘细胞在体内的存活情况;C组作为正常对照组。术后6周内,对大鼠进行BBB评分、IP斜板试验并观察皮质体感诱发电位(cortical somatosensory evoked potential, CSEP)、运动诱发电位(motor evoked potential, MEP)的潜伏期。将辣根过氧化物酶(HRP)注射到横断面尾段脊髓,逆行追踪观察横断面头段脊髓及对侧中脑红核内HRP逆标细胞数,并观察左侧后肢小腿三头肌肌细胞横截面积及直径的变化。结果显示:(1)移植后的OECs数量未见明显减少,细胞核形态较好,细胞未向头、尾侧迁移;(2)移植3周后BBB评分及IP斜板,试验A、B组较C组明显低(P<0.05),但A组明显高于B组(P<0.05);(3)A、B组的CSEP及MEP潜伏期较C组明显延长(P<0.05),但A组要比B组明显缩短(P<0.05);(4)HRP逆行追踪观察到对侧中脑红核大细胞区及脊髓T9 ～T11节段逆标细胞的数量,A组明显多于B组,但A、B组均少于C组;(5)左侧后肢小腿三头肌肌细胞的横截面积及直径,A、B组均较C组减少,但A组减小的幅度明显小于B组。以上结果表明OECs移植能促进半横断脊髓轴突的再生及后肢功能的恢复。

白细胞介素1A基因3′-UTR插入/缺失多态与中国汉族前列腺癌的相关性研究

目的研究白细胞介素1A基因（IL1A）3′-UTR区＂TTCA＂插入（I）/缺失（D）多态性位点与中国汉族男性前列腺癌之间的关系。方法采用聚合酶链反应-聚丙烯酰胺凝胶电泳（PCR-PAGE）方法,在131例前列腺癌患者和229例正常对照者样本中对IL1A基因3′-UTR区＂TTCA＂插入/缺失多态性位点（rs3783553）进行基因分型,分析比较两组样本间等位基因频率及基因型频率分布差异,探讨该位点与前列腺癌的相关性。结果基因分型结果显示,两组样本中rs3783553位点基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡;统计结果显示,与D/D基因型相比,基因型为D/I或I/I的个体罹患前列腺癌的风险降低（P〈0.001,OR=0.48,95%CI：0.31～0.74）;相对于等位基因D,等位基因I罹患前列腺的风险降低（P=0.001,OR=0.56,95%CI：0.40～0.79）。结论 IL1A基因3′-UTR区＂TTCA＂四碱基插入/缺失多态性可能与中国汉族男性前列腺癌的发病相关。

黑素皮质素受体1基因多态性与成都汉族人群雀斑的关联分析

目的探讨黑素皮质素受体1（melanocortin一1receptor，MCIR）基因单核苷酸多态性（singlenucleotidepolymorphism，SNP）与成都地区汉族人群中雀斑发病的相关性。方法随机抽取20份无血缘关系个体血液样本，测序筛查MCIR基因用于与雀斑发生进行关联分析的SNPs。收集111例雀斑患者和124名正常对照个体的外周血样本，焦磷酸技术结合DNA池对筛查到12个SNPs位点的等位基因频率进行定量分析，选择能引起氨基酸改变和多态性较好的位点，分别应用焦磷酸技术和聚合酶链反应一限制性片段长度多态技术进行单个样本基因型鉴定。结果经焦磷酸技术结合DNA池初筛，从测序所得到的12个SNPs位点中，选择rs2228479、rs885479、rs33932559和rs2228478这4个SNP位点进行单个样本基因型鉴定。4个SNPs位点基因型频率和等位基因频率分布与dbSNP数据库中国北京汉族人群的数据一致，rs33932559位点以T等位基因为主，在雀斑组与对照组中的频率分别为90．09％、91．94％，两组间差异无统计学意义（P〉0．05）。rs2228479位点G等位基因频率和rs2228478位点A等位基因频率均占77％左右，rs885479位点T等位基因频率占60％左右，这3个位点等位基因频率与基因型频率分布在雀斑组与对照组间的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论在成都汉族人群中尚未发现MCIR基因单核苷多态性与雀斑发生的相关性。