成都地区汉族人群X染色体3个STR基因座的遗传多态性及其法医学应用

目的 了解 X染色体 3个 STR基因座在中国成都汉族群体的遗传多态性及其法医学应用价值。方法 利用 PCR和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳对中国成都地区无亲缘关系汉族个体 X染色体 3个 STR基因座进行分型 ,自动激光荧光测序仪测定 DNA序列 ,并检验女性基因型频率分布是否符合 Hardy- Weinberg平衡 ,计算法医学常用各种概率。结果 3个 STR基因座在成都地区汉族群体均具有遗传多态性 ,χ2检验表明女性的基因型频率分布符合 Hardy- Weinberg平衡。结论 为人类群体研究提供了 X染色体 3个 STR基因座的中国成都汉族群体数据 。

嗜尸性苍蝇mtDNA中COⅠ和COⅡ基因序列检测及法医学应用

目的 利用线粒体DNA(m t DNA)上细胞色素氧化酶辅酶 和 (CO 、CO )中2 78bp和6 35 bp基因序列对嗜尸性苍蝇及其幼虫、卵进行种属鉴定。方法 随机采集放置在呼和浩特地区室外草地兔尸体和甘肃敦煌戈壁滩猪尸体上的嗜尸性苍蝇、幼虫、苍蝇腹中的卵,提取苍蝇m t DNA进行PCR扩增;并进行扩增结果检测;PCR胶回收纯化、测序并进行序列分析和构建系统发育树。结果 上述嗜尸性苍蝇mt DNA上CO 和(或) CO 基因序列在双翅目嗜尸性苍蝇的种内基因差异均数小于1% ,种间差异均数大于3% ,成虫与幼虫、卵之间几乎没有明显差异,表明在嗜尸性苍蝇种内和种间序列差异均数百分比范围内无重叠,并由此根据CO 和(或) CO 序列差异判断两个个体是否同种。结论 mt DNA上CO 和(或) CO 序列分析均能有效地对嗜尸性苍蝇及其幼虫、卵进行种属鉴定,CO +CO 和CO 的检验效能要高于CO 。

9个Y-STR基因座荧光复合扩增系统的法医学应用

目的建立9个Y-STR基因座的复合扩增系统,提高Y-STR的法医学检测效能。方法6-FAM标记DYS434、Y-GATA-A10、DYS438、DYS439,HEX标记DYS531、DYS557、DYS448,TAMRA标记DYS456、DYS444引物,PCR复合扩增,毛细管电泳得到结果,考察扩增系统的个体识别能力、灵敏度、特异性、组织同一性。结果所建立的9个Y-STR复合扩增系统分型清晰,单倍型多样性达0.9968,特异性好,灵敏度高(0.5ngDNA),并且在男女混合斑检验上较常染色体STR分型更有优势。结论9个Y-STR复合扩增系统具有较高的识别能力,对建立Y染色体STR数据库,研究群体遗传学和进行法医学混合斑物证鉴定有重要意义。

人类线粒体DNA异质性研究进展及其法医学应用

线粒体DNA(mitochondrial DNA mtDNA)的异质性自从被发现以来,一直被遗传学、进化学、发育遗传学以及法医遗传学、分子生物学领域所重视。由于线粒体异质性的存在,使得很多涉及疾病、进化、系统发育线粒体基因组与核基因组的相互作用关系、线粒体DNA复制机制以及法医学运用线粒体DNA进行实际案件评估的问题变得复杂化。此外线粒体DNA异质性的发生原因以及对线粒体异质性的检测方法标准化问题还没有一个统一的答案。针对线粒体DNA异质性带来的种种问题,近年来国内外取得了不少研究进展。

复合扩增mtDNA-HVⅠ、HVⅡ和cytb片段在法医学种属鉴定中的价值

目的探讨复合扩增mtDNAD-环HV、HV和细胞色素b片段进行种属鉴定的方法,以及在法医学生物检材种属鉴定中的应用价值。方法收集包括人在内的17种动物的血痕或肌肉组织样本,提取DNA后定量,用三对引物复合扩增mtDNAD-环HV、HV片段和细胞色素b(cytb)片段,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳,银染显色后分析结果。结果人类DNA扩增产物为278bp、358bp、425bp三条带,动物DNA扩增产物为一条带,在电泳谱中位置与人358bp的条带存在差异。结论复合扩增mtDNAD-环HV、HV和细胞色素b片段进行种属鉴定,方法简单,灵敏度较高,可应用于法医学实践。

单细胞分离技术在法医学中的应用研究进展

法医学检材常受微量、混合等因素的困扰,单细胞分离检验可以在一定程度上解决这些法医学问题,对每一个细胞单独进行研究,从而得到全面可靠的信息。目前研究报道可用的单细胞分离技术种类较多,本综述将根据单细胞分离技术研究现状,详细分析当今研究人员最常使用的单细胞分离技术,并对各种技术在法医学领域的应用进行归纳,总结出不同场景下对单细胞分离技术的选择策略,最后探讨单细胞分离技术的法医学应用前景,为今后法医学疑难混合样本分析提供理论依据及技术手段。

X染色体四个STR基因座的遗传多态性及法医学意义(英文)

目的建立X染色体短串联重复序列DXS7133、GATA198A10、DXS9896、DXS6797基因座的复合扩增系统,调查成都汉族人群的遗传多态性并探讨其法医学应用价值。方法应用PCR和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分型技术,并检验各基因座女性基因型频率分布是否符合HardyWeinberg平衡,计算法医学常用各种概率。结果DXS7133、GATA198A10、DXS9896、DXS6797基因座在成都地区汉族群体中(男100,女120)分别发现6、6、11、8个等位基因,女性个人识别几率分别达0.7962、0.8021、0.9675和0.9444。χ2检验表明各基因座女性的基因型频率分布符合HardyWeinberg平衡。32个亲子鉴定案例调查表明这4个基因座符合X染色体伴性遗传方式,未发现突变。结论DXS7133、GATA198A10、DXS9896、DXS6797基因座在成都汉族群体中具有较高的遗传多态性,适用于个人识别和女孩的亲权鉴定。

PCR-SSCP法检测人类补体第八成分C8ADNA多态性研究

目的建立一种检测人类补体C8ADNA多态性的新方法。方法C8A多态性的分子基础是C8A基因在第三外显子碱基发生了C→A的突变,通过特异性扩增C8A基因第三外显子,采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)方法结合DNA序列分析检测成都地区98份无血缘关系样本DNAC8A基因型。结果共发现3种基因型,C8A*AA、C8A*BB和C8A*AB,观测到的基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡定律。结论PCR-SSCP检测C8A多态性快速、简便、可靠、成本低,适用于大样本的筛选,在群体遗传学及法医学实践中有较好的应用价值。

DNA分析法快速诊断21三体综合征

目的 建立适合于快速诊断 2 1三体的 DNA分析方法。方法 用 PCR法扩增 2 1号染色体上 2个串联重复序列 D2 1S1435和 D2 1S2 0 5 5基因座 ,聚丙烯酰胺凝胶电泳 ,银染分型。根据谱带的条数和浓度判断是否为2 1三体 ,根据谱带的位置 ,与父母的基因型比对 ,判断三体的亲代来源。结果 应用此法检出所有核型分析确诊的游离型 2 1三体 ,能准确地判断出三体的亲代来源。结论 该法无须细胞培养 ,适于含一定 DNA的各种有核细胞样本 ,检测过程简便、快速 ,较传统方法省时、省力 ,适于大范围的 2

基于提高实践能力的人体局部解剖学实验教学改革与创新

人体局部解剖学是医学本科教学中最为重要的基础学科之一,其中实验教学是理论教学基础上的实践操作,是更为重要的教学环节.基于提高实践能力的人体局部解剖学实验教学能够帮助学生更加有效地学习人体解剖学结构,培养实践操作能力,为今后从事相关医学工作夯实基础.随着我国教学改革的不断深入,本校对局部解剖学实验教学的改革也越来越重视,其教学质量直接关系到医学生的实践操作能力以及未来的职业素养.因此,本文结合本校局部解剖学实验课的教学实践,分析本校关于局部解剖学实验教学改革与创新的进展.

科研训练对医学生创新能力影响的研究

为了探讨大学生科研训练对学生创新能力的影响，本研究面向四川大学不同专业学生（理学、工学、文学、医学）发放200余份调查问卷，具体内容包括：了解不同专业、年龄、年级、性别的学生通过科研训练是否提高了创新能力，这些影响是否有差异性；完善大学生创新能力的评价内容，首次提出从不同专业和教学模式进行评价的方法，探讨建立大学生创新能力评价新标准对于教育改革和培养人才的意义。本研究得出如下结论：第一，科研训练和学生创造性呈正相关，具有统计学意义。第二，学生主导型科研设计对创新能力的正面影响最大。第三，科研设计对医学生的多种能力均有促进作用，而影响最大的是思维因素和实践能力。

间变性大细胞淋巴瘤中ALK蛋白及EB病毒基因产物的表达

目的 研究间变性大细胞淋巴瘤 (AL CL)中 AL K蛋白的表达特点及与 EBV的关系。方法 采用免疫组织化学 SP法检测 AL K蛋白表达 ,EBV基因转录产物 EBER1 / 2以 DNA- RNA原位杂交方法检测。结果 AL K蛋白在 2例皮肤原发 AL CL 均为阴性 ,2 0例系统性 AL CL 中有 1 2例 (6 0 % )阳性 ,其中普通型 8例 ,淋巴组织细胞型 3例、小细胞型 1例 ,AL K蛋白的表达在各组织学亚型中无显著性差异。表达模式主要为细胞浆与细胞核均为棕黄色 ,但其中有 2例仅为细胞浆着色 ;AL K蛋白阳性组和阴性组年龄差异具有显著性 (P<0 .0 5 ) ,AL K蛋白阳性组年龄显著低于阴性组。所有 2 2例 AL CL 病例 EBER原位杂交均为阴性。结论 AL K蛋白的表达在AL CL 中有很高的发生率 ,尤其是低年龄的患者。本研究未发现 AL CL 与

流感病毒诱导肿瘤细胞凋亡及其机制的研究

目的 观察流感病毒对肿瘤细胞是否具有凋亡诱导作用 ,并进一步研究 Fas L 在此过程中的作用。方法 流感病毒以 2 0 m.o.i.感染 Hela、Raji、SMMC- 772 1和 SPC- A- 1等肿瘤细胞 ,于诱导后不同时间观察细胞超微结构改变 ,DNA琼脂糖凝胶电泳检测梯状条带 ,PI染色流式细胞仪检测细胞 DNA含量 ,Annexin- V FITC/ PI流式细胞仪进行凋亡定量分析 ,并用生物素 -亲和素 EL ISA测定流感病毒诱导后细胞培养上清中 s Fas L 浓度的变化。结果 经流感病毒诱导后 ,四种肿瘤细胞均显示凋亡的形态学改变 ,细胞 DNA电泳出现梯状条带 ,流式细胞仪测定表明细胞凋亡率增高 ,且显示一定的时间效应 ;在上述过程中 ,细胞培养上清中 s Fas L 浓度有明显增高。结论 流感病毒可诱导上述肿瘤细胞发生凋亡 ,其发生机制可能与 Fas L

miR-143和miR-145与肿瘤的研究进展

microRNA(miRNA)是一类长18～25个核苷酸的进化保守的内源性非编码单链RNA分子,它们基于与mRNA的序列互补,可以降解靶mRNA和抑制蛋白质翻译。大量研究显示,miRNA在细胞增殖、分化、发育和凋亡等方面起着重要的作用。其中miR-143和miR-145在多种肿瘤中表达降低,包括结直肠癌、乳腺癌、前列腺癌、膀胱癌、胃癌、肺癌、食管癌、宫颈癌、胰腺癌、鼻咽癌、卵巢癌、骨肉瘤、脂肪肉瘤、尤文氏肉瘤和白血病等,通过与多个靶基因KRAS、c-Myc和ERK5等作用抑制细胞增殖、侵袭和转移,促进细胞凋亡,增加抗肿瘤药物的敏感性,发挥类似于抑癌基因的作用。由此,抗肿瘤药物联合应用miR-143和/或miR-145有望成为新的肿瘤化疗方案。

成都汉族ACTBP_2位点多态性研究及三个位点的复合扩增

目的 获得中国成都地区汉族人群中短串联重复序列 ACTBP2 (SE33)位点的多态性分布 ,建立DHFRP2 、FIBRA和 ACTBP2 三个 STR位点的复合扩增方法。方法 用 Am p- FL P、聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染技术 ,对 14 7个成都汉族无血缘关系个体进行分析。结果 发现 ACTBP2 位点的等位基因为 2 0个 ;基因型 86种 ;观察杂合度 (h) 0 .972 8;个体鉴别机率 (DP) 0 .986 1;多态性信息量 (PIC) 0 .9310 ;非父排除率 (EP) 0 .82 0 3。基因型分布皆符合 Hardy- Weinberg平衡 ,家系调查结果证明均符合孟德尔遗传法则。结论 ACTBP2 位点多态性好 ,灵敏度高 ,可用于人类遗传分析及法科学中的亲子鉴定和个人识别 ,三个 STR位点的复合扩增方法简便 。

食管上皮癌前期病变细胞p53基因的突变

目的 比较 p5 3基因的突变在食管癌前期病变和正常食管上皮中的差异 ,了解癌前期病变细胞中p5 3基因的突变与癌变的关系。方法 应用 PCR- SSCP方法和 PCR- RFL P方法对四川盐亭县 1982年施行食管癌普查的食管拉网脱落细胞 ,进行 p5 3基因第 5外显子及第 7外显子的突变检测。结果 4 8例标本 p5 3基因检测均获得成功 ;食管上皮重度不典型增生细胞中发现有 5例突变发生 ,均为 p5 3基因第 7外显子 ,而第 5外显子未发现突变。检测到的 5例突变中 ,有 3例分别在普查后 10年、12年和 14年后转变为食管癌。正常食管上皮拉网脱落细胞中均未发现突变。结论 p5 3基因保持正常状态是食管上皮维持正常的前提条件 ;p5

增强型绿色荧光蛋白基因真核表达载体的构建

构建增强型绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein,EGFP)基因的真核表达载体pCDNA3.1(+) EGFP,转染至培养的Hela细胞中成功表达,并发出绿色荧光,证明EGFP一种良好的报告基因和筛选标记.

不同时程吗啡依赖戒断大鼠海马CA1区BDNF及PSD-95的表达

目的观察不同时程吗啡依赖大鼠戒断1周后海马CA1区脑源性神经生长因子(BDNF)及突触后致密质95(PSD-95)的表达变化,探讨吗啡依赖戒断对海马CA1区的影响。方法建立不同时程(1周、2周、4周)吗啡依赖大鼠模型并自然戒断1周后,应用RT-PCR方法观察海马CA1区BDNF及PSD-95的表达情况。结果吗啡依赖1周戒断组大鼠海马CA1区的BDNF及PSD-95表达较生理盐水对照组下降(P<0.01),吗啡依赖2周戒断组大鼠海马CA1区的BDNF及PSD-95表达较吗啡依赖1周戒断组大鼠有所上升(P<0.05),但仍低于生理盐水对照组(P<0.01),吗啡依赖4周戒断组大鼠海马CA1区的BDNF及PSD-95表达较吗啡依赖1周戒断组大鼠、吗啡依赖2周戒断组大鼠均下降(P<0.01)。结论BDNF及PSD-95在吗啡依赖大鼠自然戒断1周后的海马CA1区的表达降低,吗啡依赖戒断对海马CA1区损伤明显。

4个Y-miniSTR基因座荧光标记复合扩增体系的建立

目的:构建DYS456,DYS392,DYS439,Y-GATA-H4等4个Y-mini STR基因座复合扩增体系,评价其检测敏感度、数据库兼容性和对降解检材的分型能力。方法:设计4个Y-mini STR的引物,用FAM、JOE、ROX、TAMRA分别标记其上游引物,构建复合扩增体系。利用本体系的引物扩增稀释过的Y23试剂盒的ladder,制备等位基因分型标准物。比较该体系与Promega Power PlexY23试剂盒在普通检材、降解检材的分型能力、敏感度和分型结果。结果:同一样本体系分型结果和商业化试剂盒Y23 STR分型结果相同,4个Y-mini STR复合扩增体系和对降解检材的分型成功率更高,敏感度一致,具有数据库兼容性。结论:本研究中的4个Y-mini STR复合扩增体系对降解检材的检测具有应用价值,敏感性较好,具有数据库兼容性,可以作为对降解检材分型时商业化试剂盒的补充。