常规生物透射电镜无污染手工制样和染色的要点

生物常规透射电子显微镜超薄制片是必不可少的基础性技术[1]。制样过程中,预防和减少染色污染不容忽视。染色污染常见于制样的最后环节。文献报道的关注点是减少或避免铅污染或铀污染[2-4],问题尚未完全解决。近年随着染色仪的应用[5],切片全自动化染色的污染现象基本排除。但全自动染色仪消耗试剂多,导致成本高、危害大[6]。相同条件下全自动染色的反差偏低。采用阵列缝硅胶染色板行批量手工染色,染色速度更快,反差更好,节省试剂的同时也减少了危害。为进一步避免手工制样的染色污染,本实验以小鼠组织为例,针对污染的主要环节,依次实验排除,总结出避免染色污染的理想条件,现介绍如下。

肾移植患者皮肤脓肿分离出糠秕马拉色菌1例报道

报道 1例从肾移植患者腹股沟脓肿中分离出糠秕马拉色菌 ,并通过实验研究其致病性。患者男性 ,33岁 ,因发热伴右侧腹股沟炎性结节 1周入院。3年前曾接受肾移植 ,术后持续使用免疫抑制剂。入院后多种广谱抗生素治疗无效 ,结节破溃形成脓肿及深溃疡。脓液及坏死组织培养有酵母样菌落生长 ,菌落涂片镜下见卵形出芽孢子 ,转种后仅在含菜子油的培养基生长 ,各分离株均鉴定为糠秕马拉色菌。将菌悬液经尾静脉注入免疫抑制的小鼠3d后可引起内脏器官的微脓肿和炎性反应 ,病灶中可见出芽孢子 ,透射电镜观察发现其细胞壁内侧有马拉色菌属特有的锯齿状结构。抗真菌治疗采用氟康唑内服和两性霉素 B外敷 ,分离株在治疗前对氟康唑和两性霉素 B均敏感 ,抗真菌治疗后的分离株仅对两性霉素 B敏感。本例报道提示糠秕马拉色菌可引起深部感染。