太空环境对人体近日节律的影响

近日节律是生物体适应外周环境产生的最重要的生物节律之一。太空环境影响人体的近日节律,进而引发睡眠障碍等一系列健康问题,影响宇航员高质量的执行太空任务。本文对太空环境如何影响近日节律以及采取措施改善近日节律紊乱进行述评,以供今后研究与探讨。

Tat蛋白对节律基因表达的影响

目的探讨HIV Tat-蛋白是否可以在细胞内影响主要节律基因Clock,Cry,Bmal1,Per的表达。方法用lipofectamineTM2000将HIV Tat表达质粒转入PC-12细胞,使Tat在PC-12细胞中表达。转染48h后提取mRNA和蛋白,分别通过实时荧光定量PCR技术和Western-blot技术检测节律基因在mRNA和蛋白水平表达的变化。结果研究结果显示,与未处理组和空质粒组相比,转染组Cry1的表达水平显著升高(P<0.05);Clock的表达水平显著降低(P<0.05);Bmal1和Per的表达水平无明显变化(P>0.05)。结论 HIV Tat影响了近日节律基因Cry1和Clock的表达,表现为Cry1表达水平升高,Clock表达水平下降,提示TAT蛋白可以影响节律基因的表达并且可能通过对近日节律的影响调节细胞生理功能。

节律基因Clock对胶质瘤C6细胞增殖的影响

目的探讨节律基因Clock对胶质瘤C6细胞增殖的影响及其机制。方法通过小片段干扰RNA(small interfering,siRNA)特异性沉默C6细胞Clock基因的表达。采用CCK-8试剂盒检测C6细胞的增殖情况,并利用流式细胞仪检测Clock基因沉默后C6细胞的细胞周期分布,通过荧光定量Q-PCR检测β-catenin和Tcf1mRNA的表达水平。结果与空白对照组和阴性对照组相比,SiClock转染组C6细胞增殖活力明显降低,S期细胞所占比例明显下降,同时β-catenin和Tcf1mRNA的表达也明显降低(均P<0.05)。结论干扰节律基因Clock表达,能够抑制胶质瘤细胞的生长。其机制可能是通过Wnt/β-catenin信号通路调节其作用。

NIH3T3细胞中miR-29b表达变化对mPer1和Egr2的影响

目的探讨NIH3T3细胞中miR-29b对血清诱导的立早基因Egr2 mRNA表达的影响及其机制。方法将体外培养NIH3T3细胞分为实验组、阴性对照组和空白对照组。实验组用miR-29b转染,阴性对照组空转,而空白对照组则不做任何处理。RT-qPCR检测近日节律基因mPer1与立早基因Egr2 mRNA的表达水平。结果实验结果显示,mPer1和Egr2的表达均发生了较明显的变化。与阴性对照组相比,空白对照组中mPer1和Egr2的mRNA表达水平无明显差异;而实验组中mPer1的mRNA表达降低了42%,Egr2的mRNA表达升高了49%。结论 miR-29b能上调Egr2的表达,其途径可能是通过抑制NIH3T3细胞近日节律基因mPer1的表达实现。

模拟微重力对NIH3T3细胞近日节律基因表达的影响

目的探讨模拟微重力对NIH3T3细胞近日节律基因Per1,Per2与Cry1 mRNA表达的影响。方法体外培养培养NIH3T3细胞分为实验组和对照组。实验组采用RCCS模拟微重力环境培养NIH3T3细胞;而对照组在正常重力环境下静置培养。两组均采用PMA刺激细胞,RT-qPCR检测Per1,Per2与Cry1mRNA的表达水平。结果对照组与实验组的近日节律基因Per1,Per2与Cry1的mRNA都呈现节律性。与对照相比,实验组节律基因的振幅减小,相位延迟。结论模拟微重力影响NIH3T3细胞近日节律基因Per1,Per2,Cry1的表达。