神经细胞凋亡和Caspase-3表达与脑损伤时间的关系

目的观察脑挫伤后神经细胞凋亡和调节因子C aspase-3表达的时序变化,探索损伤时间推断的新方法。方法采用TUNEL和免疫组化染色方法,结合图像分析技术对不同损伤时间组的脑挫伤组织进行染色观察和分析。结果①TUNEL和C aspase-3免疫组化染色的阳性细胞分布在挫伤灶中央及其周围的半影区,与远隔部位和对照组脑组织呈阴性染色形成明显对比;半影区比中央区更显著,两者差异有统计学意义(P<0.05)。②脑挫伤后随着损伤时间的延长,半影区TUNEL染色和C aspase-3表达逐渐增强,呈平行关系;48 h内两种染色方法的平均积分光密度(IOD)增加与损伤时间呈线性关系(r分别为0.93和0.69)。结论观察脑挫伤后神经细胞凋亡和C aspase-3的表达随损伤时间逐渐增强的变化规律,可以作为损伤时间推断的新方法。

杜氏利什曼原虫平原和荒漠疫区分离株LACK基因克隆及序列分析

目的 测定我国平原疫区和荒漠疫区杜氏利什曼原虫分离株活性蛋白激酶 C受体同源物 (L ACK)基因序列 ,并与山丘疫区分离株及国外利什曼原虫分离株进行比较。 方法 应用 RT- PCR扩增 L ACK基因 ,将其克隆入p UC18载体后用双脱氧链末端终止法测序 ,并与 Gen Bank中相关数据进行比较。 结果 用 RT- PCR成功扩增出约95 0 bp的 L ACK基因片段 ,测序结果表明其片段大小均为 94 2 bp,与 Gen Bank中多种利什曼原虫 L ACK基因的核苷酸序列一致性达 97%以上。我国山丘、平原和荒漠 3个不同疫区杜氏利什曼原虫分离株的 L ACK基因序列的一致性达95 %以上。 结论 获得了我国平原和荒漠疫区杜氏利什曼原虫 L ACK基因序列。我国 3个不同疫区杜氏利什曼原虫分离株的 L ACK基因具有高度同源性。

大鼠脑挫伤后神经细胞DNA片段化和含量变化与损伤时间的关系

目的观察大鼠脑挫伤后神经细胞DNA片段化和DNA含量的时序变化规律。方法建立自由落体打击大鼠脑挫伤动物模型,采用TUNEL和Feulgen′sDNA染色方法,结合图像分析技术进行研究。结果大鼠脑挫伤后随着损伤时间延长DNA片段化程度逐渐增强,而DNA含量逐渐降低。结论采用TUNEL和Feulgen′sDNA染色法观察伤后DNA片段化和DNA含量变化,可以应用于脑损伤时间推断的研究,探索推断损伤时间的新方法。

血清CA125水平与急性心肌梗死关系初探

目的观察急性心肌梗死患者血清糖类抗原125(CA125)水平的变化及其临床意义。方法心肌梗死组80例,在入院后第3天检查彩色多普勒超声心动图,测左室舒张末期内径(LVEDD)、左室射血分数(LVEF)、舒张早期和晚期最大血流速度比(E/A)、平均肺动脉压(mPAP),根据LVEF分A组(LVEF>0.50,36例)和B组(LVEF≤0.50,44例),抽血检测心肌型肌酸磷酸激酶同功酶(CKMB)、肌钙蛋白T(TnT)的峰值浓度,并在入院后72h测血清CA125水平。对照组50例,既往无器质性心脏病史和异常心脏彩超改变。排除引起CKMB、TnT、CA125升高的其他因素。结果心肌梗死组和对照组LVEF、E/A、mPAP、CA125、CKMB、TnT差异有统计学意义(P<0.05);A组和B组LVEF、E/A、mPAP、CA125差异有统计学意义(P<0.05);CA125与LVEF、E/A呈负相关(r=-0.784,P<0.05和r=-0.621,P<0.05)。结论急性心肌梗死患者血清CA125水平升高,并与左室收缩和舒张功能密切相关。

利钠肽C受体在利钠肽舒张猪冠状动脉血管中的作用

目的:探讨利钠肽C受体是否参与3种利钠肽的舒张血管作用。方法:采用离体血管环灌流方法,观察心房利钠肽(ANP)、脑钠肽(BNP)、C型利钠肽(CNP)、硝酸甘油和利钠肽C受体激动剂cANF4-23对猪冠状动脉的作用;然后加入利钠肽C受体阻断剂cANF4-28观察利钠肽舒张血管作用的变化。实验分为8组(n分别=8):分别为ANP组、BNP组、CNP组、硝酸甘油组、cANF4-23组、cANF4-28+ANP组、cANF4-28+BNP组和cANF4-28+CNP组。结果:CNP组冠状动脉最大舒张率(36.5±4.0)%低于ANP组(60.4±22.6)%、BNP组(68.5±11.5)%和硝酸甘油组(53.8±6.9)%,差异均有统计学意义(P均<0.05);其余各组间比较差异无统计学意义(P均>0.05)。cANF4-28+CNP组最大舒张率为(21.3±10.3)%与CNP组(36.5±4.0)%比较冠状动脉最大舒张率明显减弱(P<0.05),差异有统计学意义。cANF4-23组冠状动脉最大舒张率为(42.4±17.6)%,与CNP组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:3种利钠肽对猪冠状动脉均有良好的扩张作用;利钠肽C受体参与了CNP对猪冠状动脉的舒张作用,而没有参与ANP和BNP的扩张冠状动脉作用。

大鼠脑挫伤DNA含量变化与损伤时间的关系

目的观察大鼠脑挫伤后DNA含量的时序变化规律。方法建立自由落体打击大鼠脑挫伤动物模型，采用Feulgen’s DNA染色方法，结合图像分析技术。结果损伤侧大脑皮质浅层和海马区平均积分光密度（IOD）变化呈：24h内迅速下降，24—96h有缓慢上升趋势；伤后24h内上述两区域平均积分光密度均与损伤时间呈线性关系，R^2分别为0．668和0．615。可导出直线回归方程。结论采用Feulgen’s DNA染色法结合图像分析技术观察伤后DNA含量变化，可以应用于脑损伤时间推断的研究，探索推断脑损伤时间的新方法。

右侧支气管动脉和肋间后动脉的应用解剖学研究

目的 为临床动脉灌注治疗中晚期肺癌提供解剖学依据。方法 解剖、观察 198例成年尸体的右侧肋间后动脉与右支气管动脉的共干类型、右侧支气管动脉起点与椎骨的对应关系 ;测量右侧第三肋间后动脉在腋中线的外径。结果 右侧第三肋间后动脉与支气管动脉的共干类型有四种 ;右侧支气管动脉共干起点平对第 2～ 8胸椎 ,右侧第三肋间后动脉在腋中线的外径平均为 0 .78m m± 0 .33m m(0 .0 5 8mm～ 1.8m m,n=137)。

同型半胱氨酸、半胱氨酸在动脉粥样硬化发病机制中作用的对照研究

目的以动脉粥样硬化(As)病灶中的主要细胞类型—血管平滑肌细胞为模型,对比研究同型半胱氨酸(Hcy)和半胱氨酸(Cys)在致As发病效应上的异同,以期为Hcy作为As独立危验因子的分子机制提供有比较的证据。方法体外培养人脐静脉血管平滑肌细胞(VSMCs),用不同浓度的Hcy和Cys作用于细胞24h后:(1)用分光光度比色法测定细胞中SOD和MDA的含量;(2)流式细胞术检测细胞凋亡率,半定量RT-PCR方法检测caspases-3 mRNA的表达;(3)MTT法测定细胞的增殖率;(4)用1000μmol/LHcy和Cys分别作用VSMCs24、48和72h后,MS-PCR法检测ERα启动子区甲基化的状态,半定量RT-PCR法检测ERα mRNA的表达。结果(1)Hcy可导致细胞内MDA、SOD呈剂量依赖性增加,Cys使MDA、SOD增加的效应远弱于Hcy(P<0.01)。(2)流式细胞术、caspases-3 mRNA的表达和MTT试验的结果显示,Hcy、Cys对血管平滑肌细胞凋亡率和增殖率的影响差异不太明显。(3)Hcy显著增加ERα基因启动区的甲基化修饰,并使ERα mRNA的表达进行性减少。Cys不影响ERα启动子区的甲基化状态,对ERα mRNA表达的影响也远小于Hcy。结论氧化应激对DNA甲基化修饰的影响可能在Hcy致As发病的机制中占据着重要的地位,这也可能是Hcy和Cys在As发病机制中作用不同的重要原因。

C型利钠肽舒张兔主动脉作用机制的探讨

目的探讨C型利钠肽(CNP)舒张血管的受体和通道机制。方法采用兔胸主动脉环张力测定法,观察CNP和C型利钠肽受体(NPR-C)激动剂cANF4-23对肾上腺素(NE)10μmol/L或氯化钾(KCl)60 mmol/L预收缩血管的舒张作用,及多种钾通道阻断剂对两者舒血管效应的影响。结果 1μmol/L CNP和cANF4-23对血管的最大舒张率分别为(33.5±5.9)%、(38.4±10.6)%,两组舒血管作用比较差异无统计学意义(P>0.05);NPR-C受体阻断剂能减弱CNP的舒血管作用〔(19.8±8.3)%〕;高钾预收缩后CNP、cANF4-23对血管舒张作用明显降低(P<0.01);优降糖或氯化钡能明显抑制CNP的血管舒张作用(P<0.05);氯化钡使cANF4-23的血管舒张作用明显降低(P<0.05)。结论 NPR-C/内向整流钾通道(KIR)、NPR-C/钙通道和B型利钠肽受体(NPR-B)/ATP敏感钾通道(K)参与了CNP对兔主动脉的舒张作用。

人心房肌细胞钠通道的增龄性变化

目的通过观察人心房肌细胞钠通道的增龄性变化，探讨心房颤动（房颤）发病率随年龄增加的原因。方法23例接受换瓣手术的患者按年龄分为成年组和老年组，所有患者均为正常窦性心律，采用全细胞膜片钳技术记录右心耳细胞的钠电流。结果两组的钠电流密度和时间依赖性恢复动力学差异均无统计学意义，但老年组电压依赖性失活曲线向更正的方向偏移。结论增龄对钠通道电流和恢复动力学无影响，老年组患者房颤发病率增高可能与钠通道无关。

HLA-G的遗传、功能及临床意义

HL A- G属非经典的 HL A 类分子 ,与经典的 HL A 类分子相比它有 3个特点 :(1)多态性水平低 ;(2 )体内分布局限于特定组织 ;(3)由于内含子和外显子间的剪接位点改变可形成 4种膜结合型和两种可溶型 HL A- G异构体。过去几年大量研究结果表明 ,HL A- G是一种免疫耐受分子。在此将系统地介绍 HL A- G的遗传多态性、表达、功能、对免疫相关疾病的影响、演变及 HL A-