人激肽释放酶基因克隆及真核表达的实验研究

为构建人激肽释放酶（human kallikrein,hk）基因真核表达细胞系,从人胎胰中用RT-PCR方法扩增了hk基因全序列及其前导肽序列,克隆到真核表达质粒pCDNA3.1中,得到含全长hk cDNA及其前导肽序列的真核表达质粒pCDNA3-hk,并用脂质体lipofectamine介导其转化到野生型CHO细胞株中,获得了能稳定表达hk蛋白的CHO细胞系CHO-hk。检测CHO细胞及其培养基中hk活性水平及培养基对兔血压的影响。结果表明,97％的hk分泌到细胞外,其中62％左右以活性形式存在,另38％以酶原形式存在。培养基浓缩液具有显著降血压作用。说明CHO-hk细胞系能分泌具完整生物活性的hk,为后续生产治疗高血压的基因工程药物打下了基础。

老年人前后牙牙髓感觉功能昼夜节律性的比较研究

目的:比较老年人前、后牙牙髓感觉昼夜节律的差异,以指导选择老年人缺失牙修复最佳就医时间。方法:在24h内7个等距间隔时间点,测定20名受试老年人上颌中切牙(切牙组)和下颌第一恒磨牙(磨牙组)牙髓活力的阈值,运用Halberg余弦法分析切牙组和磨牙组牙髓感觉功能的生物节律,并比较二者的差异。结果:两者整体变化趋势一致,感觉阈值的最高峰和最低谷分别出现在0:00与12:00。磨牙牙髓感觉阈值的振幅、振幅比中值大于切牙,整体水平和中值略高于切牙。结论:老年人切牙与磨牙的牙髓感觉功能均具有昼夜节律性,感觉最迟钝和最敏感的时间分别在0:00与12:00。