miR-338-3p靶向核因子κB受体活化因子配体影响牙槽骨成骨细胞增殖及凋亡

背景:miR-338-3p能够抑制破骨细胞分化,下调核因子κB受体活化因子配体水平能够促进骨形成。然而miR-338-3p是否通过调控核因子κB受体活化因子配体表达影响牙槽骨成骨细胞增殖、凋亡尚不清楚。目的:探究miR-338-3p靶向核因子κB受体活化因子配体对牙槽骨成骨细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法:分离人牙槽骨成骨细胞,对其进行细胞转染及Wnt-C59(Wnt/β-catenin通路抑制剂)处理,分为转染对照组、miR-338-3p组、miR-338-3p+对照组、miR-338-3p+核因子κB受体活化因子配体组和miR-338-3p+Wnt-C59组。双荧光素酶实验验证miR-338-3p对核因子κB受体活化因子配体的调控作用;CCK-8、EdU染色检测细胞增殖水平;流式细胞术检测细胞周期和凋亡水平;RT-qPCR检测细胞miR-338-3p、核因子κB受体活化因子配体、Wnt-3a、β-catenin、糖原合酶激酶3βmRNA表达水平;Western Blot检测细胞核因子κB受体活化因子配体、增殖细胞核抗原、Ki67、细胞周期蛋白D1、Bcl-2、Bax、天冬氨酸半胱氨酸蛋白酶3、Wnt-3a、β-catenin、糖原合酶激酶3β蛋白表达水平。结果与结论:①miR-338-3p靶向调控核因子κB受体活化因子配体;②过表达miR-338-3p后,细胞存活率、EdU阳性细胞率、S期细胞比例升高,细胞凋亡率降低,miR-338-3p、增殖细胞核抗原、Ki67、细胞周期蛋白D1、Bcl-2、Wnt-3a、β-catenin mRNA和蛋白水平升高,Bax、天冬氨酸半胱氨酸蛋白酶3、核因子κB受体活化因子配体、糖原合酶激酶3βmRNA和蛋白水平降低(均P<0.05);③过表达核因子κB受体活化因子配体或Wnt-C59处理能够减弱过表达miR-338-3p对细胞增殖、凋亡的影响(均P<0.05);④结果表明,miR-338-3p靶向核因子κB受体活化因子配体表达可促进牙槽骨成骨细胞增殖,并抑制细胞凋亡,其可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路发挥作用。

葛根素对大鼠正畸牙移动过程中牙周组织的影响

目的探讨葛根素(Pue)调节丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路对大鼠正畸牙移动过程中牙周组织的影响。方法取SD大鼠随机分为对照组(C组)、模型组(M组)、葛根素低剂量(Pue-L组)、葛根素高剂量(Pue-H组)、葛根素(200 mg/kg)+茴香霉素(ANS)组(Pue+ANS组),每组12只,除C组外,其余各组大鼠建立正畸牙模型,然后以葛根素和茴香霉素分组干预各组大鼠后检测其牙齿移动距离、牙槽骨骨密度、骨微结构、血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、骨保护素(OPG)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)及单核细胞趋化性蛋白-1(MCP-1)水平,检测牙周组织中IL-1β、TNF-α、MCP-1、IL-6水平及MAPK/NF-κB通路相关蛋白表达。结果与C组相比,M组大鼠牙槽骨骨微结构受损,牙齿移动距离、血清IL-1β、TNF-α、IL-6、MCP-1及RANKL水平、p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-NF-κB p65/NF-κB p65增高(P<0.05);与M组相比,Pue-L、Pue-H组大鼠牙齿移动距离、牙槽骨骨密度、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数目(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)、血清OPG水平均升高(P<0.05),骨小梁间隙(Tb.Sp)、血清IL-1β、TNF-α、IL-6、MCP-1及RANKL水平、p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-NF-κB p65/NF-κB p65均降低,Pue-H组大鼠上述各指标变化比Pue-L组更强;与Pue-H组相比,Pue+ANS组大鼠牙齿移动距离、牙槽骨骨密度、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数目(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)、血清OPG水平均降低(P<0.05),骨小梁间隙(Tb.Sp)、血清IL-1β、TNF-α、IL-6、MCP-1及RANKL水平、p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-NF-κB p65/NF-κB p65均升高(P<0.05)。结论Pue可抑制MAPK/NF-κB信号激活,进而减少炎性因子释放,抑制正畸牙模型大鼠牙周组织炎症,减轻其牙槽骨骨量丢失及微结构损伤,并加速正畸牙移动。