幽门螺杆菌诱导人胃上皮细胞系(GES-1)发生自噬

目的观察幽门螺杆菌感染人胃上皮细胞后自噬的发生及变化情况,为进一步研究幽门螺杆菌感染后诱发自噬反应的相关研究奠定基础。方法采用中性红摄入法确定H.pylori感染GES-1细胞的浓度,并以此浓度感染GES-1细胞不同时间。通过Western blot检测感染不同时间点GES-1中LC3I/II或P62蛋白表达,免疫荧光染色观察自噬体的出现。在使用自噬抑制剂3MA、E64d、pepstatin A处理被感染的GES-1后,利用上述方法监测细胞自噬变化情况。结果 H.pylori(22695)感染GES-1细胞最佳浓度为m.o.i=400。在GES-1细胞被感染后2 h即可观察到自噬的发生,且呈时间依赖性,于8 h到达高峰,24 h开始恢复基础水平。使用3MA处理细胞后自噬水平降低,自噬体明显减少。使用E64d和pepstatin A阻断被感染细胞中自噬溶酶体的形成,LC3I/II与P62蛋白因无法通过自噬途径降解而较未处理组增加。结论 H.pylori(22695)能够诱导人胃上皮(GES-1)发生自噬,且能被自噬调节剂调控。

白细胞滤器联合血液回收机用于产科自体血回收的研究进展

术中自体血回收(intraoperative cell salvage,IOCS)一直以来由于白细胞污染、羊水栓塞的风险、胎儿红细胞引起的母体同种异体免疫反应等顾虑在产科中的应用受到一定的限制,近年来随着白细胞滤器(leucocyte depletion filters,LDF)的应用,其在产科得到了很好的开展。LDF为膜状结构,可滤除产科回收血中的杂质及污染物,如:胎儿鳞状上皮细胞、组织因子、甲胎蛋白、板层小体等羊水成分以及白细胞、胎儿红细胞、细菌等。但同时亦存在相关并发症,应防止加压,谨慎使用。临床上应对LDF应用于产科的安全性进行深入的研究。

癫痫伴全面性发育迟缓患儿1例的临床特征及PAK1基因变异分析

目的探讨1例癫痫伴全面性发育迟缓患儿的临床特征与遗传学病因。方法选取2021年4月1日于四川大学华西第二医院小儿神经科就诊的1例癫痫伴全面性发育迟缓患儿为研究对象。收集患儿临床资料,抽取患儿及其父母外周静脉血样,应用全外显子组测序(WES)对患儿进行基因检测,采用Sanger测序进行家系验证,并对候选变异进行生物信息学分析。设定检索年限为2000年1月1日至2021年5月31日,在万方数据知识服务平台、中国知网、PubMed、ClinVar、Embase等数据库中,检索PAK1基因变异相关性癫痫病例报道,对该病患儿临床表型及PAK1基因变异情况进行总结。结果患儿为男性,2岁2个月,临床表现为癫痫、全面运动发育迟缓与大头畸形。WES检测结果提示,患儿携带PAK1基因c.1427T>C变异。经Sanger测序验证,患儿父母PAK1基因均为野生型,提示患儿为新发变异。生物信息学分析:PAK1基因c.1427T>C变异在dbSNP、OMIM、HGMD及ClinVar等数据库中,仅见1篇文献报道。在ExAC、1000 Genomes及gnomAD等数据库中,亚洲正常人群该变异未见携带频率。IFT、PolyPhen-2、LRT、Mutation Taster及FATHMM等在线软件预测结果均提示该变异对编码蛋白功能影响可能有害。根据美国医学遗传学与基因组学学会(ACMG)制订的《序列变异解释的标准和指南》,该变异评级为可能致病性变异。结论PAK1基因c.1427T>C变异可能为该癫痫伴全面性发育迟缓患儿的遗传学病因。本研究为该病患儿临床诊断与遗传咨询提供了参考依据。

细胞自噬治疗细菌感染的潜在价值

细胞自噬是具进化保守性的细胞适应性机制,能降解细胞内容物,维持细胞稳态,保证细胞的生存。当细胞面临某些细菌感染时,自噬通过直接包裹胞质内游离的细菌、帮助吞噬体清除其包含的细菌、抵抗细菌毒素等方式保护受感染细胞。因此,将自噬抵抗细菌的作用应用于治疗和预防感染性疾病具有一定的可行性。本文将自噬在细菌感染中的作用及其治疗感染性疾病的潜在价值进行综述。

重症肌无力患儿呼吸道感染临床分析

目的探讨重症肌无力(MG)患儿合并的呼吸道感染的临床特征及防治对策。方法分析2005年4月-2015年11月合并呼吸道感染的22例住院MG患儿的临床资料,总结其呼吸道感染的类型、病原菌及治疗情况,分析影响呼吸道感染的因素。结果 MG患儿以下呼吸道感染为主,占68.2%(15/22);病原菌检出率为36.4%(4/11),86.4%(19/22)的患儿接受了抗生素治疗,其中14例为一联抗生素治疗;下呼吸道感染的MG患儿较上呼吸道感染者有咳嗽无力表现的比例更高,差异有统计学意义(P<0.05);有吞咽困难表现及使用激素对MG患儿上下呼吸道感染的发生无显著影响。结论 MG患儿合并呼吸道感染时多累及下呼吸道,尤其是有咳嗽无力表现者,大部分需要抗生素治疗;应早期识别该类患儿的临床特征,及时给予正确处理。

上调自噬对幽门螺杆菌感染后人胃上皮细胞GES-1的保护作用

目的观察幽门螺杆菌感染人胃上皮细胞后自噬的发生及变化情况,并探索上调幽门螺杆菌感染后人胃上皮细胞GES-1自噬反应对细胞是否具有一定的保护作用,为进一步研究幽门螺杆菌感染与细胞自噬奠定基础。方法使用一定浓度的幽门螺杆菌感染人胃上皮细胞GES-1,通过Western blot检测感染不同时间点GES-1中微管相关蛋白轻链3Ⅰ/Ⅱ(LC3Ⅰ/Ⅱ)的转换与Beclin 1的表达,免疫荧光染色观察自噬体的出现。确定Xestospongin B处理人胃上皮细胞GES-1的浓度后,将培养细胞分为三组:幽门螺杆菌感染组、幽门螺杆菌感染+Xestospongin B组、正常培养组。首先确定诱导剂对感染后自噬的上调作用,然后使用微毛细管式细胞分析仪检测细胞凋亡和活性,比较三组细胞存活以及凋亡的差异。结果在GES-1细胞被感染后2 h即可观察到自噬的发生,且呈时间依赖性,于8 h到达高峰,24 h开始恢复基础水平。加诱导后细胞自噬水平上调。单纯感染组细胞活性先迅速降低,2 h之后细胞活性平稳降低,凋亡率逐渐增加。加诱导剂组细胞活性在感染后的6 h内细胞活性稍有降低,6 h后细胞活性开始增加,凋亡率降低。结论幽门螺杆菌能够诱导人胃上皮GES-1发生自噬,Xestospongin B能够上调幽门螺杆菌感染后人胃上皮细胞GES-1的自噬水平,并且上调自噬反应能够对幽门螺杆菌感染的人胃上皮细胞GES-1起到一定保护作用。