GnRH脉冲治疗与男性低促性腺激素性性腺功能减退症生育力保护

低促性腺激素性性腺功能减退(hypogonadotropic hypogonadism,HH)是由于下丘脑促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)神经元功能受损,GnRH合成、分泌或作用障碍,导致垂体分泌促性腺激素减少,进而引起性腺功能不足导致的一组疾病。HH造成性激素合成减少,青春期前起病的患儿表现为青春期延迟或缺失,成年生育期的患者则表现为性腺功能减退和不育。目前为恢复男性HH患者生育力常用的治疗方案是GnRH脉冲式治疗(微泵脉冲)、绒促性素(HCG)单用或联合尿促性素(HMG)。GnRH脉冲治疗通过便携式微型泵定时定量皮下给药,连续的脉冲式给予戈那瑞林等GnRH类似物,使得低下的垂体功能重建后产生促性腺激素,从而诱导性腺的发育,合成性激素并促进生殖细胞的增殖、分化和成熟,实现成熟精子的生成。GnRH脉冲式治疗方案最接近于正常生理状态,适用于垂体功能基本正常的患者。在男性生育力重建的治疗过程中,同时重点关注生育力保护,本文就GnRH脉冲治疗与男性HH患者生育力的保护进行探讨,以期指导临床实践。

逆行射精不育男性采用睾丸穿刺取精术联合卵胞浆内单精子注射的治疗价值

目的探讨睾丸穿刺取精术(TESA)联合卵胞浆内单精子注射(ICSI)对逆行射精(RE)所致男性不育患者的临床结局的影响。方法选择2018年1月至2021年12月在我院男科不育门诊就诊的因无法通过尿液回收足够活动精子而选择TESA联合ICSI治疗的12例RE不育患者为研究对象,分析纳入患者的病因,口服碳酸氢钠碱化尿液后尿液及精液标本中精子质量,及行TESA联合ICSI治疗的临床妊娠结局。结果共纳入12例RE患者,其中9例为糖尿病,2例为直肠癌术后,1例为特发性RE(未知具体病因)患者;12例RE患者仅3例患者可获得精液,检测精液精子浓度发现,患者7为无精子症,患者5和患者6的精子浓度均<3.0×10^(6)个/ml,且精液标本中均未见活动精子;常规碱化尿液后,检测精子浓度发现,12例尿液标本中9例精子浓度<1×10^(6)个/ml;检测尿液精子活力发现,12例尿液标本中9例未见活动精子;经TESA取精后分析精子质量发现,12例RE患者睾丸组织悬液中均查到0~1个精子/高倍视野(HPF),且查到有C级活动精子,精子存活率为75%(50%,80%);TESA联合ICSI治疗共22个周期,其中14个周期进行了胚胎移植(7个新鲜胚胎移植周期及7个冻融胚胎移植周期),HCG阳性率为50%(7/14),临床妊娠率为35.7%(5/14)。结论对于尿液中不能回收到足够数量及活动精子用于辅助生殖的RE患者,TESA结合ICSI是解决RE患者生育问题的一种有效的治疗方法。

四川地区2 754名供精志愿者染色体筛选及结果分析

目的分析四川地区供精志愿者染色体筛选结果,为精子库排除志愿者遗传缺陷提供依据。方法选取2013年1月至2022年12月于四川大学华西第二医院生殖男科/人类精子库进行精液筛查的2754例供精志愿者,分析其染色体核型结果。据染色体结果将供精志愿者分为染色体正常组(2661例)、染色体核型异常组(7例)及染色体多态性组(86例),比较3组间的人群特征及精液参数。结果2754例供精志愿者中,有93例供精志愿者为染色体核型异常或染色体多态性,检出率为3.38%(93/2754)。染色体正常组、染色体核型异常组及染色体多态性组3组间的年龄、身高、体重及体质量指数(BMI)均无显著差异(P>0.05);3组间冷冻前及复苏后的精液质量也均无显著差异(P>0.05)。93例染色体核型异常或染色体多态性的供精志愿者中,染色体核型异常的志愿者有7例,占比7.53%(7/93);染色体多态性86例,占比92.47%(86/93)。染色体多态性中以D组(13、14、15号)和G组(21、22及Y)染色体随体区变异最多,多态性占比34.88%(30/86);其次为25例1号、9号、16号染色体次缢痕增加,多态性占比29.07%(25/86);9号染色体臂间倒位24例,多态性占比27.91%(24/86);Y染色体多态性变异7例,多态性占比8.14%(7/86)。结论对供精志愿者的染色体结果进行分析,严格把握其遗传学筛查标准,当志愿者出现染色体核型异常或染色体多态性时需将志愿者淘汰,以降低供精子代的遗传风险及出生缺陷。

男性肿瘤患者生育力保存障碍的质性研究

采用目的抽样选取我国2个人类精子库10名工作人员作为研究对象,采用描述性质性研究进行半结构式访谈,对访谈结果进行主题分析,共提炼出一级主题5个:(1)男性肿瘤患者生育力保存现状不乐观;(2)信息因素影响男性肿瘤患者生育力保存;(3)经济因素影响男性肿瘤患者生育力保存;(4)治疗因素影响男性肿瘤患者生育力保存;(5)伦理因素影响男性肿瘤患者生育力保存。男性肿瘤患者生育力保存应当被重视。可从扩宽信息知晓渠道、减少患者费用负担、降低保存时间成本、促进伦理共识建立等方面出发推动其发展。

四川地区精液分析室间质量评价初探

目的了解四川地区不同实验室对精液分析检测结果的差异,为提高四川地区整体精液分析结果的准确性及可比性打下基础。方法分别制备1个水平的精子浓度及精子形态质控品,2个水平的精子活力质控品,发放给四川地区17家男科实验室或检验科,回收检测结果并分析参与实验室的均值和实验室间变异系数(CV)。结果共15家实验室反馈了数据,其中15家反馈精子浓度检测结果的实验室中有10家(67%)实验室采用计算机辅助精子分析系统(CASA)对浓度质控品进行分析,8家(53%)使用计数板类型为Makler计数板。14家反馈精子活力及形态检测结果的实验室中,10家(71%)实验室采用人工分析方式对精子活力质控品进行分析,14家(100%)实验室采用人工分析方式对精子形态进行分析。实验室间精子浓度CV值为29.84%,2个活力质控品中前向运动精子比例CV值分别为18.30%及12.97%,正常精子形态百分比CV值为72.13%。结论该研究为首次在四川地区开展精液分析的室间质量评价活动,精液分析室间质量评价中,前向运动精子比例CV值最低,正常精子形态比例CV值最高。亟需对实验室技术人员进行标准化培训和质量控制,以提高四川地区各实验室精液分析结果的准确性,使不同实验室间的结果具有可比性。

西南地区4 278例男性不育患者Y染色体微缺失及核型异常的发生率及特征

目的分析西南地区男性不育患者Y染色体无精子症因子AZF微缺失以及核型异常的发生频率及特征。方法选取2018年9月至2023年7月就诊于四川大学华西第二医院的4278例不育男性作为研究对象,回顾性分析患者Y染色体微缺失检测和G显带染色体核型分析的结果。结果共收集4278例患者的临床资料,其中无精症2048例,重度少精症1536例,轻~中度少精症310例,精子浓度正常的不育患者384例。染色体核型分析在2421例中共检出异常核型异常213例,检出率为8.80%。在4278例患者中共检出422例Y染色体微缺失,检出率为9.86%,其中无精症、重度少精症、轻~中度少精症和精子浓度正常但不育患者的检出率分别为10.4%、13.28%、0.97%和0.52%。结论Y染色体微缺失检测及染色体核型分析是评估男性不育原因的重要工具,及早确诊将有助于对生育方式的选择。

36例逆行射精患者病因及精子质量分析

目的探讨男科不育门诊逆行射精患者的病因、精液标本及尿液标本中的精子质量。方法对2018-2020年在该院男科不育门诊就诊的患者进行回顾性分析。收集由逆行射精导致不育的36例男性患者资料及检测结果进行分析。结果不育患者中逆行射精发生率为0.22%(36/16210)。不育门诊的逆行射精最常见的病因是糖尿病72.22%(26/36)。36例患者中仅有7例患者有精液排出留取精液标本,7例精液标本中精子质量较差,71.43%(5/7)的精液体积异常(小于1.5 mL)。36例尿液标本中精子质量也较差,浓度多数较低,27例小于1×10^(6)/mL,其余9例浓度大于1×10^(6)/mL[均值为7.9×10^(6)/mL,范围为(2.1~14.0)×10^(6)/mL]。尿液标本中精子活力较差,19例无活动精子,11例活力小于1.0%,6例活力大于1.0%(均值为24.3%,范围为3.0%~50.0%),其中仅2例活力正常(活力大于32.0%)。结论不育门诊逆行射精患者最常见病因是糖尿病。逆行射精患者精液及尿液标本的精子质量较差。

干扰LINC00308促进miR-634对前列腺癌细胞增殖与凋亡的影响

目的研究干扰长链非编码RNA(lncRNA)LINC00308是否通过促进微小RNA(miRNA)-634影响前列腺癌细胞的增殖与凋亡。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测前列腺癌组织中LINC00308的表达。利用LINC00308小干扰RNA(si-LINC00308)转染前列腺癌细胞PC-3M和DU145,构建干扰LINC00308的细胞,采用qRT-PCR检测LINC00308和miR-634的表达水平,流式细胞术评估细胞的周期与凋亡,蛋白质印迹法(Western Blot)检测细胞核相关抗原Ki67(Ki67)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Caspase3)蛋白的表达。starBase在线工具预测结合双荧光素酶报告实验分析LINC00308对miR-634的靶向调控。在PC-3M和DU145细胞中转染miR-634 mimic,利用上述方法检测miR-634在细胞增殖凋亡中的作用。结果前列腺癌组织中的LINC00308表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05)。干扰LINC00308显著提高PC-3M和DU145细胞的miR-634的表达水平、G0-G1期细胞比例、细胞凋亡率和Caspase3蛋白水平,明显降低S期细胞比例、Ki67蛋白水平(P<0.05)。LINC00308靶向调控miR-634的表达。转染miR-634 mimic显著增加PC-3M和DU145细胞的G0-G1期细胞比例、凋亡率和Caspase3蛋白水平,明显减少S期细胞比例和Ki67蛋白水平(P<0.05)。结论干扰LINC00308可以促进miR-634的表达,阻滞前列腺癌细胞周期,并诱导细胞凋亡。

梨形头畸形精子致病机制及相关研究进展

夫妻双方在无避孕措施性行为的情况下,两年未受孕可诊断为不育症[1]。不育症在育龄期夫妻中发病率约15%,不育原因中约20%为男方因素、34%为女方因素、38%为双方混合因素、8%为先天性原发因素[2-3]。男性不育病因复杂,研究[4-5]表明,畸形精子是造成男性不育的原因之一。

三种精子存活率试验结果对比

目的探讨使用单用伊红试验和低渗膨胀试验检测精子存活率,选择临床最佳检测精子存活率方法。方法选择2020年6月来该院男科门诊100例男性患者的精液样本。分别用伊红-苯胺黑试验、单用伊红试验以及低渗膨胀试验三种方法检测精子存活率,比较三种方法存活率结果是否有差异。结果伊红-苯胺黑、单用伊红以及低渗膨胀三种试验方法第一次重复样本检测不可接受率分别为8%、5%、10%,低浓度样本重复10次检测结果稳定性CV值分别为5.3%、4.5%、5.9%,中浓度样本重复10次检测结果稳定性CV值分别为3.3%、2.8%、3.3%,高浓度样本重复10次检测结果稳定性CV值分别为2.7%、3.2%、3.9%。存活率结果比精子总活力分别高出16.5%、15.5%和15.5%。三种方法存活率结果分别为84.00%、83.00%和83.00%,两两比较结果均差异均无统计学意义(P>0.05)。三种检测方法存活率结果与精子总活力均呈显著正相关,r值分别为0.609、0.538和0.537(P<0.001)。结论三种检测方法结果无显著差异性,重复性及稳定性均较好。低渗膨胀试验由于避免了精子被染液染色更适用于辅助生殖实验室;单用伊红试验方便快速适用于标本量大的男科实验室;伊红-苯胺黑试验可用于室内质量控制及室间质量评价。

人精液液化的显微镜下特征观察

目的比较观察精浆内凝胶状物质消失前后精液分析主要指标的差异，了解该现象在判定精液液化中的意义。方法体外采精后立即充池入精子计数板，置光学显微镜下观察其液化过程中凝胶状物质的形态变化，并于胶状物质消失前后进行精液分析。结果人精液液化过程中可以通过显微镜观察到精浆中凝胶状物质呈现特征性的形态变化，32份精液分析结果显示，前向运动精子和精子活动率在此形态变化前后分别为（30．3±12．4）％和（45．0±14．9）％、（44．9±12．7）％和（59．0±15．3）％，差异有统计学意义（t=-1．130和5．023，P均〈0．01），而精子密度在液化前后分别为（55．3±33．9）×10^6／ml和（62．1±32．3）×10^6／ml，差异无统计学意义（t=1．180，P〉0．05）。结论通过显微镜观察到精液中凝胶状物质呈特征性变化，该特征可作为一种客观和简易可行的判定精液液化的手段。

一例原发性无精子症的染色体芯片分析

目的检测1例原发性无精子症的基因组拷贝数变异（copy number variations，CNVs），寻找可能致病的遗传学变异。方法对患者进行常规G显带核型分析，Y染色体微缺失诊断，之后应用array-CGH芯片进行全基因组高分辨率比较基因组杂交扫描分析。结果患者核型分析结果正常，未见Y染色体微缺失；array—CGH分析显示患者外周血基因组存在1个病理性缺失，位于5q11．1-5q11．2之间，长度为6．785Mb。结论5q11．1-5q11．2长片段缺失可能是本例无精子症患者的致病原因。

芳香化酶抑制剂改善青少年身高的临床应用专家共识

芳香化酶抑制剂在全球和中国都广泛应用于改善身高,但因属于超适应证用药,且应用时间相对较短,故国内外对用药的适应证、疗效、不良反应缺乏一致的认识和专家共识。因此中国老年保健协会生长发育和性腺疾病分会和中国医师协会青春期医学与健康专业委员会组织国内28位生长发育方面专家,以牛津大学循证医学中心临床证据水平分级和推荐级别为参照,围绕芳香化酶抑制剂治疗儿童矮身材、改善成年终身高的疗效、不良反应、注意事项、使用剂量和用药疗程等问题,筛选出初步推荐意见。再结合德尔菲法评价意见最终确定14条推荐意见,以规范芳香化酶抑制剂改善青少年身高的临床应用。