miRNA-148b-3p调节胎盘滋养细胞GLUT1表达与ICP子代糖代谢紊乱关系的研究

目的研究miRNA-148b-3p在妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)孕妇胎盘组织中的表达及对滋养细胞葡萄糖转运蛋白-1(glucose transporter 1,GLUT1)的调控,探索ICP孕妇子代糖代谢异常的可能机制。方法收集2017年3月至2018年1月于四川大学华西第二医院产科行剖宫分娩的ICP孕妇30例,正常妊娠孕妇30例,分别收集胎盘组织、母血及脐血,提取胎盘组织miRNA,母血及脐血送检生化指标。采用实时荧光定量PCR验证miR-148b-3p在两组胎盘中的表达差异。通过lipofectaine3000脂质体包裹miR-148b-3p inhibitor/mimics转染人滋养细胞HTR-8,实时荧光定量PCR验证转染后细胞中miR-148b-3p的表达水平;Western blot检测转染后细胞中GLUT1的表达水平。结果 ICP孕妇母血空腹血糖(fasting blood glucose,FPG)及其胎儿脐血胰岛素水平较对照组增高(P<0.05)。ICP组胎盘组织中miR-148b-3p表达量较对照组下降(P<0.05)。转染miR-148b-3p inhibitor后,与转染inhibitor control比较,HTR-8细胞中miR-148b-3p的表达水平下降(P<0.05),GLUT1蛋白的表达量升高(P<0.05);转染miR-148b-3p mimics后,与转染mimics control比较,HTR-8细胞中miR-148b-3p的表达水平上升(P<0.05),GLUT1蛋白的表达量降低(P<0.05)。结论 miR-148b-3p可能通过对胎盘滋养细胞GLUT1表达的负向调控参与了ICP子代糖代谢异常的发生。

正常中国人及内源性高甘油三酯血症患者GSTM1、GSTT1基因多态性的研究

目的探讨谷胱甘肽S-转移酶系（Glutathione S-transferases，GSTs）中GSTM1和GSTT1基因多态性与正常汉族人及内源性高甘油三酯血症（endogenous hypertriglyceridemia，HTG）患者血脂及载脂蛋白水平的相关性。方法采用多重PCR对237名正常人和102例HTG患者GSTM1和GSTT1基因的多态性进行分析，采用酶法和单向免疫扩散法对血脂和载脂蛋白水平进行测定。结果GSTM1非缺失基因型（GSTM1＋）和缺失基因型（GSTM1～）携带者的频率在正常对照组分别为39．2％和60．8％，在HTG组分别为47．6％和52．4％；GSTT1非缺失型（GSTT1＋）和缺失型（GSTT1-）者的频率在正常对照组分别为51．5％和48．5％，在HTG组分别为57．3％和42．7％。未见两组之间上述基因的基因型频率存在差异。进一步分析发现，正常汉族人GSTT1-／GSTM1-双缺失型者HDL-C水平最低（1．29±0．30mmol／L），均低于其他3种基因型组合携带者，HDI，C水平在GSTT1-／GSTM1-和GSTT1＋／GSTM1-者之间差异存在统计学意义（P〈0．05），但在HTG组未观察到类似的变化，两种基因分别基因型分析也未见血脂和载脂蛋白水平在对照组和HTG组有统计学差异存在。结论GSTM1、GSTT1基因多态性联合基因型与成都地区正常汉族中国人血清HDL-C水平存在关联，但未见其与HTG患者血脂及载脂蛋白水平有关。

子痫前期患者PAF-AH基因Ala379Val位点多态性的研究

目的研究血小板活化因子乙酰水解酶基因(PAF-AH)Ala379Val位点多态性是否与子痫前期(PE)发病有关。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术对成都地区210例PE患者和382例正常孕妇的PAF-AH基因Ala379Val位点多态性进行分析;以血小板活化因子(PAF)为底物,3 H-PAF为示踪剂,采用三氯乙酸沉淀法测定血浆PAF-AH、高密度脂蛋白(HDL)结合PAF-AH(H-PAF-AH)和低密度脂蛋白(LDL)结合PAF-AH(L-PAF-AH)活性。结果 PAF-AH基因Ala379Val位点AA、AV、VV基因型和A、V等位基因频率在PE患者和正常孕妇组之间差异无统计学意义(P>0.05)。然而,与携带AA基因型的PE患者比较,携带V等位基因的PE患者有更高的体质量指数(BMI)、L-PAF-AH/H-PAF-AH活性比值(P<0.05),更低的H-PAF-AH活性(P<0.05)。结论未发现PAF-AH基因Ala379Val位点多态性与成都地区PE发病存在关联性,但该位点V等位基因变异可能与PE孕妇BMI增加、血浆PAF-AH活性在脂蛋白中的分布异常有关。