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抗人抗苗勒管激素N端439~451表位单克隆抗体的制备及其性能研究
1
作者
陈寒雪
孙纪奎
+4 位作者
杨子霄
叶诗洋
周永君
别明江
王保宁
《四川大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第4期494-498,共5页
目的制备抗人抗苗勒管激素(anti-mullerian hormone,AMH)N端特定表位肽的特异单克隆抗体并对其特性进行鉴定。方法利用生物信息分析软件预测AMH特定多肽片段,合成AMH成熟N端区域的4个抗原性好的表位肽段作为筛选靶抗原。用重组AMH蛋白...
目的制备抗人抗苗勒管激素(anti-mullerian hormone,AMH)N端特定表位肽的特异单克隆抗体并对其特性进行鉴定。方法利用生物信息分析软件预测AMH特定多肽片段,合成AMH成熟N端区域的4个抗原性好的表位肽段作为筛选靶抗原。用重组AMH蛋白抗原免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与SP/20细胞进行细胞融合,通过杂交瘤技术制备抗AMH单克隆抗体,用N端4个表位肽(表位1:439~451 RGRDPRGPGRAQR,表位2:273-285 PPRPSAELEESPP,表位3:42~54 DLDWPPGSPQEPL,表位4:494~506 WPQSDRNPRYGNH)分别作抗原,间接ELISA和Western blot对筛选获得的特异抗表位单抗的抗原结合特性进行鉴定。结果筛选到两株能够稳定分泌抗人AMH表位1(anti-AMH-1)和表位2(antiAMH-2)的单克隆抗体杂交瘤细胞株,其分泌的单抗分别命名为anti-AMH-1和anti-AMH-2。该2株单抗细胞表达纯化后,检测其抗体效价分别为1∶12000和1∶1600。Western blot确认两种单抗除效价有差异外,识别抗原也有差异,anti-AMH-1不但能识别AMH的N端439-451表位肽,而且能识别重组AMH的氨基酸序列(rAMH),也能识别卵巢组织。anti-AMH-2能识别rAMH和卵巢组织。结论成功构建了抗人AMH N端的特异表位的2种单克隆抗体。
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关键词
抗苗勒管激素
表位单抗
性能
原文传递
题名
抗人抗苗勒管激素N端439~451表位单克隆抗体的制备及其性能研究
1
作者
陈寒雪
孙纪奎
杨子霄
叶诗洋
周永君
别明江
王保宁
机构
四川大学
华西
基础医学与法医
学院
病原生物系
四川大学
华西
口腔医
学院
口腔疾病研究国家重点实验室
川北医
学院
临床医
学院
微生物教研室
四川大学华西药学院大学生创新基地
四川大学
华西
公共卫生
学院
/
华西
第四医院检验科
出处
《四川大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第4期494-498,共5页
基金
四川省重点研发项目(No.20ZDYF0874)
四川大学大学生创新创业项目(No.201810612054)资助。
文摘
目的制备抗人抗苗勒管激素(anti-mullerian hormone,AMH)N端特定表位肽的特异单克隆抗体并对其特性进行鉴定。方法利用生物信息分析软件预测AMH特定多肽片段,合成AMH成熟N端区域的4个抗原性好的表位肽段作为筛选靶抗原。用重组AMH蛋白抗原免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与SP/20细胞进行细胞融合,通过杂交瘤技术制备抗AMH单克隆抗体,用N端4个表位肽(表位1:439~451 RGRDPRGPGRAQR,表位2:273-285 PPRPSAELEESPP,表位3:42~54 DLDWPPGSPQEPL,表位4:494~506 WPQSDRNPRYGNH)分别作抗原,间接ELISA和Western blot对筛选获得的特异抗表位单抗的抗原结合特性进行鉴定。结果筛选到两株能够稳定分泌抗人AMH表位1(anti-AMH-1)和表位2(antiAMH-2)的单克隆抗体杂交瘤细胞株,其分泌的单抗分别命名为anti-AMH-1和anti-AMH-2。该2株单抗细胞表达纯化后,检测其抗体效价分别为1∶12000和1∶1600。Western blot确认两种单抗除效价有差异外,识别抗原也有差异,anti-AMH-1不但能识别AMH的N端439-451表位肽,而且能识别重组AMH的氨基酸序列(rAMH),也能识别卵巢组织。anti-AMH-2能识别rAMH和卵巢组织。结论成功构建了抗人AMH N端的特异表位的2种单克隆抗体。
关键词
抗苗勒管激素
表位单抗
性能
Keywords
Anti-mullerian hormone
Monoclonal antibodies
Features
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
抗人抗苗勒管激素N端439~451表位单克隆抗体的制备及其性能研究
陈寒雪
孙纪奎
杨子霄
叶诗洋
周永君
别明江
王保宁
《四川大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2020
0
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已选择
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