用Powerpoint上药物化学课的几点体会

本文结合药物化学课的Powerpoint投影片的制作和使用,介绍了课堂教学中的一些体会.

废用性骨质疏松幼龄大鼠骨维生素D受体表达的研究

目的了解制动对幼龄大鼠骨维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)表达的影响,探讨废用性骨质疏松(disuse osteoporosis,DOP)与VDR表达的关系。方法通过腿-尾固定法对4周龄幼鼠分别进行右后肢2周和4周制动,采用股骨湿重、灰重、骨密度测量,骨组织病理学和骨组织形态学参数测定等方法对比评价制动对幼鼠制动侧股骨和胫骨的骨量、骨结构的影响,采用免疫组织化学和图象分析方法检测制动对幼鼠骨VDR表达的影响。结果幼鼠在制动2周和4周后制动侧股骨湿重、灰重、股骨和胫骨骨密度均低于同龄对照组(P<0.05),骨组织切片可见制动侧胫骨近侧干骺端骨小梁稀疏、纤细和断裂,和相应同龄对照相比骨小梁面积和骨小梁周长降低(P<0.05);免疫组织化学和图象分析方法显示幼鼠右后肢胫骨近侧干骺端骨组织成骨细胞胞浆和核膜有VDR表达,制动后表达增强。结论腿-尾固定法可成功建立幼鼠DOP动物模型;制动可增强幼鼠制动侧肢体骨VDR的表达,提示维生素D内分泌系统紊乱可能与DOP的发病机制有一定的关系。

异黄酮类化合物F11抗癌活性的实验研究

目的研究经结构修饰后的异黄酮类化合物F11是否具较好的体外、体内抗癌活性。方法采用MTT法,以5,7,4′-三羟基异黄酮(genistein,GEN)作为对照,研究化合物F11对Hela细胞的抗增殖作用;采用荷瘤裸鼠模型,以GEN和环磷酰胺作为对照,研究化合物F11在体抗癌效应。结果MTT实验结果显示,在相同的作用浓度下,F11处理组Hela细胞形态异常改变,死细胞明显增多,细胞存活率显著低于GEN作用组(P<0.05)。荷瘤动物实验结果表明与GEN相比,F11对Hela细胞裸鼠移植瘤的生长有显著的抑制作用(P<0.01),效果与环磷酰胺相当,且未观察到毒副反应。结论异黄酮类化合物经过特定结构修饰,可显著增强其抗癌效应,有值得进一步研究开发的潜在价值。

四环素-哌嗪雌酚酮对小鼠骺板Ⅰ型胶原表达的影响

目的 研究四环素 -哌嗪雌酚酮 (XW6 30 )对胚胎小鼠骺板 型胶原的表达的影响。方法 采用胚胎小鼠体外培养模型 ,通过免疫组织化学手段 ,观察 XW6 30对 型胶原蛋白表达水平的影响。结果 当培养基中XW6 30浓度为 10 - 7m ol/L和 10 - 8mol/L时 ,各区 型胶原蛋白免疫组织化学染色阳性细胞面积与对照组相比均显著增加 ;与同浓度的雌酚酮组相比 ,10 - 7mol/L XW6 30组增殖区和肥大区阳性细胞面积增加。当浓度降至 10 - 9mol/L时 ,只有肥大区阳性细胞面积增加。随浓度升高 ,各区阳性细胞面积呈增加趋势。结论 在体外培养条件下 ,XW6 30剂量依赖地上调小鼠骺板静止区、增殖区和肥大区 型胶原蛋白的表达水平。

1,3-二氢-1,3-二酮-2-氢-异吲哚衍生物的合成研究

目的设计并合成沙利度胺的衍生物。方法氨基酸苄酯氨解N-邻苯二甲酰基-L-谷氨酸酐,所得产物经氢化脱苄后再与氨气成铵盐即得1,3-二氢-1,3-二酮-2H-异吲哚衍生物。结果成功地合成了4个未见文献报道的沙利度胺衍生物。并进行了结构表征。结论利用本方法可以在温和的条件下获得较高产率的目标产物。

含直链烷酸功能基的5-氟尿嘧啶衍生物的合成

目的合成含2～5个碳的直链烷酸功能基的5-氟尿嘧啶衍生物。方法用卤代酸酯和过量的5-氟尿嘧啶（5-FU）反应，再水解得5-FU的N1-位取代直链烷酸。先将5-FU的N1-位用叔丁氧羰基（Boc）保护，再与卤代酸酯反应，最后升温去保护，三步反应一锅煮，可得到高收率（75％～85％）的N3-位取代酸酯，水解后得N3-位取代的直链烷酸。结果共合成了5-FU衍生物16个，其中新化合物10个，目标物8个。所有化合物都通过了光谱确证。结论过量的5-FU与卤代酸酯反应能得到较好收率的N1-位单取代物。通过对5-FU的N1-位Boc保护，再与卤代酸酯反应，去保护、水解后可以得到N3-位单取代直链烷酸。

N-(双膦羧次甲基)-6-(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢-2H-嘧啶-1-基)-6-氧代-己酰胺的合成及其初步的骨靶向性研究

目的合成N-(双膦羧次甲基)-6-(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢-2H-嘧啶-1-基)-6-氧代-己酰胺,并进行初步体外骨靶向性实验。方法以5-氟尿嘧啶为原料,经硅烷化、缩合、氢解3步合成6-(5-氟-2,4-二氧代-3,4-二氢-2H-嘧啶-1-基)-6-氧代-己酸(2),用二氯亚砜氯化后再与含氨基的偕二膦酸酯偶联,最后再用溴代三甲基硅烷特异性解离掉膦酸酯得到目标化合物L,并采用羟磷灰石晶体吸附实验考察目标物的骨靶向性。结果合成了目标物L,并利用1H-NMR、IR和MS进行了结构确证。结论体外骨靶向性实验结果显示目标物L有较好的骨靶向性。

可溶性HLA-G1与NK-92细胞表面ILT2及KIR2DL4受体相互作用的研究

目的探讨可溶性HLA-G1(sHLA-G1)对人NK-92细胞杀伤活性的抑制与细胞表面免疫球蛋白样转录分子2(ILT2)和杀伤细胞免疫球蛋白样受体2DL4(KIR2DL4)受体的关系。方法①通过原核表达技术获得sHLA-G1重组蛋白(重组蛋白),并采用蛋白质印迹法进行鉴定。②取NK-92细胞,加入终浓度20μg/ml的重组蛋白分别培养10、30min,再分别加入抗HLA-G1/G5、抗ILT2和抗KIR2DL4抗体,采用流式细胞术检测各组NK-92细胞表面sHLA-G1和ILT2、KIR2DL4受体表达阳性率;以NK-92细胞单独培养作为对照组。③以人白血病K562细胞为靶细胞,以经不同方式处理的NK-92细胞为效应细胞,效靶比为5:1,共同培养2h,采用流式细胞术检测NK-92细胞对K562细胞的杀伤率。NK-92细胞处理方式为单纯重组蛋白处理(分别加入终浓度为0、10、20μg/ml的重组蛋白培养30min)和表面受体封闭+重组蛋白处理(分别加入抗ILT2、抗KIR2DL4、抗LT2+抗KIR2DL4抗体培养30min,再分别加入终浓度为0、10、20μg/ml的重组蛋白培养30min)。结果①蛋白质印迹分析表明所获重组蛋白为带有组氨酸标签的特异蛋白。②NK-92细胞与20μg/ml重组蛋白共培养30min后,sHLA-G1表达阳性率明显高于而ILT2、KIR2DL4受体表达阳性率均明显低于对照组(均P<0.05)。③以终浓度0、10、20μg/ml的重组蛋白处理的NK-92细胞对K562细胞的杀伤率分别为39.79%±2.00%、27.79%±0.75%、21.36%±0.67%(两两比较,均P<0.01);单独封闭ILT2受体,杀伤率分别为23.09%±1.63%、21.13%±0.38%、18.42%±0.47%(两两比较,均P<0.01);单独封闭KIR2DL4受体,杀伤率分别为30.74%±0.44%、26.03%±0.38%、21.15%±0.35%(两两比较,均P<0.01)。结论sHLA-G1通过与NK-92细胞表面ILT2和KIR2DL4受体直接结合而抑制NK-92细胞的杀伤活性。

新型PPARγ激动剂的设计与合成

目的设计并合成新型的过氧化物酶体增殖因子活化受体激动剂。方法根据过氧化物酶体增殖因子活化受体激动剂的结合特征和药效团分布,设计了一系列新型的过氧化物酶体增殖因子活化受体激动剂。以对羟基苯甲醛、1,2-二溴乙烷、酚、乙内酰脲和2-硫代乙内酰脲为原料合成相应的目标化合物。结果经成醚和脑文格反应合成12个目标化合物。结论利用本方法可以在温和的条件下获得较高产率的目标化合物,所设计的目标化合物经核磁共振谱和质谱确证结构。