Triton X-100快速提取甲醛固定、石蜡包埋组织内DNA的方法

目的建立一种快速提取甲醛固定、石蜡包埋组织内DNA的方法。方法利用TritonX-100一步提取甲醛固定、石蜡包埋组织内DNA,并具体研究了不同浓度TritonX-100对提取后DNA-STR分型效果的影响。结果成功地一步提取出甲醛固定、石蜡包埋组织内DNA,浓度为1%的TritonX-100提取效果较好。结论利用TritonX-100提取甲醛固定、石蜡包埋组织内的DNA,为快速提取DNA提供了有效的途径,是法科学领域中一种值得推荐的方法。

D7S817、D10S1432、D10S1213及D18S865分型标准物的制备及其遗传多态性研究

目的 利用重组质粒制备四个新的 STR基因座 (D7S817、D10 S14 32、D10 S12 13及 D18S86 5 )的分型标准物 ,并进行群体遗传学研究。方法 从聚丙烯酰胺凝胶中分离出经 PCR扩增后的等位基因片段 ,二次扩增后纯化的等位基因片段被分别插入到 PU C质粒载体中。利用 DNA测序证实插入片段大小及结构的正确性后 ,用国际标准将插入的等位基因片段进行命名。再转染到适当的 E.coli DH5αTM细胞内选择培养 ,以纯化质粒为模板 ,扩增出各基因座的等位基因片段后混合。结果 得到四个 STR基因座 (D7S817、D10 S14 32、D10 S12 13及 D18S86 5 )分型标准物 ,应用所制备的分型标准物研究汉族和东乡族群体中的基因型分布频率。结论 制备出的四个 STR基因座的分型标准物在法科学领域中有很高的应用价值 。

5个STR基因座遗传多态性研究及复合扩增试剂盒的构建及应用

目的用分子克隆技术制备出D7S820、D13S317、D5S818、D3S1358等四个STR基因座和AMELO-GENIN基因座的分型标准物,并建立用复合PCR进行同步扩增检测的方法,以提高检测效率,降低成本。方法用复合扩增方法检测130名云南省汉族和130名成都汉族无关个体的5个基因座的等位基因分布,五个基因座的各等位基因互不重叠,PCR复合扩增产物电泳分型清晰,与单基因座检测结果一致。结果D7S820、D13S317、D5S818、D3S1358四个STR基因座在两个汉族群体中的基因型分布均符合HARDY-WEINBERG平衡,在云南省汉族中分别发现7、7、8和8个等位基因,在成都汉族中分别发现8、7、8和7个等位基因。四个STR基因座的等位基因频率的分布在两个群体之间差异无统计学意义。结论五个基因座的累计识别能力和非父排除率较高,用自制的STR分型标准物,银染法检测这五个基因座的复合扩增在法科学领域中有较高的实用价值。