成年大鼠心肌细胞的分离和培养

目的:建立获得较高比例的活性成年大鼠心肌细胞的分离和培养方法。方法:Langendorff灌流,胶原酶消化分离钙耐受成年大鼠心肌细胞,加血清培养。光镜观察,结合形态学和台盼蓝染色评价心肌细胞。结果:分离的活性心肌细胞比率约70%～80%,杆状、横纹清晰。加血清贴壁培养的细胞逐渐发生形态学改变。结论:通过本方法可以对成年大鼠心肌细胞进行良好的分离培养。

如何建立成年大鼠心肌细胞钙超载模型

目的：探讨建立成年大鼠心肌细胞钙超载模型的方法。方法：Langendorff灌流，分离钙耐受成年大鼠心肌细胞，采用不同浓度钙离子导入剂-伊屋诺霉素（ionomycin）作用心肌细胞1小时，用荧光分光光度计测定心肌细胞内的游离钙浓度。结果：1．分离的活性心肌细胞比率约70～80％，杆状、横纹清晰。2．实验组1（ionomycin0．5μmol／L）心肌细胞[Ca^2＋]1明显高于对照组（282．07±25．19 vs 115±21．21nmol／L，P〈0．05）；实验组2（ionomycin 1．0μmol／L）心肌细胞[Ca^2＋]1（376．35±29．44）显著高于正常对照组（P〈0．05）。结论：通过本方法可以建立成年大鼠心肌细胞钙超载模型。