甘蓝型油菜基因BnRCH转染人HEK 293A和Hela细胞的研究

本研究从植物基因在动物细胞异源表达的角度入手,采用外源基因稳定转染的方法,向人胚胎肾细胞HEK 293A和人宫颈癌细胞Hela导入了BnRCH基因,获得了HEK 293A和Hela细胞的稳定转染子.使用RT-PCR、qPCR和Western blot等方法鉴定了获得的稳定转染子,确认了稳定转染子的成功建立.本研究一方面说明BnRCH虽然为植物基因,却仍然能够在动物细胞中正常表达;另一方面也为开展对BnRCH基因在动物细胞中的功能研究和应用开发建立了平台.同时,使用免疫细胞化学法和绿色荧光蛋白质(GFP)示踪法分析了BnRCH蛋白质在Hela细胞中的定位,结果表明:BnRCH蛋白质在Hela细胞中均匀分布,实现了对BnRCH基因在Hela细胞中作用的初步探索.