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几种鹤性别的分子生物学鉴定 被引量:8
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作者 杨光 陈红卫 +2 位作者 杨玉华 张义正 张志和 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期911-915,共5页
以RAAV0 1和RAAV0 2两条随机核苷酸加聚体为引物 ,通过随机扩增片段多态DNA的方法 ,在白头鹤、白枕鹤、丹顶鹤等 3种 4对不同个体中 ,发现一条约 30 0bp的雌性个体特异带 ,并应用这一方法成功地鉴别了未知性别的丹顶鹤个体 .同时参照已... 以RAAV0 1和RAAV0 2两条随机核苷酸加聚体为引物 ,通过随机扩增片段多态DNA的方法 ,在白头鹤、白枕鹤、丹顶鹤等 3种 4对不同个体中 ,发现一条约 30 0bp的雌性个体特异带 ,并应用这一方法成功地鉴别了未知性别的丹顶鹤个体 .同时参照已知动物CHD基因序列设计合成CHD基因引物 ,采用PCR方法在丹顶鹤雌性个体中扩增出一条 2 0 6bp的片段 .序列分析表明 ,该序列与已知其他鸟类CHD W ,CHD 展开更多
关键词 鹤属 CHD基因 随机扩增多态性DNA 性别鉴定 分子生物学 白头鹤 白枕鹤 丹顶鹤 特异扩增
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人端粒酶逆转录酶真核表达质粒转染人成纤维细胞的体外培养及生物学特性研究 被引量:11
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作者 解慧琪 杨志明 +4 位作者 屈艺 李秀群 秦廷武 赵金梅 刘军 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2002年第3期195-199,共5页
目的  分析人端粒酶逆转录酶 (h TERT)真核表达质粒 p GRN14 5转染人成纤维细胞的生物学特性。方法 体外分离培养小儿包皮成纤维细胞 ,脂质体法将构建的 p GRN14 5转染人成纤维细胞 ,经潮霉素 B筛选 ,扩增培养阳性克隆。 RT- PCR法、... 目的  分析人端粒酶逆转录酶 (h TERT)真核表达质粒 p GRN14 5转染人成纤维细胞的生物学特性。方法 体外分离培养小儿包皮成纤维细胞 ,脂质体法将构建的 p GRN14 5转染人成纤维细胞 ,经潮霉素 B筛选 ,扩增培养阳性克隆。 RT- PCR法、TRAP- PCR法分析细胞端粒酶活性。流式细胞术检测细胞增殖周期及细胞凋亡率 ,对转染后细胞行染色体核型分析及免疫组织化学法检测胶原分泌能力。结果 转染后培养的人成纤维细胞形态与转染前相比无明显改变 ,转染细胞稳定地表达端粒酶活性 ,流式细胞术分析转染前后成纤维细胞的增殖周期无明显改变 ,细胞凋亡率较转染前降低。经 p GRN14 5转染的人成纤维细胞保持正常的二倍体核型 ,具有正常分泌 、 型胶原的能力。结论  p GRN14 5转染的人成纤维细胞稳定地表达端粒酶活性 ,细胞寿命明显延长。 展开更多
关键词 人端粒酶逆转录酶 真核表达质粒 体外培养 生物学特性 研究 组织工程 端粒酶 成纤维细胞 基因转染
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侧耳菌产生木质纤维素酶及其降解植物生物质的研究 被引量:20
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作者 谢君 任路 张义正 《兰州大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期121-126,共6页
对在液体培养基中产生木质纤维素降解酶能力强且产酶速度较快的侧耳 sp 2 (Pleurotussp 2 )进行了最佳产酶液体培养基组分的研究 ,并对其在液体培养基、固体培养基中产生木质纤维素降解酶能力和行为进行了分析 .结果表明 ,该菌株在低氮... 对在液体培养基中产生木质纤维素降解酶能力强且产酶速度较快的侧耳 sp 2 (Pleurotussp 2 )进行了最佳产酶液体培养基组分的研究 ,并对其在液体培养基、固体培养基中产生木质纤维素降解酶能力和行为进行了分析 .结果表明 ,该菌株在低氮高碳高无机盐培养基中的锰过氧化物酶、木质素过氧化物酶、漆酶和半纤维素酶等 4种酶的活性最高 .其中 ,锰过氧化物酶的活性峰值出现时间仅为 6 d,比其他 3种酶活性峰值期早 6 d. Pleurotus sp 2是目前已知的在液体培养条件下产锰过氧化物酶较高的菌株之一 .当该菌株培养在含有低氮无碳高无机盐液体培养基的麦草粉中时 ,锰过氧化物酶和漆酶的活性峰值均出现在第 10天 ,而半纤维素酶的活性在 4 0 d时达到峰值 .此外 ,该菌株使麦草生物质失重可达 17.6 % 。 展开更多
关键词 侧耳菌 木质纤维素降解酶 植物生物质降解 液体培养基 制浆造纸工业 生物制浆 产酶能力
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粗毛栓菌产生木质纤维素酶及其降解植物生物质的研究 被引量:5
4
作者 谢君 孙迅 +1 位作者 任路 张义正 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2001年第8期11-16,共6页
对在液体培养基中产生木质纤维素降解酶酶能力强且产酶速度较快的粗毛栓菌(Trametesgallic) ,进行了最佳产酶液体培养基组分的研究 ,并对其在液体培养基、固体培养基中产生木质纤维素降解酶能力和行为进行了分析。结果表明 ,该菌株在高... 对在液体培养基中产生木质纤维素降解酶酶能力强且产酶速度较快的粗毛栓菌(Trametesgallic) ,进行了最佳产酶液体培养基组分的研究 ,并对其在液体培养基、固体培养基中产生木质纤维素降解酶能力和行为进行了分析。结果表明 ,该菌株在高氮低碳高无机盐培养基中的漆酶和木质素过氧化物酶的活性最高 ,在低氮高碳高无机盐培养基中的锰过氧化物酶和半纤维素酶的活性最高。该菌株培养在含有高氮无碳高无机盐和低氮无碳高无机盐液体培养基的麦草粉中 ,锰过氧化物酶在 10d、漆酶和半纤维素酶在 4 0d、木质素过氧化物酶在 5 0d时分别达到峰值 ,该菌株使麦草生物质的失重率大于 6 4 %。对半纤维素的降解达 71.96 % ,对纤维素的降解达 6 6 .2 1% ,对木质素的降解达 70 .14%。T .gallica在固体培养基中具有很强的降解生物质能力 ,且首先降解木质素。 展开更多
关键词 粗毛栓菌 木质纤维素降解酶 植物生物质降解 液体培养基 酶活性 生物制浆 造纸业
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花椒挥发油对实验性动脉粥样硬化的影响 被引量:26
5
作者 马建旸 石应康 方定志 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期696-699,共4页
目的观察中药花椒挥发油对豚鼠实验性主动脉粥样硬化形成的影响并探讨其可能的作用机制。方法将36只豚鼠随机分为正常对照组、模型组、花椒挥发油组;分别给予普通饲料(正常对照组)和高脂饲料(模型组和花椒挥发油组)喂养,花椒挥发油组动... 目的观察中药花椒挥发油对豚鼠实验性主动脉粥样硬化形成的影响并探讨其可能的作用机制。方法将36只豚鼠随机分为正常对照组、模型组、花椒挥发油组;分别给予普通饲料(正常对照组)和高脂饲料(模型组和花椒挥发油组)喂养,花椒挥发油组动物在喂高脂饲料的同时,加喂花椒挥发油10mg/kg。喂养第14周末取血样后,处死所有动物,检测血清脂质、载脂蛋白水平、血清丙二醛含量、肝脏和主动脉组织中总胆固醇和甘油三酯含量以及主动脉粥样硬化斑块面积。结果高脂饲料喂养14周后,模型组和花椒挥发油组动物血脂水平均升高,且伴有主动脉粥样硬化斑块的形成;与模型组相比,花椒挥发油组动物血中低密度脂蛋白、低密度脂蛋白/高密度脂蛋白的比值、载脂蛋白B以及丙二醛水平降低,差异有统计学意义(P<0.05),而且肝脏和主动脉组织中总胆固醇和甘油三酯含量以及主动脉粥样斑块面积比均小于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论花椒挥发油具有抗豚鼠实验性动脉粥样硬化形成的作用;这种作用与它降低血清过氧化脂质水平、抗脂质过氧化损伤有关。 展开更多
关键词 花椒挥发油 动脉粥样硬化 血脂 脂质过氧化物 豚鼠
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大熊猫与熊类动物性别的分子鉴定 被引量:5
6
作者 杨晓娟 杨玉华 +4 位作者 张义正 陈红卫 费立松 宋云芳 何光昕 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 1999年第3期288-290,共3页
根据已知动物的性别决定因子基因序列设计引物,以非性别特异性的脑源性神经营养因子基因片段(BDNF)作为正对照,用于扩增大熊猫、浣熊、天山棕熊和马来熊个体的SRY(sexdeterminingregiononYch... 根据已知动物的性别决定因子基因序列设计引物,以非性别特异性的脑源性神经营养因子基因片段(BDNF)作为正对照,用于扩增大熊猫、浣熊、天山棕熊和马来熊个体的SRY(sexdeterminingregiononYchromosome)基因片段并对其进行凝胶电泳分析,由此建立了一套简单、快速、可靠的动物性别分子鉴定方法.该方法不仅有利于尽快确定大熊猫等珍稀濒危动物的性别,而且也可以用于野外种群的性别比例调查. 展开更多
关键词 大熊猫 马来熊 浣熊 天山棕熊 SRY基因 性别鉴定
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彝医药防疫古方的核心成分青蒿素和槲皮素抑制新冠病毒刺突蛋白的转录和翻译 被引量:1
7
作者 吴伟 吴俊汐 +3 位作者 纪旭旭 刘戟 刘彬 耿福昌 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1314-1320,共7页
目的 研究青蒿素和槲皮素单用或联合使用是否可以通过抑制刺突蛋白(spike protein, S)的转录和翻译来治疗新冠病毒感染(coronavirus disease-2019, COVID-19)。方法 采用梯度浓度的青蒿素或槲皮素处理Vero E6细胞,进行细胞活力测定;采... 目的 研究青蒿素和槲皮素单用或联合使用是否可以通过抑制刺突蛋白(spike protein, S)的转录和翻译来治疗新冠病毒感染(coronavirus disease-2019, COVID-19)。方法 采用梯度浓度的青蒿素或槲皮素处理Vero E6细胞,进行细胞活力测定;采用新冠病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2, SARS-CoV-2)的S基因质粒转染Vero E6细胞,而后采用青蒿素或槲皮素单独或联合处理,以检测S蛋白的基因转录和蛋白质翻译水平。结果 青蒿素或槲皮素处理可以显著降低SARS-CoV-2 S基因质粒转染后Vero E6细胞内S蛋白的mRNA和蛋白表达水平,差异具有统计学意义(P<0.01, P<0.05),并且,20μmol/L或200μmol/L的青蒿素与50μg/mL的槲皮素联合用药比单独用药能够更为显著地降低S蛋白的蛋白表达水平,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论单独和联合使用青蒿素和槲皮素均能有效地抑制SARS-CoV-2 S蛋白的基因转录和蛋白翻译。 展开更多
关键词 青蒿素 槲皮素 SARS-CoV-2 刺突蛋白 转染 基因转录 蛋白翻译 彝族药物
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白腐菌液体培养产生木质纤维素降解酶的研究 被引量:39
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作者 谢君 任路 +2 位作者 李维 孙迅 张义正 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第S1期161-166,共6页
选用 4 5枚白腐真菌 ,首先根据RB亮蓝变色反应 ,初筛出 6枚菌株 .采用正交实验确定了这 6枚菌株的最佳液体产酶培养基 ,讨论了它们产木质素降解酶的行为 .根据其产酶的特性 ,从中筛出 2枚在液体培养基中产酶能力最强且产酶较快的菌株 .... 选用 4 5枚白腐真菌 ,首先根据RB亮蓝变色反应 ,初筛出 6枚菌株 .采用正交实验确定了这 6枚菌株的最佳液体产酶培养基 ,讨论了它们产木质素降解酶的行为 .根据其产酶的特性 ,从中筛出 2枚在液体培养基中产酶能力最强且产酶较快的菌株 .结果表明 ,侧耳sp2和粗毛栓菌在液体培养中具有很强的产酶能力且产酶较快 ,且首先降解木质素 ,是生物制浆中原料预处理的优良菌株 ,具有一定的应用前景 . 展开更多
关键词 白腐真菌 菌株筛选 液体培养 产酶能力 木质纤维素降解
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高效液相色谱法制备罗汉果甜甙Ⅴ标准品 被引量:33
9
作者 余丽娟 陈全斌 +2 位作者 义祥辉 杨瑞云 张义正 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期397-399,共3页
为深入研究罗汉果中功能成分的药理药效,进一步开发罗汉果中的有效成分,将罗汉果鲜果的水提物以AB 8吸附树脂分离、D 280离子交换树脂脱色后,利用半制备高效液相色谱法得到三萜皂甙类化合物罗汉果甜甙Ⅴ标准品,纯度达98 5%。色谱柱为All... 为深入研究罗汉果中功能成分的药理药效,进一步开发罗汉果中的有效成分,将罗汉果鲜果的水提物以AB 8吸附树脂分离、D 280离子交换树脂脱色后,利用半制备高效液相色谱法得到三萜皂甙类化合物罗汉果甜甙Ⅴ标准品,纯度达98 5%。色谱柱为AlltechEconosphereNH2柱;流动相为乙腈 水(体积比为68∶32)溶液,流速5mL/min;检测波长203nm;柱温40℃。此方法具有操作简便、重现性好、产品纯度高等优点。 展开更多
关键词 高效液相色谱法 制备 罗汉果甜甙V 三萜皂甙类 鲜罗汉果 天然甜味剂
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侧耳菌与粗毛栓菌在麦草培养基中产生木质纤维素降解酶的研究 被引量:24
10
作者 谢君 孙迅 +1 位作者 任路 张义正 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期575-578,共4页
Pleurotus sp2 and Trametes gallica were selected in this assay because of their high activities of lignocellulolytic enzymes and the enzyme peaks appeared at the early stage of liquid state fermentation.Solid state fe... Pleurotus sp2 and Trametes gallica were selected in this assay because of their high activities of lignocellulolytic enzymes and the enzyme peaks appeared at the early stage of liquid state fermentation.Solid state fermentation was also investigated for their abilities and behaviors of enzyme\|production.The capabilities and characteristics of the two strains in degrading biomass were studied.When \Pleurotus sp2\ was incubated in wheat straw powder containing the liquid medium of low\|nitrogen,no\|carbon and high inorganic salt,the activities of MnP and Lac reached the peaks on the tenth day,but the activities of hemicellulases reached the peak on the 40th day.\Pleurotus sp2\ caused 17.6 of biomass loss.When \T.gallica was incubated in wheat straw powder containing the liquid medium of hlig\|nitrogen,or low\|nitrogen,no\|carbon and high inorganic salt,the activities of MnP reached the peaks on the tenth day,the lac and hemicelluloses on the 40th day,and the lignin peroxidases reached the peaks on the 50th day,and it caused more than 64% of biomass loss.Among them the hemicellulose was degraded by 71.96%,and the cellulose 66.21%. T.gallica% was very capable of degrading lignin of wheat straw and caused 34.37 loss during 20 days,46.71 loss during 30 days and 70.14% loss during 60 days.It was interesting that \T.gallica \degraded lignin preferentially with respect to cellulose,which was very beneficial to biopulping of paper industry. 展开更多
关键词 侧耳菌 粗毛栓菌 木质纤维素降解酶 生物质降解 麦草培养基
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应用微卫星标记研究西藏野生大麦的遗传多样性(英文) 被引量:14
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作者 冯宗云 刘仙俊 +1 位作者 张义正 凌宏清 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第10期917-928,共12页
以西藏不同地区的106份野生大麦为材料,其中包括50份野生二棱大麦(HS),27份野生瓶形大麦(HL)和29份野生六棱大麦(HA),用Liu等(1996)发表的SSR连锁图的每个连锁群的两个臂的不同位置上选取3-5个共30个SSR标记,研究了西藏3类野生大麦的遗... 以西藏不同地区的106份野生大麦为材料,其中包括50份野生二棱大麦(HS),27份野生瓶形大麦(HL)和29份野生六棱大麦(HA),用Liu等(1996)发表的SSR连锁图的每个连锁群的两个臂的不同位置上选取3-5个共30个SSR标记,研究了西藏3类野生大麦的遗传多样性。结果表明,这3类野生大麦在遗传组成及等位变异频率分布上存在着明显的遗传分化。在总样本中,共检测到229个等位变异,平均每个SSR位点检测到7.6个等位变异,其中70个为这3类野生大麦间共同的等位变异,等位变异数在这3类野生大麦间有明显的差异,亚种间的遗传多样性明显高于亚种内的遗传多样性。其遗传多样性大小顺序为HS>HL>HA。聚类分析表明,野生二棱大麦、野生六棱大麦分别聚在不同的两类,而野生瓶形大麦中各有约50%的材料分别聚在这两类。根据本研究及前人研究结果,我们认为中国栽培大麦是从野生二棱大麦经理生瓶形大麦向野生六棱大麦进化的。该结果支持了栽培大麦起源的“野生二棱大麦单系起源论”的观点。 展开更多
关键词 大麦 遗传多样性 微卫星标记 野生大麦 遗传分化 西藏
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电针涌泉穴对D-半乳糖致衰老模型大鼠的p53和bcl-2基因表达的影响 被引量:21
12
作者 李珉 张卫 +2 位作者 王刚 王米渠 张义正 《华西医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期589-591,共3页
目的 研究针刺对衰老造模大鼠 p5 3、bcl- 2基因表达的影响。方法 用 D-半乳糖注射法建立大鼠衰老模型 ,经电针涌泉穴治疗后 ,用 RT- PCR方法检测 p5 3和 bcl- 2基因的表达情况。结果 电针能明显改善患鼠症状 ;D-半乳糖造模引起 p5 ... 目的 研究针刺对衰老造模大鼠 p5 3、bcl- 2基因表达的影响。方法 用 D-半乳糖注射法建立大鼠衰老模型 ,经电针涌泉穴治疗后 ,用 RT- PCR方法检测 p5 3和 bcl- 2基因的表达情况。结果 电针能明显改善患鼠症状 ;D-半乳糖造模引起 p5 3基因表达上调 ,经电针涌泉穴后又可使其下调 ;bcl- 2基因的表达不受 D-半乳糖造模和电针的影响。结论 针刺涌泉穴对衰老大鼠的 p5 展开更多
关键词 电针 涌泉穴 衰老 大鼠 基因表达
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大熊猫基因组微卫星DNA的分离与序列分析 被引量:12
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作者 曹玫 杨玉华 +5 位作者 王喜忠 王亚军 张义正 宋云芳 费立松 何光昕 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 2001年第3期277-280,共4页
以 pBS+为克隆载体 ,构建圈养大熊猫基因组DNA的小插入文库 .分别用生物素标记的 (CAC) 5和γ - 32 P -dATP标记的 (CA) 15寡核苷酸为探针 ,对重组质粒进行斑点杂交 ,获得 15个阳性克隆 ,并测定了插入片段的DNA序列 .其中有一部分序列... 以 pBS+为克隆载体 ,构建圈养大熊猫基因组DNA的小插入文库 .分别用生物素标记的 (CAC) 5和γ - 32 P -dATP标记的 (CA) 15寡核苷酸为探针 ,对重组质粒进行斑点杂交 ,获得 15个阳性克隆 ,并测定了插入片段的DNA序列 .其中有一部分序列已被分析 ,本文对剩余的 8个DNA序列进行分析 ,发现它们大小不一 ,从 2 5 9bp~ 881bp ,有 6个序列含有不同重复单位的一、二、四核苷酸的完整串联重复 .斑点杂交和Southern杂交证明 ,这些序列均来自大熊猫基因组 .上述结果为利用PCR技术研究大熊猫遗传多样性和了解大熊猫基因组结构积累资料 .表 2参 展开更多
关键词 大熊猫 基因组小插入文库 微卫生DNA DNA序列分析 分离
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短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)脱毛蛋白酶基因的克隆与序列分析 被引量:12
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作者 黄庆 潘皎 +2 位作者 彭勇 李昕 张义正 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2004年第2期31-35,共5页
短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)UN-31-C-42菌株是从成都市生活垃圾中分离,并经多次诱变后得到的菌株。其发酵液具有很好的脱毛效果,且对皮革胶原没有损伤。通过对该菌株发酵液中的碱性蛋白酶DHAP的纯化与N′-末端氨基酸序列测定,以... 短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)UN-31-C-42菌株是从成都市生活垃圾中分离,并经多次诱变后得到的菌株。其发酵液具有很好的脱毛效果,且对皮革胶原没有损伤。通过对该菌株发酵液中的碱性蛋白酶DHAP的纯化与N′-末端氨基酸序列测定,以及对该序列的同源性分析后,设计出相应引物,用PCR方法扩增了该菌株的碱性蛋白酶基因AP。测序结果表明,该克隆基因全长1588bp,有一个全长1149bp的编码区序列,推测蛋白质序列长383个氨基酸残基,成熟肽分子量为27.8kD。推测的成熟蛋白酶N′-末端具有与DHAPN′-末端完全匹配的序列,说明克隆到的基因为脱毛蛋白酶基因。同源性分析表明,该基因序列与已报道的其他碱性蛋白酶基因有较高的同源性。 展开更多
关键词 短小芽孢杆菌 碱性蛋白酶基因 PCR 基因克隆 序列分析 制革业 脱毛工艺
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浣熊SRY-HMG box的克隆和序列分析 被引量:9
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作者 杨晓娟 杨玉华 +4 位作者 张义正 陈红卫 费立松 宋云芳 何光昕 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第3期425-428,共4页
We amplified the 197 bp HMG box sequence by using Polymerase Chain Reaction (PCR) with primers according to the known SRY sequence from male raccoon genomic DNA, and then cloned and sequenced. The nucleic acid and ami... We amplified the 197 bp HMG box sequence by using Polymerase Chain Reaction (PCR) with primers according to the known SRY sequence from male raccoon genomic DNA, and then cloned and sequenced. The nucleic acid and amino acid sequence comparison between raccoon and other mammals revealed high conservation of the SRY HMG box in mammals (about 80%), which implied that the DNA binding activity was crucial to mediate the action of SRY in sex determination. The variation of raccoon HMG box sequence mainly occurred on purine by replacement and missense mutation, which implicated that only the HMG box protein with advanced structure had efficient activity. The homology and difference between mammals HMG box was accorded to the evolution systematic tree. 展开更多
关键词 浣熊 克隆 SRY基因 HMG-BOX PCR 序列分析 性别分化
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豆豉溶栓酶产生菌的筛选及其酶学性质的初步研究 被引量:62
16
作者 彭勇 张义正 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2002年第2期30-34,共5页
利用纤维蛋白平板筛选、纤溶活性测定、SDS PAGE分析和体外溶栓实验等相结合的方法 ,成功地从豆豉中筛选到一株纤溶活性高达 5 2 0U/mL和具有良好体外溶栓效果的细菌菌株 (编号为DC 4 ) ,经鉴定为解淀粉芽孢杆菌 (Bacillusamyloliquefac... 利用纤维蛋白平板筛选、纤溶活性测定、SDS PAGE分析和体外溶栓实验等相结合的方法 ,成功地从豆豉中筛选到一株纤溶活性高达 5 2 0U/mL和具有良好体外溶栓效果的细菌菌株 (编号为DC 4 ) ,经鉴定为解淀粉芽孢杆菌 (Bacillusamyloliquefaciens)。SDS PAGE和纤维蛋白自显影表明该酶的分子量为 2 8kD ,其最适反应温度和 pH值分别为 4 2℃和 8.0 ,在 pH6~ 10较稳定。PMSF和盐酸苯甲醚能抑制其纤溶活性 ,而EDTA和EGTA不能抑制 ,表明该酶是一种丝氨酸蛋白酶。它溶解纤维蛋白的方式是直接溶解纤维蛋白 ,而不激活纤溶酶原 ,并且不水解血细胞。 展开更多
关键词 筛选 细菌菌体 豆豉 解淀粉芽孢杆菌 溶栓酶 酶学性质 血栓栓塞性疾病 溶栓药物
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植物内源激素的反相高效液相色谱法测定 被引量:64
17
作者 谢君 张义正 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期60-62,共3页
报道了以6_N_苄基腺嘌呤(BA)为内标的反相高效液相色谱法测定玉米素(ZT)、赤霉素(GA3)、激动素(KT)、3_吲哚乙酸(IAA)和脱落酸(ABA)等5种植物内源激素的条件 ;采用 μ BondapakC18 柱、乙腈 -甲醇 -0.6% (φ)乙酸流动相、检测波长254nm ... 报道了以6_N_苄基腺嘌呤(BA)为内标的反相高效液相色谱法测定玉米素(ZT)、赤霉素(GA3)、激动素(KT)、3_吲哚乙酸(IAA)和脱落酸(ABA)等5种植物内源激素的条件 ;采用 μ BondapakC18 柱、乙腈 -甲醇 -0.6% (φ)乙酸流动相、检测波长254nm ,建立了一种从植物中提取5种激素的样品处理方法 ,并测定了马铃薯块茎中的5种植物内源激素的含量。 展开更多
关键词 植物 内源激素 反相高效液相色谱 内标法 测定
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解淀粉芽孢杆菌DC-4豆豉溶栓酶成熟肽编码序列的克隆及表达 被引量:25
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作者 彭勇 张义正 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 2002年第3期285-289,共5页
利用PCR方法从解淀粉芽孢杆菌DC 4总DNA中扩增出豆豉溶栓酶 (DFE)成熟肽编码区片段 .测序结果表明 :DFE成熟肽编码区长 82 5bp,编码 2 75个氨基酸残基 ,分子量为 2 7.7× 10 3 ,推导的N’ -端氨基酸序列与豆豉溶栓酶N’ -端氨基酸... 利用PCR方法从解淀粉芽孢杆菌DC 4总DNA中扩增出豆豉溶栓酶 (DFE)成熟肽编码区片段 .测序结果表明 :DFE成熟肽编码区长 82 5bp,编码 2 75个氨基酸残基 ,分子量为 2 7.7× 10 3 ,推导的N’ -端氨基酸序列与豆豉溶栓酶N’ -端氨基酸测序结果完全一致 ,说明克隆到的基因确实是豆豉溶栓酶基因 .同源性分析表明 ,DFE成熟肽编码区的核苷酸和氨基酸序列与日本纳豆激酶的同源性分别为 80 .0 %和 86 .5 % ,这提示豆豉溶栓酶可能是一种新型的溶栓酶 .将表达质粒pET Nde转化E .coliBL2 1(DE3)中 ,IPTG可诱导表达大量的DFE融合蛋白 ,占菌体可溶性蛋白的 4 0 % ,主要以包涵体的形式存在 .图 3表 1参 展开更多
关键词 解淀粉芽孢杆菌DC-4 豆鼓 溶栓酶 成熟肽 编码序列 克隆 表达
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党参挥发油及脂溶性化学成分的研究 被引量:17
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作者 谢君 张义正 顾永祚 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第9期583-586,共4页
目的 对党参挥发油及脂溶性物质提取和分析。方法 建立乙醚冷浸 索氏提取 水蒸汽蒸馏的方法 ,提取物化学成分经GC分离 ,用GC MS进行鉴定。结果 本法收率是其它方法的 2 0~ 5 0倍 ;分离出 2 6 8种化合物 ,利用加标定性 ,GC MS联用... 目的 对党参挥发油及脂溶性物质提取和分析。方法 建立乙醚冷浸 索氏提取 水蒸汽蒸馏的方法 ,提取物化学成分经GC分离 ,用GC MS进行鉴定。结果 本法收率是其它方法的 2 0~ 5 0倍 ;分离出 2 6 8种化合物 ,利用加标定性 ,GC MS联用和计算机数据库检索鉴定出 6 7种物质。结论 本方法适于天然植物药物挥发油及脂溶性物质定性定量分析。所获数据 ,为党参药理药效作用的研究提供了科学的依据。 展开更多
关键词 党参挥发油 脂溶性物质 化学成分
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Smad3D和Smad7重组腺病毒载体的快速构建 被引量:4
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作者 秦建军 周清华 +6 位作者 覃扬 孙芝琳 赵峰 孙泽芳 王艳萍 易成 朱文 《中国肺癌杂志》 CAS 2003年第3期169-171,共3页
目的 简化重组腺病毒载体的构造方法 ,构建含Smad3DcDNA或Smad7cDNA的重组腺病毒载体 ,为下一步的基因治疗奠定基础。方法 以AdEasySystem为基础 ,应用序贯化学转化方法 ,在大肠杆菌E .coliBJ5 183体内将携带目的基因的穿梭质粒和骨... 目的 简化重组腺病毒载体的构造方法 ,构建含Smad3DcDNA或Smad7cDNA的重组腺病毒载体 ,为下一步的基因治疗奠定基础。方法 以AdEasySystem为基础 ,应用序贯化学转化方法 ,在大肠杆菌E .coliBJ5 183体内将携带目的基因的穿梭质粒和骨架质粒重组。结果 成功构建了重组腺病毒载体pAd Smad3D和 pAd Smad7及空腺病毒载体 ,并经酶切鉴定证实。结论 用序贯化学转化方法 ,可以快速高效地在大肠杆菌内构建重组腺病毒载体。 展开更多
关键词 Smad3D SMAD7 腺病毒载体 基因治疗 AD 生长因子
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